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1、煙草青枯病和黑脛病是我國(guó)煙草兩種主要的土傳病害之一。目前生產(chǎn)上主要采取綜合防治措施,包括栽培抗病品種、化學(xué)防治和生物防治等,但由于都存在著各自的局限性而無(wú)法從根本上進(jìn)行防治。生態(tài)防治將生態(tài)學(xué)原理應(yīng)用于病害的防治,是一種病害防治的新思維、新途徑。本研究采用從原位土壤的細(xì)菌、放線菌和真菌中篩選出對(duì)煙草青枯病、黑脛病等具有生物防治功能的高效拮抗菌株,并將其接種于農(nóng)業(yè)固體廢棄物中,在將其制作成有機(jī)肥過(guò)程中拮抗菌大量增生。合理施用有機(jī)肥或?qū)⒂袡C(jī)肥
2、與生物防治或抗性菌應(yīng)用相結(jié)合,將可以起到改善和修復(fù)土壤生態(tài)環(huán)境,提高土壤和煙株自身抗御病害的能力,減少肥料和化學(xué)農(nóng)藥使用,改善煙葉品質(zhì)和實(shí)現(xiàn)煙葉生產(chǎn)的可持續(xù)發(fā)展。 本文對(duì)煙草青枯病和黑脛病的拮抗菌進(jìn)行篩選,獲得6株防治青枯病和2株防治黑脛病潛能較大的拮抗菌,并以拮抗菌中抑制青枯病效果較好的菌株T5為考察目標(biāo),研究了其發(fā)酵條件和具有抑制煙草青枯病功能的煙草專用肥生產(chǎn)工藝,包括適宜的接種時(shí)期、接種量和大量繁殖所需的時(shí)間等因素研究;拮
3、抗黑脛病的機(jī)理。研究結(jié)果如下: 1、從福建煙田的病株中分離出煙草青枯病病原菌,從其原位土壤中經(jīng)過(guò)分離純化得到40種土壤菌株,經(jīng)過(guò)平板拮抗法篩選后得到對(duì)青枯病菌有明顯抑制作用的5株土壤細(xì)菌和1株真菌,分別命名為T(mén)1、T2、T3、T4、T5和T6,其中菌株T5的拮抗帶最大,菌落拮抗帶達(dá)10.2~21.4mm。 2、煙草青枯病拮抗細(xì)菌發(fā)酵條件的研究表明,抑制效果較好的拮抗菌T5在20~40℃范圍內(nèi)均能生長(zhǎng),最適宜的生長(zhǎng)溫度為3
4、5'(2;4~24h為對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期;pH值為5.0~9.0。進(jìn)行該菌的液體培養(yǎng)與擴(kuò)增時(shí),在相同的接種量下,250ml三角瓶的最佳裝瓶量為120mi。通過(guò)正交試驗(yàn)法獲較佳的液體培養(yǎng)基為蔗糖15g/L、牛糞堆肥200g/L、蛋白胨4g/L、牛肉膏1.5g/L。 3、以牛糞為原料生產(chǎn)抑制煙草青枯病的有機(jī)肥研究,選用了抑制煙草青枯病效果較好的T5菌株作為生產(chǎn)用接種體,通過(guò)控制堆肥的溫度和接種時(shí)間來(lái)生產(chǎn)有機(jī)肥。在80'C的水浴中連續(xù)加熱堆肥
5、2d將堆肥中的土著細(xì)菌降低到5.310gloCFU/g(干基),冷卻后立即接種,40~0下培養(yǎng)3d,得到約1210gloCFU/gf干基)的高濃度堆肥產(chǎn)品。大陽(yáng)試驗(yàn)表明:該有機(jī)肥有一定的防病作用,青枯病防治率在3.5%。 4、從河南省羅山縣和舞陽(yáng)縣煙區(qū)采集土壤樣品中,經(jīng)分離純化獲得6個(gè)真菌菌株,采用平板對(duì)峙法發(fā)現(xiàn)其中2株真菌對(duì)煙草黑脛病菌(Phytophthoranicotianae)有明顯的抑制作用,分別將其命名Ty-1和Ty
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