陽(yáng)春砂雜交種“春選1號(hào)-F4”的成分及藥效評(píng)價(jià)研究.pdf

1、目的:
　　陽(yáng)春砂雜交新種“春選1號(hào)-F4”（以下簡(jiǎn)稱春選1號(hào)-F4）為陽(yáng)春砂傳統(tǒng)優(yōu)良農(nóng)家栽培品種“長(zhǎng)果2號(hào)”（Amomum villosum Lour.‘Longfruit'，母本）與海南砂（父本）Amomum longiligularg T.L.wu雜交并經(jīng)過(guò)4代定向選育所得雜交品種，本課題組前期工作已對(duì)其種質(zhì)特性、植株形態(tài)、產(chǎn)量及分子遺傳特性進(jìn)行了調(diào)查研究，但尚未對(duì)其有效成分含量、揮發(fā)油含量及其組分進(jìn)行研究，更缺乏相關(guān)藥理藥

2、效實(shí)驗(yàn)研究。為此，本研究將通過(guò)測(cè)定春選1號(hào)-F4總揮發(fā)油含量、乙酸龍腦酯含量、揮發(fā)油組分及其相對(duì)含量，并根據(jù)砂仁的臨床功能主治，對(duì)春選1號(hào)-F4揮發(fā)油進(jìn)行藥理活性研究;此外，對(duì)春選1號(hào)-F4多糖進(jìn)行免疫調(diào)節(jié)活性研究，以期豐富及完善春選1號(hào)-F4的質(zhì)量評(píng)價(jià)，為解決傳統(tǒng)栽培類型陽(yáng)春砂授粉難題、擴(kuò)大陽(yáng)春砂種質(zhì)資源奠定基礎(chǔ)。
　　方法:
　　1.分別采用水蒸氣蒸餾法、GC法及GC-MS法測(cè)定、分析春選1號(hào)-F4與長(zhǎng)果2號(hào)揮發(fā)油含量、

3、有效成分及揮發(fā)油組成。研究?jī)烧哂行С煞趾考皳]發(fā)油組分的差異。從化學(xué)成分角度探討雜交新種的種質(zhì)特性。
　　2.采用番瀉葉致小鼠腹瀉模型，以蒙脫石散為陽(yáng)性藥，灌胃給予10％番瀉葉水煎劑，觀察并記錄4h內(nèi)小鼠排出的濕糞粒數(shù)，對(duì)比考察春選1號(hào)-F4及其長(zhǎng)果2號(hào)揮發(fā)油對(duì)小鼠腹瀉的影響。
　　3.建立二甲苯致小鼠耳廓腫脹模型，以醋酸地塞米松片為陽(yáng)性藥，計(jì)算各組小鼠耳腫脹度平均值和耳腫脹抑制率;考察春選1號(hào)-F4揮發(fā)油對(duì)小鼠耳郭腫脹的影

4、響。
　　4.建立醋酸致小鼠疼痛模型，以羅通定片為陽(yáng)性藥，考察春選1號(hào)-F4及長(zhǎng)果2號(hào)揮發(fā)油對(duì)小鼠扭體反應(yīng)潛伏期及小鼠疼痛扭體次數(shù)的影響。
　　5.通過(guò)分光光度法測(cè)量胃內(nèi)色素殘留物的吸光度值，計(jì)算相對(duì)胃內(nèi)色素殘留率;同時(shí)量取幽門(mén)括約肌至色素最前端及至盲腸的距離，計(jì)算小腸推進(jìn)比，考察春選1號(hào)-F4及長(zhǎng)果2號(hào)揮發(fā)油對(duì)正常小鼠胃排空及小腸推進(jìn)功能的影響。
　　6.取家兔離體空腸，利用生物機(jī)能系統(tǒng)記錄不同藥物對(duì)空腸自發(fā)活動(dòng)的影

5、響，考察春選1號(hào)-F4及長(zhǎng)果2號(hào)的揮發(fā)油對(duì)離體兔空腸自發(fā)活動(dòng)的影響。
　　7.以環(huán)磷酰胺誘導(dǎo)建立免疫能力低下小鼠模型，考察春選1號(hào)-F4多糖對(duì)免疫低下小鼠免疫器官重量的影響、對(duì)免疫低下小鼠巨噬細(xì)胞吞噬功能影響、對(duì)環(huán)磷酰胺誘導(dǎo)免疫低下小鼠脾溶血素生成的影響。
　　成果:
　　1.春選1號(hào)-F4果實(shí)揮發(fā)油（≥3％，mL/g）及主要有效成分乙酸龍腦酯的含量(≥9.0mg/g)均符合藥典要求，但春選1號(hào)-F4的揮發(fā)油含量較長(zhǎng)果

6、2號(hào)高并具有顯著差異，春選1號(hào)-F4所含乙酸龍腦酯含量略低于長(zhǎng)果2號(hào);兩者揮發(fā)油組分略有差異，共有相同組分14種。
　　2.春選1號(hào)-F4和長(zhǎng)果2號(hào)揮發(fā)油均具有顯著的止瀉作用，但兩者止瀉作用無(wú)顯著性差異(P＞0.05)，其止瀉效果與蒙脫石散相當(dāng);兩者揮發(fā)油均可極顯著減輕二甲苯致炎小鼠的耳腫脹度，其抗炎效果與醋酸地塞米松片相當(dāng)，且二者對(duì)二甲苯致耳腫脹的抑制作用相當(dāng);兩者揮發(fā)油具有顯著的鎮(zhèn)痛作用，鎮(zhèn)痛效果相當(dāng)，其鎮(zhèn)痛效果可媲美羅通定片

7、;春選1號(hào)-F4與其母本揮發(fā)油高劑量均顯著抑制小鼠胃排空，中、低劑量促進(jìn)小鼠胃排空，兩者對(duì)小鼠胃排空具有雙向調(diào)節(jié)作用，且效果相當(dāng);春選1號(hào)-F4與其母本揮發(fā)油高、中劑量均促進(jìn)小腸推進(jìn)作用，低劑量無(wú)明顯作用，兩者對(duì)小腸推進(jìn)作用效果相當(dāng)，且與西沙必利藥效相似;春選1號(hào)-F4與其母本揮發(fā)油均能顯著抑制家兔離體空腸自發(fā)活動(dòng)，且其效果優(yōu)于阿托品，春選1號(hào)-F4揮發(fā)油低劑量的抑制作用優(yōu)于長(zhǎng)果2號(hào)。
　　3.春選1號(hào)-F4多糖能增加免疫低下小鼠

8、的免疫器官重量、提高小鼠腹腔巨噬細(xì)胞的吞噬廓清能力和速度、提高小鼠血清溶血素抗體含量，促進(jìn)綿羊紅細(xì)胞所致小鼠抗體的生成。與長(zhǎng)果2號(hào)陽(yáng)春砂多糖免疫調(diào)節(jié)活性作用相當(dāng)。
　　結(jié)論:
　　上述研究表明，春選1號(hào)-F4主要化學(xué)成分與其母本相似;春選1號(hào)-F4揮發(fā)油及多糖具有與長(zhǎng)果2號(hào)相同的藥理作用，且活性相當(dāng)。說(shuō)明春選1號(hào)-F4不僅具有優(yōu)良的種質(zhì)特性，且藥效功能與其母本長(zhǎng)果2號(hào)相當(dāng)，作為雜交新種，值得推廣，本研究為解決陽(yáng)春砂自然授粉難