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文檔簡介
1、目的:肝臟至少承擔著5000種以上的生理功能,是人體最重要的器官之一。由于肝臟是多血管的實質性臟器,外傷時常伴有大量的出血,常用的經典止血方法有直接壓迫、結扎和電灼止血等,但死亡率仍達2%-8%,其中出血為最常見的原因。目前臨床肝臟外科手術常用的止血材料包括可吸收明膠海綿、氧化纖維素、膠原蛋白海綿和纖維蛋白膠,但由于有些產品或與創(chuàng)面粘附性差,或其準備耗時,在肝臟外傷手術中使用受限。殼聚糖(Chitosan)是甲殼素脫乙?;漠a物,天然無
2、毒、無抗原性、生物相容性好、可生物降解且具有一定的生物活性,殼聚糖經衍生化后具有良好水溶性、成膜性,抗炎、螯合重金屬等作用,在醫(yī)用材料領域應用前景廣闊。本實驗研究旨在討論殼聚糖基纖維的止血和促進創(chuàng)面愈合的效果,并對其作用機理進行初步探討,為其作為創(chuàng)傷止血愈創(chuàng)材料提供一定的理論依據。 方法:1、實驗所用殼聚糖基纖維性質評價,運用電位滴定、紅外光譜等方法對纖維的理化性質進行評價,通過溶血實驗、全身急性毒性實驗、皮內刺激實驗和細胞毒性
3、實驗評價了纖維的生物相容性;2、以新西蘭白兔為實驗動物,切除兔肝臟左葉部分組織,形成肝臟敞開型創(chuàng)面出血模型。設立實驗組、對照組和空白組,實驗組使用殼聚糖基纖維敷于創(chuàng)面處,空白組使用普通紗布,對照組使用速即紗。通過測定每組的止血成功率和出血量,評價纖維的止血效果;通過血液凝血酶原時間(PT)、部分凝血活酶時間(APTT)、凝血酶時間(TT)和纖維蛋白原(FIB)的測定、血液流變學、紅細胞聚集和血小板粘附等實驗研究了纖維對血液不同組分的作用
4、,初步探討了纖維的止血機理;3、以大白鼠為實驗動物,在鼠肝臟左葉上制造5mm×3mm×2mm的創(chuàng)面,實驗組將殼聚糖基纖維敷于創(chuàng)面上,對照組敷以速即紗,定期進行肉眼觀察和行組織學檢查,評價創(chuàng)面的粘連、炎癥浸潤和組織增生情況,以此反映纖維促進創(chuàng)面愈合的作用。以體外培養(yǎng)大鼠肝實質細胞BRL為研究對象,對纖維促肝細胞生長的作用進行評價。 結果:1、實驗所用殼聚糖基纖維符合醫(yī)用材料要求,無菌無熱原;溶血實驗表明殼聚糖基纖維無溶血作用,相容
5、性實驗表明纖維無急性毒性和皮內刺激性,細胞毒性實驗結果表明殼聚糖基纖維對L929成纖維細胞沒有毒性作用,并且對L929細胞增殖有一定的促進作用,其中以100μg/mL濃度時對L929細胞的促增殖作用最為顯著;2、以新西蘭白兔肝臟左葉部分切除為出血模型的實驗中,結果表明實驗組的止血成功率為100%,出血量為0.443±0.030g,在止血率和出血量指標上均優(yōu)于對照組和空白組(P<0.05);PT、FIB、APTT和TT的測定結果表明不同濃
6、度的殼聚糖基纖維溶液對PT和APTT沒有明顯的作用,能使FIB濃度明顯升高,且隨著溶液濃度的增加FIB濃度逐漸增加,TT隨溶液濃度的增加而縮短;血液流變學測定結果顯示殼聚糖基纖維溶液在高、中、低切變率下均能使全血粘度升高;殼聚糖基纖維能顯著促進紅細胞的沉降,且隨著溶液濃度的增加沉降量增加,同時能促進紅細胞發(fā)生疊連;殼聚糖基纖維能夠吸附血小板,促進血小板的聚集;3、在促進創(chuàng)面愈合的動物活體實驗中,組織學切片觀察結果表明實驗組材料體內降解時
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