微波與γ射線聯(lián)合的細(xì)胞生物學(xué)效應(yīng).pdf

1、目的：以人神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞株(SHG44)為生物模型，研究900MHz微波單獨(dú)及聯(lián)合γ射線照射對細(xì)胞的生物學(xué)效應(yīng)。 方法：將細(xì)胞隨機(jī)分為對照組、2mW/cm2、4mW／cm2和6mW／cm2微波暴露組(各組記為C，M2，M4和M6)。細(xì)胞輻照2h／d，連續(xù)照射3d后，聯(lián)合組再接受5Gy的γ射線照射。共分為單獨(dú)γ射線組、2mW／cm2+γ射線組、4mW／cm2+γ射線組和6mW／cm2+γ射線組(記為I，I+M2，I+M4和I+M6

2、)。γ射線(由蘇州大學(xué)輻照中心提供)采用60Co輻照，照射劑量5Gy，劑量率為1Gy／min。(1)采用MTT法和克隆法測定細(xì)胞的生長增殖情況。(2)利用流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞的周期和凋亡情況。(3)測定各組細(xì)胞超氧化物歧化酶(superoxide dismutase，SOD)活力和丙二醛(malondialdehyde，MDA)的含量。(4)用RT-PCR方法和western blot法檢測各組細(xì)胞中HSP70在mRNA和蛋白水平的表達(dá)。

3、(5) 以正常大鼠神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞為研究對象，選取部分上述指標(biāo)(MTT法和凋亡)進(jìn)行檢測。(6)用BPCL微弱發(fā)光測量儀檢測細(xì)胞在各生長階段，微波處理后超微弱發(fā)光的變化。 結(jié)果：(1)單獨(dú)微波輻射中，M4和M6組的細(xì)胞增殖活性顯著下降。聯(lián)合照射組中，I+M6組細(xì)胞的增殖活性與單撕射線組相比顯著下降。各單獨(dú)微波組細(xì)胞的克隆形成率均下降。聯(lián)合照射組中，與I組相比，I+M4與I+M6組的克隆率顯著下降。微波和γ射線對增殖活性和克隆率有協(xié)同

4、抑制作用。(2)與單獨(dú)微波組相比，聯(lián)合組G1期百分比顯著升高，而G2期和S期比例均有所下降，但無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。單獨(dú)微波輻射后，細(xì)胞凋亡率隨著微波強(qiáng)度的增加有上升的趨勢且呈直線相關(guān)，但各組間無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。與I組相比，I+M4和I+M6組的凋亡率顯著升高。與單獨(dú)微波組相比，各聯(lián)合組凋亡率顯著上升。微波與γ射線對細(xì)胞凋亡率存在協(xié)同促進(jìn)作用。(3)單獨(dú)微波組中，M6組的MDA含量上升，各單獨(dú)微波組SOD活性也有上升趨勢，但各組間沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。與

5、I組相比，各聯(lián)合組MDA含量均顯著上升，I+M6組的SOD活性顯著下降。微波與γ射線對MDA含量有協(xié)同促進(jìn)作用，對SOD活性的抑制有加強(qiáng)作用。(4)單獨(dú)微波照射后，HSP70的表達(dá)有上升的趨勢，但各組間無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。γ射線照射后HSP70表達(dá)顯著下降。微波和γ射線對細(xì)胞HSP70的表達(dá)無交互作用。(5)大鼠原代神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞的增殖活性經(jīng)微波、γ射線和聯(lián)合照射處理后，與對照組相比均沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，僅γ射線組和聯(lián)合組有下降的趨勢。各處理組均無

6、明顯凋亡發(fā)生。γ射線使ATP酶的活性顯著升高，微波和γ射線對ATP酶活性無交互作用。(6)細(xì)胞的超微弱發(fā)光在接種后第1d即顯著增強(qiáng)，一直維持到第5d后顯著下降。微波輻射后第1d發(fā)光強(qiáng)于對照組，第2d恢復(fù)到對照水平。H202處理后細(xì)胞超微弱發(fā)光顯著增強(qiáng)。 結(jié)論：(1)微波和γ射線均能抑制人神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞的增殖，且兩者之間有協(xié)同抑制作用。微波和γ射線還可對細(xì)胞氧化損傷產(chǎn)生協(xié)同和加強(qiáng)的作用。(2)聯(lián)合照射未明顯抑制大鼠原代神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞