微波與γ射線聯(lián)合的細(xì)胞生物學(xué)效應(yīng).pdf_第1頁(yè)
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1、目的:以人神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞株(SHG44)為生物模型,研究900MHz微波單獨(dú)及聯(lián)合γ射線照射對(duì)細(xì)胞的生物學(xué)效應(yīng)。 方法:將細(xì)胞隨機(jī)分為對(duì)照組、2mW/cm2、4mW/cm2和6mW/cm2微波暴露組(各組記為C,M2,M4和M6)。細(xì)胞輻照2h/d,連續(xù)照射3d后,聯(lián)合組再接受5Gy的γ射線照射。共分為單獨(dú)γ射線組、2mW/cm2+γ射線組、4mW/cm2+γ射線組和6mW/cm2+γ射線組(記為I,I+M2,I+M4和I+M6

2、)。γ射線(由蘇州大學(xué)輻照中心提供)采用60Co輻照,照射劑量5Gy,劑量率為1Gy/min。(1)采用MTT法和克隆法測(cè)定細(xì)胞的生長(zhǎng)增殖情況。(2)利用流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞的周期和凋亡情況。(3)測(cè)定各組細(xì)胞超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活力和丙二醛(malondialdehyde,MDA)的含量。(4)用RT-PCR方法和western blot法檢測(cè)各組細(xì)胞中HSP70在mRNA和蛋白水平的表達(dá)。

3、(5) 以正常大鼠神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞為研究對(duì)象,選取部分上述指標(biāo)(MTT法和凋亡)進(jìn)行檢測(cè)。(6)用BPCL微弱發(fā)光測(cè)量?jī)x檢測(cè)細(xì)胞在各生長(zhǎng)階段,微波處理后超微弱發(fā)光的變化。 結(jié)果:(1)單獨(dú)微波輻射中,M4和M6組的細(xì)胞增殖活性顯著下降。聯(lián)合照射組中,I+M6組細(xì)胞的增殖活性與單撕射線組相比顯著下降。各單獨(dú)微波組細(xì)胞的克隆形成率均下降。聯(lián)合照射組中,與I組相比,I+M4與I+M6組的克隆率顯著下降。微波和γ射線對(duì)增殖活性和克隆率有協(xié)同

4、抑制作用。(2)與單獨(dú)微波組相比,聯(lián)合組G1期百分比顯著升高,而G2期和S期比例均有所下降,但無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。單獨(dú)微波輻射后,細(xì)胞凋亡率隨著微波強(qiáng)度的增加有上升的趨勢(shì)且呈直線相關(guān),但各組間無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。與I組相比,I+M4和I+M6組的凋亡率顯著升高。與單獨(dú)微波組相比,各聯(lián)合組凋亡率顯著上升。微波與γ射線對(duì)細(xì)胞凋亡率存在協(xié)同促進(jìn)作用。(3)單獨(dú)微波組中,M6組的MDA含量上升,各單獨(dú)微波組SOD活性也有上升趨勢(shì),但各組間沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。與

5、I組相比,各聯(lián)合組MDA含量均顯著上升,I+M6組的SOD活性顯著下降。微波與γ射線對(duì)MDA含量有協(xié)同促進(jìn)作用,對(duì)SOD活性的抑制有加強(qiáng)作用。(4)單獨(dú)微波照射后,HSP70的表達(dá)有上升的趨勢(shì),但各組間無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。γ射線照射后HSP70表達(dá)顯著下降。微波和γ射線對(duì)細(xì)胞HSP70的表達(dá)無(wú)交互作用。(5)大鼠原代神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞的增殖活性經(jīng)微波、γ射線和聯(lián)合照射處理后,與對(duì)照組相比均沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,僅γ射線組和聯(lián)合組有下降的趨勢(shì)。各處理組均無(wú)

6、明顯凋亡發(fā)生。γ射線使ATP酶的活性顯著升高,微波和γ射線對(duì)ATP酶活性無(wú)交互作用。(6)細(xì)胞的超微弱發(fā)光在接種后第1d即顯著增強(qiáng),一直維持到第5d后顯著下降。微波輻射后第1d發(fā)光強(qiáng)于對(duì)照組,第2d恢復(fù)到對(duì)照水平。H202處理后細(xì)胞超微弱發(fā)光顯著增強(qiáng)。 結(jié)論:(1)微波和γ射線均能抑制人神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞的增殖,且兩者之間有協(xié)同抑制作用。微波和γ射線還可對(duì)細(xì)胞氧化損傷產(chǎn)生協(xié)同和加強(qiáng)的作用。(2)聯(lián)合照射未明顯抑制大鼠原代神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞

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