山綠茶的化學(xué)成分和生物活性研究.pdf

1、本課題對山綠茶進(jìn)行了系統(tǒng)的化學(xué)成分研究，在此基礎(chǔ)上，對分離得到的部分單體化合物進(jìn)行了相關(guān)的藥理活性篩選。主要包括以下幾個(gè)部分： 一、查閱了山綠茶的研究資料，對中藥山綠茶的化學(xué)成分、藥理活性及毒性、炮制、臨床研究等方面的研究進(jìn)展進(jìn)行了詳細(xì)的綜述，為山綠茶的進(jìn)一步研究與開發(fā)提供參考；對冬青屬植物的國內(nèi)外研究文獻(xiàn)進(jìn)行了系統(tǒng)地查閱，綜述了冬青屬植物化學(xué)成分和藥理活性方面的研究進(jìn)展，為冬青屬植物的研究和開發(fā)提供參考。 二、利用多種

2、色譜技術(shù)對山綠茶的化學(xué)成分進(jìn)行了系統(tǒng)的分離，利用現(xiàn)代光譜和波譜技術(shù)對分離得到的化合物進(jìn)行了結(jié)構(gòu)鑒定。 從山綠茶葉70％乙醇提取物中分離鑒定了81個(gè)化合物，其中，黃酮類化合物20個(gè)：圣草酚(BFl81)，槲皮素(BF191)，雙氫山奈酚(BTB3165)，(2R,3R)-dihydroquercetagetin(BTB 4121)，金絲桃苷(BTB954)，槲皮素-3-O-α-L-吡喃鼠李糖苷(BTB855)，槲皮素-3-0-β-

3、D-吡哺葡萄糖苷(BT551)，山奈酚-3-O-α-L-吡喃鼠李糖苷(BF1752)，楊梅素-3-O-α-L-吡喃鼠李糖苷(BTB9532)，山奈酚-7-O-β-D-P比喃葡萄糖苷(BTB955)，槲皮素-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(BTB115b)，木犀草素-7-Oβ-D-吡喃葡萄糖苷(BTB115a)，北美圣草素-7-D-β-D-吡喃葡萄糖苷(BT431)，Prunin(BT250922)，蘆丁(BT2-45S-1)，山奈酚-3-

4、O-β-刺槐雙糖苷(BT25143)，山奈酚-3-O-β-蕓香糖苷(BT25144)，Isorhamnetin 3-O-[α-hamopyranosyl-(1-6)-β-D-glucopyranoside(BT25145)，5，7-二羥基色原酮(BF171)，5，7-二羥基色原酮-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(BTB831)?？Х弱？鼘幩犷惢衔?0個(gè)：3'，5'-O-二咖啡?；鼘幩?BT381)，3'，5'-O-二咖啡酰基奎寧酸甲酯

5、(BTB734)，3'，5'-0.二咖啡?；鼘幩嵋阴?BTB408-8a)，3'5'-O-咖啡酰基奎寧酸丁酯(BTB408-11a)，4'，5'-O-二咖啡酰基奎寧酸(BT383)，4'，5'-O-二咖啡?；鼘幩峒柞?BTB735)，4’，5'-O-二咖啡?；鼘幩嵋阴?BTB408-8b)，4'，5'-O-咖啡?；鼘幩岫□?BTB408-11b)，3'.4'-O-二咖啡?；鼘幩峒柞?BTB641)，3'，4'，5'-O-三咖啡

6、酰基奎寧酸丁酯(BF1822)。 三萜類化合物19個(gè)：α-香樹脂素(C-6113)，烏索酸(C724S)，3β,19a-二羥基烏索-12-烯-24，28-二羧酸(B70E37)，3β，30-二羥基烏索-12-烯-24，28-二羧酸(BF53210)，3β，19α，30-三羥基烏索-12-烯-24，28-二羧酸(BF523)，3β，19α，20β-三羥基烏索-12-烯-24，28-二羧酸(BF5324)，3β，19α，22α-三羥

7、基烏索-12-烯-24，28-二羧酸(BF524)，3β，19α-二羥基-11-氧代烏索-12-烯-24，28-二羧酸(BF5323)，3β,19α-二羥基烏索-12-烯-23，28-二羧酸(BF5328)，2α，3β，19α，23-四羥基烏索-12-烯-28-羧酸(BF521)，2α，3β，23-三羥基烏索-12-烯-28-羧酸(BFS46)，2α，3β,19α，-三羥基烏索-12-烯-23，28-二羧酸(BF624a)，2α，3β,

8、19α-三羥基齊墩果-12-烯-23，28-二羧酸(BF624b)，2α，3β，19α-三羥基烏索-12-烯-24，28-二羧酸(BF6522)，3β，19α-二羥基齊墩果-12-烯-24，28-二羧酸(B70E36)，3β，29-二羥基齊墩果-12-烯-24，28-二羧酸(BF5329)，3β，19α，23-三羥基烏索-12-烯-24，28-二羧酸(BF653a)，3β，19α，23-三羥基齊墩果-12-烯-24，28-二羧酸(Br6

9、53b)，3β，19α，23，24-四羥基烏索-12-烯-28-羧酸(BF5326)。 三萜皂苷類化合物7個(gè)：3β，19α-二羥基烏索-12-烯-24，28-二羧酸-28-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(BF815)，3β，19α-二羥基烏索-12-烯-28-羧酸-3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(BF631)，3β，19α-二羥基齊墩果-12-烯-24，28-二羧酸-28-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(BF814)，3β，29-二羥基齊墩果

10、-12-烯-24，28-二羧酸-28-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(BF8213)，3β羥基烏索-12，18-二烯-24，28-二羧酸-28-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(BF643)，3β，30-二羥基烏索-12，19-二烯-24，28-二羧酸-28-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(BF8222)，3β,19α-二羥基齊墩果-12-烯-24，28-二羧酸-28-O-β-D-吡喃葡萄糖苷-(1-6)-β-D-吡喃葡萄糖苷(BF98272)。半萜苷(酯

11、)類化合物11個(gè)：2-羥甲基-3-咖啡酰氧-1-丁烯-4-醇(BT250621)，2-羥甲基-4-咖啡酰氧-1-丁烯-3-醇(BT250622)，2．咖啡酰氧甲基-1-丁烯-3，4-二醇(BT250623)，(2E)-2-甲基-2-丁烯-1，4-二醇-4-O-咖啡酸酯(BFl632a)，(2E)-2-甲基-2-丁烯-1，4-二醇-1-O-咖啡酸酯(BF1632b)，2-咖啡酰氧甲基-3-羥基-1-丁烯-4-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(BT

12、B1134)，2-羥甲基-3-咖啡酰氧-1-丁烯-4-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(BTB1222)，2-羥甲基-3-羥基．1-丁烯-4-D-β-D-(6”-O-咖啡?；?-吡喃葡萄糖苷(BTB 1132)，(2E)-2-甲基-2-丁烯-1，4-二醇-4-O-β-D-(6”-D-咖啡?；?一吡喃葡萄糖苷(BTB832)，1．O-咖啡?；?2D．2．甲基．2．丁烯．1，4．二醇．4．O-fl-D-吡喃葡萄糖苷(BTB833)，2．羥甲基．3

13、．咖啡酰氧一1．丁烯．4．O-fl-D．(6…．D．咖啡酰基)吡喃葡萄糖苷(BTB932)。其它類化合物14個(gè)：逆沒食子酸(BTB75)，鄰苯二甲酸二丁酯(BSl2)，咖啡酸(BTB408．2)，對羥基肉桂酸(BTB3153)，正三十一烷(C4．2)，正四十烷(C6111)，正三十二烷醇(C4．30)，正三十四烷醇(C5．1)，正十六烷酸(BSl31)，葡萄糖(BF811)，(+)．環(huán)合橄欖樹脂素(BTB4062)，Breyniosid

14、e A(BT250921)(2D．3．(3．羥甲基．苯基)．2．丙烯．1．醇(BTB31621)，∥一谷甾醇(C-62)。在這些化合物中，新化合物27個(gè)，其中三萜類化合物10個(gè)：BF523，BF524，BF5323，BF5324，BF5326，BF5329，BF53210，B70E36，BF653a，BF653b：皂苷類化合物6個(gè)：BF631，BF643，BF814，BF8213，BF8222，BF98272；半萜苷(酯)類化合物9個(gè)：

15、BT250621，BT250622，BT250623，BTBll32，BTB932，BFl632a，BFl632b，BTB832，BTB833；咖啡酰奎寧酸類化合物1個(gè)：BF1822；其它類化合物1個(gè)：BTB31621。其余化合物除C724S，BF814，BF815外，均為首次從該植物中分離得到。 三、對山綠茶中分得的22個(gè)三萜類單體化合物進(jìn)行了體外抗腫瘤活性和對巨噬細(xì)胞攝取低密度脂蛋白(LDL)影響的初篩，結(jié)果顯示這些三萜類單

16、體類化合物在10μmol/L的濃度時(shí)，對四種受試瘤株：HL-60人白血病瘤株、BGC-823人胃癌瘤株、Bel-7402人肝癌瘤株和KB人鼻咽癌瘤株均無顯著抑制作用；部分化合物BF631，B815，BF53210，BF6522，：BF5324，BF523能抑制巨噬細(xì)胞攝入LDL，顯示出潛在的抗動脈粥樣硬化活性；化合物BF8213，BF643在0.1mg/ml時(shí)，B70E37，B70E36，BF5326，BF653在0．5mg/ml時(shí)，則

17、能促進(jìn)巨噬細(xì)胞攝入LDL，而有可能促進(jìn)動脈粥樣硬化的形成；將活性篩選結(jié)果結(jié)合化合物的結(jié)構(gòu)進(jìn)行分析，化合物20(BF631)顯示出較強(qiáng)的抑制活性，提示三萜的3位連糖成苷可能有助于增強(qiáng)其抑制活性；其它化合物沒有發(fā)現(xiàn)明顯的結(jié)構(gòu)與活性的關(guān)系，需要進(jìn)一步研究和探討。 四、對冬青屬植物三萜類化學(xué)成分的結(jié)構(gòu)特征進(jìn)行了小結(jié)，同時(shí)對冬青屬三萜類化合物的波譜規(guī)律進(jìn)行了初步的探討，并將到目前為止從冬青屬植物中分離到的不同的三萜苷元的<'13>C-NM