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文檔簡介
1、小麥種質貴農(nóng)6號是用中燕96-3(母本)與貴農(nóng)21(父本)為雜交親本,從F2開始,運用常規(guī)育種方法并結合分子標記輔助選擇技術,嚴格按照矮稈、兼抗、優(yōu)質、高產(chǎn)等標準對雜種后代進行系統(tǒng)選育,經(jīng)多代選育而成的新種質。本文運用SCAR,SSR技術,采用分離群體分組分析法(BulkedSegregateAnalysis,BSA),對小麥抗病種質貴農(nóng)6號抗白粉病基因進行分子標記,驗證得出小麥貴農(nóng)6號含有抗白粉病基因Pm21,SCAR篩選出1條與抗白
2、粉病基因緊密連鎖的引物,并對抗病和感病群體進行了驗證。
1、以感病品種藁98143與抗病種質貴農(nóng)6號雜交,對雜交后代242個單株F2分離個體和雙親,以小麥白粉病當前流行生理小種315號接種進行抗病性鑒定。結果其中的183個單株表現(xiàn)抗病,59個單株表現(xiàn)感病,卡方(χ2)測驗表明,χ20=0.033<χ20.05,1=3.841,說明F2群體的抗感分離比例符合3R:1S,初步確定貴農(nóng)6號白粉病抗性是由一對顯性基因控制。
3、2、依據(jù)BSA方法建立抗病池和感病池,通過SCAR實驗,引物Pm21D,E能在抗病親本貴農(nóng)6號和抗病池中擴增出大小約為1265bp的標記帶,而在感病親本藁98143和感病池中不能擴增出該標記帶,經(jīng)3次重復均能得出相同的結果。用F2分離群體進行單株分析,結果抗病單株中均有此標記,感病單株均無此標記帶。說明貴農(nóng)6號含有抗白粉病基因Pm21,Pm21基因目前已被定位于6VS染色體上。
3、用特異引物D-L,R對貴農(nóng)6號抗病親本與藁9
4、8143感病親本和抗病池感病池及雜交后代的F2代抗感單株進行SCAR檢測。結果在貴農(nóng)6號和抗病池中都能擴增出140bp標記,而在感病親本和感病池中均缺乏該標記,用F2分離群體進行遺傳連鎖性分析,結果F2的183個抗病單株中有179個抗病單株有此標記,其余4個抗病單株和及F2的59個感病單株均無此標記,經(jīng)計算,標記與抗病基因間的遺傳距離為2.12±0.015cM,說明D-L,R的SCAR標記與貴農(nóng)6號抗白粉病基因緊密連鎖,在雜交育種過程中
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