川牛膝炮制前后有效成分比較研究和中藥飲片管理探討.pdf

1、目的:本實驗主要是通過比較酒炙對川牛膝飲片主要化學(xué)成分含量的影響,考察炮制前后各指標(biāo)成分的變化;建立炮制前后高效液相指紋圖譜并分析炮制前后指紋圖譜的其差異;同時對不同商品規(guī)格川牛膝及川牛膝藥材不同部位中有效成分的含量進(jìn)行比較。為研究川牛膝酒炙原理打下基礎(chǔ),為川牛膝酒炙規(guī)范化研究提供實驗數(shù)據(jù),為正確評定川牛膝商品規(guī)格,制定川牛膝質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)提供科學(xué)依據(jù),為中醫(yī)臨床正確應(yīng)用牛膝炮制品提供實驗依據(jù)。同時,對于目前中藥飲片GMP生產(chǎn)和認(rèn)證中存在的問

2、題進(jìn)行評價和分析。
　　方法:查閱古代文獻(xiàn)和現(xiàn)代文獻(xiàn)并進(jìn)行分析整理,總結(jié)前人炮制經(jīng)驗,撰寫文獻(xiàn)綜述。購入飲片和藥材,按文獻(xiàn)方法進(jìn)行炮制。采用HPLC法,篩選提取工藝和色譜條件,測定川牛膝藥材、不同規(guī)格飲片和酒炙品中阿魏酸、杯莧甾酮的含量,確定酒炙對川牛膝阿魏酸、杯莧甾酮的影響和不同規(guī)格川牛膝中阿魏酸、杯莧甾酮含量的差異。采用HPLC法,初步研究了川牛膝商品等級與其有效成分含量的聯(lián)系。采用HPLC法,建立川牛膝飲片和酒川牛膝飲片指紋

3、圖譜,并對其相似度進(jìn)行評價。查閱資料和實地調(diào)查,對中藥飲片GMP生產(chǎn)和認(rèn)證過程中出現(xiàn)的問題進(jìn)行總結(jié)和分析進(jìn)行了總結(jié)和分析。
　　結(jié)果:完成“川牛膝現(xiàn)代研究進(jìn)展”文獻(xiàn)綜述1篇。
　　確定阿魏酸含量測定的前處理方法:堿提酸沉后用氯仿萃取精制。阿魏酸的HPLC條件為:流動相甲醇:0.4％醋酸水(40:60),檢測波長360nm,流速1.0ml/min,柱溫為35℃。阿魏酸在2.368μg~7.104μg內(nèi)線性范圍良好(R2=0.9

4、999)。含量測定結(jié)果為川牛膝生品中阿魏酸含量約為0.574%～0.796%,平均含量為0.669%。川牛膝酒炙品中阿魏酸含量約為0.589%～0.849%,平均含量為0.713%。
　　確定杯莧甾酮含量測定的前處理方法為甲醇回流法。杯莧甾酮含量測定的色譜條件為:流動相甲醇:水(37:63)檢測波長243nm,流速1.0ml/min,柱溫35℃。杯莧甾酮在1.180μg~4.130μg范圍內(nèi)線性良好(R2=1)杯莧甾酮含量測定的結(jié)

5、果為:生品杯莧甾酮含量約為0.037%～0.062%,平均含量為0.048%,酒炙品杯莧甾酮含量為0.041%～0.081%,平均含量為0.054%。
　　川牛膝蘆頭中所含杯莧甾酮含量為0.024%,須根中杯莧甾酮含量為0.051%,杯莧甾酮含量一等藥材﹤二等藥材﹤?cè)人幉?阿魏酸含量三等藥材﹤二等藥材﹤一等藥材。川牛膝飲片統(tǒng)貨和選貨所含杯莧甾酮和阿魏酸無明顯差異。
　　確定川牛膝指紋圖譜的前處理方法為甲醇熱回流提取。建立了

6、川牛膝指紋圖譜的色譜方法,明確指出其含有7個共有峰,并建立其共有模式,初步建立了川牛膝指紋圖譜及其質(zhì)量評價方法。同時在290nm處發(fā)現(xiàn)生品和制品色譜圖的不同,為研究川牛膝酒炙原理起到了一定的推動作用。
　　撰寫出“中藥飲片GMP生產(chǎn)現(xiàn)狀思考”綜述。通過對中藥飲片GMP生產(chǎn)和認(rèn)證過程中出現(xiàn)的問題進(jìn)行總結(jié)和分析,就飲片行業(yè)發(fā)展的現(xiàn)狀和前景提出了自己的看法進(jìn)行了思考。
　　結(jié)論:酒炙對川牛膝化學(xué)成分產(chǎn)生了影響。酒炙后杯莧甾酮和阿魏