磁性高分子微球的制備及對質(zhì)粒DNA的分離純化.pdf

1、采用磁性高分子微球進行生物活性物質(zhì)的分離的技術(shù)，是一種高效集成化技術(shù)，這種技術(shù)是未來生物分離技術(shù)發(fā)展的方向。本文旨在制備一種具有超順磁性的交聯(lián)度較高的的單分散磁性高分子微球，并將其應(yīng)用于蛋白質(zhì)、質(zhì)粒等生物大分子的分離純化。 本文以甲基丙烯酸縮水甘油酯(GMA)為單體，二乙烯苯(DVB)為交聯(lián)劑，采用分散聚合法結(jié)合滲透法制備了交聯(lián)度為3-5％，粒徑為1-1.5μm的剛性單分散高分子微球，并成功引入高密度氨基基團；用PSA、ESEM

2、、VSM，IR等分析手段對磁性高分子微球的相應(yīng)性能進行了表征，結(jié)果顯示制備的微球粒徑均一，形態(tài)完整，表面光滑無孔，具有超順磁性，比飽和磁化強度為16.48emu/g，氨基修飾密度為4.432mmol/g dry resin。 為了檢驗微球的實際應(yīng)用效果，利用制備的磁性微球?qū)|(zhì)粒DNA進行了分離純化。微球的吸附過程快，1min便可達到平衡；在pH 6.5、鹽濃度0.5mol/L的吸附條件下，最高吸附量可以達到90.35μg/mg

3、dry resin；在pH 9、鹽濃度1.25mol/L、洗脫體積400μL的條件下，核酸的洗脫回收率達到97.2％；同時微球在重復(fù)利用時表現(xiàn)出了很高的操作穩(wěn)定性，也具有良好的化學(xué)穩(wěn)定性。微球?qū)|(zhì)粒DNA的純化效果良好。應(yīng)用其直接對細胞的堿裂解液進行吸附，1.5mL菌液中可分別回收19.4μg和24.8μg(加入RNA酶)質(zhì)粒。結(jié)果表明該磁性微球可以快速簡便的純化質(zhì)粒DNA。 為了獲得更小的粒徑，本文又選用無皂乳液聚合法結(jié)合溶脹