重慶市松材線蟲(chóng)病的發(fā)生及其松褐天牛傳播病原線蟲(chóng)的能力研究.pdf

1、松材線蟲(chóng)病(pine wilt disease)是一種重要的檢疫性病害，松褐天牛(Monochamus alternatus)是傳播松材線蟲(chóng)(Bursaphelenchus xylophilus)的主要媒介。松褐天牛成蟲(chóng)羽化后除體表附著有松材線蟲(chóng)外，大部分松材線蟲(chóng)分布在松褐天牛體內(nèi)，其中以頭、胸部最多，主要分布在氣管系統(tǒng)內(nèi)。當(dāng)松褐天牛取食補(bǔ)充營(yíng)養(yǎng)時(shí)，線蟲(chóng)幼蟲(chóng)從天牛取食造成的傷口進(jìn)入樹(shù)脂道。被松材線蟲(chóng)侵染的松樹(shù)往往又是松褐天牛的產(chǎn)卵對(duì)象。

2、翌年，在罹病松樹(shù)內(nèi)寄生的松褐天牛羽化時(shí)又會(huì)攜帶大量線蟲(chóng)，并“接種”到健康的樹(shù)上，導(dǎo)致病害的擴(kuò)散蔓延。松材線蟲(chóng)病已經(jīng)成為重慶市最具危險(xiǎn)性的檢疫性林業(yè)有害生物。對(duì)重慶市松材線蟲(chóng)病的分布危害和發(fā)生規(guī)律進(jìn)行研究，是科學(xué)控制該地區(qū)松材線蟲(chóng)病的理論基礎(chǔ)。掌握媒介昆蟲(chóng)松褐天牛在重慶地區(qū)的生物生態(tài)學(xué)特性以及傳播病原線蟲(chóng)的能力，對(duì)預(yù)防松材線蟲(chóng)病疫情擴(kuò)散和防治松褐天牛有著極其重要的意義。經(jīng)過(guò)近兩年的研究工作及其查閱資料，獲得了以下主要研究結(jié)果： 1

3、.松材線蟲(chóng)病在重慶市的發(fā)生動(dòng)態(tài)研究重慶市的涪陵、長(zhǎng)壽和萬(wàn)州區(qū)最早發(fā)生松材線蟲(chóng)病，江北、巴南和渝北區(qū)于2003年發(fā)生松材線蟲(chóng)病。其中渝北區(qū)通過(guò)鏟除，從2005年起連續(xù)3年未發(fā)現(xiàn)病死樹(shù)，巴南區(qū)也已經(jīng)連續(xù)2年未發(fā)現(xiàn)病死樹(shù)。2004年沙坪壩區(qū)和忠縣被確認(rèn)為松材線蟲(chóng)病疫區(qū)。2006年云陽(yáng)縣被確認(rèn)為松材線蟲(chóng)病疫區(qū)。截至2007年底，除渝北區(qū)和巴南區(qū)外，尚有7個(gè)區(qū)縣不同程度地發(fā)生松材線蟲(chóng)病。 3.重慶市松材線蟲(chóng)的分子檢測(cè)通過(guò)分離來(lái)自重慶市涪陵

4、、萬(wàn)州、云陽(yáng)和北碚地區(qū)的病死馬尾松樣品，采用形態(tài)和分子標(biāo)記特征相結(jié)合的方法對(duì)其進(jìn)行鑒定。形態(tài)觀察發(fā)現(xiàn)涪陵地區(qū)的分離線蟲(chóng)符合松材線蟲(chóng)的特征，而萬(wàn)州，云陽(yáng)和北碚地區(qū)的分離線蟲(chóng)更符合擬松材線蟲(chóng)的特征。通過(guò)選擇rDNA的部分核苷酸序列作為目的序列，用松材線蟲(chóng)和擬松材線蟲(chóng)的特異性引物，進(jìn)行PCR擴(kuò)增，并對(duì)PCR產(chǎn)物直接回收測(cè)序，擴(kuò)增片段ITS1基因序列信息顯示，擴(kuò)增所得的329bp片段與松材線蟲(chóng)相應(yīng)的片段序列同源性近乎一致，因此確定該線蟲(chóng)為松材線

5、蟲(chóng)。擴(kuò)增所得的206bp片段與擬松材線蟲(chóng)相應(yīng)的片段序列同源性一致。說(shuō)明引物1和引物2分別是松材線蟲(chóng)和擬松材線蟲(chóng)的特異性引物。由此進(jìn)一步確定從重慶涪陵馬尾松萎蔫病樹(shù)分離到的線蟲(chóng)為松材線蟲(chóng)，而從萬(wàn)州、云陽(yáng)和北碚分離到的線蟲(chóng)為擬松材線蟲(chóng)。 3.松褐天牛雌性識(shí)別信息素及天敵的初步研究松褐天牛雌性成蟲(chóng)可能存在接觸性信息素，雄蟲(chóng)依靠觸角、下唇須和下顎須等化感器來(lái)接受這些信號(hào)的刺激。本實(shí)驗(yàn)用正己烷提取性信息素后進(jìn)行生物測(cè)定，結(jié)果沒(méi)有觀察到引起雄蟲(chóng)的交

6、配行為，其原因可能在于該試劑并未真正抽提到松褐天牛的性信息素所致。松褐天牛性成熟后雌雄成蟲(chóng)依靠衰弱寄主釋放的強(qiáng)揮發(fā)性氣味聚集于寄主樹(shù)干上。根據(jù)初步調(diào)查，松褐天牛的天敵主要有微生物天敵，捕食天敵和寄生天敵等。天牛斑叩甲是松褐天牛的重要捕食性天敵。在林間比較多的寄生性天敵是管氏腫腿蜂，寄生于松褐天牛的幼蟲(chóng)和蛹。此外松褐天牛羽化后成蟲(chóng)體上常見(jiàn)有一種淡黃色的真菌，但未能確定其分類地位，有待進(jìn)一步的研究。 4.松褐天牛攜帶線蟲(chóng)數(shù)量的檢測(cè)實(shí)

7、驗(yàn)共檢測(cè)了101頭經(jīng)室內(nèi)羽化的松褐天牛成蟲(chóng)，其中93.1％的成蟲(chóng)攜帶有松材線蟲(chóng)，平均每頭成蟲(chóng)攜帶約2181條松材線蟲(chóng)，單頭天牛最多攜帶32096條松材線蟲(chóng)。多數(shù)松褐天牛攜帶的松材線蟲(chóng)在1000-9999條之間，雌雄成蟲(chóng)攜帶的線蟲(chóng)數(shù)量差異不大。但是攜帶量超過(guò)10000條的5頭成蟲(chóng)均為雄蟲(chóng)。松褐天牛在室內(nèi)的羽化期可分為羽化初期，羽化高峰期，羽化末期三個(gè)階段。松褐天牛在羽化初期攜帶的線蟲(chóng)數(shù)量最大，平均為4311條，且雄蟲(chóng)攜帶松材線蟲(chóng)的數(shù)量遠(yuǎn)大

8、于雌蟲(chóng)。其次為羽化末期，松褐天牛的平均攜帶量為1675條。在松褐天牛的羽化高峰期，天牛攜帶松材線蟲(chóng)的數(shù)量最少，平均每頭天牛僅攜帶有線蟲(chóng)778條，但此時(shí)雌蟲(chóng)攜帶松材線蟲(chóng)的數(shù)量多于雄蟲(chóng)。 5.松褐天牛傳遞松材線蟲(chóng)的時(shí)間動(dòng)態(tài)及其溫度對(duì)其傳播能力的影響松褐天牛補(bǔ)充營(yíng)養(yǎng)取食過(guò)程中，將攜帶的松材線蟲(chóng)通過(guò)松枝傷口傳遞到健康松樹(shù)，通過(guò)室內(nèi)飼養(yǎng)和統(tǒng)計(jì)分析研究松褐天牛成蟲(chóng)傳遞松材線蟲(chóng)的數(shù)量特征。結(jié)果表明，從成蟲(chóng)傳遞線蟲(chóng)數(shù)量的時(shí)間動(dòng)態(tài)看，松褐天牛羽化

9、后起初5天內(nèi)，松枝上檢測(cè)到的松材線蟲(chóng)很少，說(shuō)明成蟲(chóng)傳遞線蟲(chóng)數(shù)量并不明顯，隨著松褐天牛不斷地取食，松枝上的線蟲(chóng)數(shù)量迅速增多，到20 d時(shí)傳遞數(shù)量最多，每頭天牛約有700條松材線蟲(chóng)傳遞到健康松樹(shù)上，之后數(shù)量明顯下降。此外，研究了溫度對(duì)松褐天牛傳遞松材線蟲(chóng)數(shù)量的影響。試驗(yàn)共設(shè)置22℃、28℃和34℃ 3個(gè)溫度梯度。結(jié)果表明松褐天牛成蟲(chóng)的壽命隨溫度升高而縮短，其中雌蟲(chóng)壽命短于雄蟲(chóng)，且羽化進(jìn)度不太一致．多數(shù)松褐天牛攜帶的松材線蟲(chóng)量在1000～99