男性不育患者細(xì)胞遺傳學(xué)及分子遺傳學(xué)研究.pdf

1、目的:本實(shí)驗(yàn)通過(guò)較大樣本的病例對(duì)照研究,探討遺傳因素包括染色體異常,Y染色體AZF微缺失及AZFc部分缺失與男性不育的關(guān)系。
　　方法:對(duì)實(shí)驗(yàn)組482例生精障礙患者(無(wú)精癥患者206例、嚴(yán)重少精癥患者153例、少精癥患者123例)和對(duì)照組214例精液正常已生育男性進(jìn)行外周血細(xì)胞培養(yǎng)染色體核型分析,確定染色體數(shù)目和結(jié)構(gòu)異常與男性不育的關(guān)系,并對(duì)染色體核型正常的446例生精障礙患者和正常生精男性運(yùn)用多重PCR技術(shù)檢測(cè)AZF微缺失。同時(shí)

2、對(duì)未發(fā)生AZF微缺失的404例生精障礙患者和正常生精男性進(jìn)行AZFc區(qū)部分缺失檢測(cè),確定AZFc區(qū)部分缺失類型,并應(yīng)用聚合酶鏈反應(yīng)-限制性片段長(zhǎng)度多態(tài)性技術(shù)(PCR-RFLP)對(duì)存在gr/gr和b2/b3缺失的標(biāo)本進(jìn)行DAZ基因拷貝缺失分析。
　　結(jié)果:
　　1:染色體檢查:在482例生精障礙患者中,共發(fā)現(xiàn)36例患者存在染色體結(jié)構(gòu)和數(shù)目的異常,發(fā)生率為7.47％。其中無(wú)精癥、嚴(yán)重少精癥和少精癥患者的發(fā)生率分別為12.62%(

3、26/206)、5.23%(8/153)、1.62%(2/123)。在對(duì)照組中未發(fā)現(xiàn)染色體異常。
　　2:AZF微缺失檢測(cè):在446例生精障礙患者中檢測(cè)出42例AZF微缺失,缺失率為9.42%。,其中無(wú)精癥、嚴(yán)重少精癥、少精癥患者的發(fā)生率分別為12.22%(22/180)、11.72%(17/145)、2.48%(3/121)。少精癥患者的AZF基因缺失率與無(wú)精癥及嚴(yán)重少精癥患者之間在統(tǒng)計(jì)學(xué)上均存在顯著性差異(P<0.05),而無(wú)

4、精癥患者與嚴(yán)重少精癥患者之間無(wú)顯著性差異(P>0.05)。42例微缺失中最常見的是AZFd+c區(qū)共缺失,約占總?cè)笔У?4.76%(23/42)。在對(duì)照組中未發(fā)現(xiàn)AZF微缺失。
　　3:AZFc區(qū)部分缺失檢測(cè):在404例生精障礙患者和對(duì)照組中共發(fā)現(xiàn)84例部分缺失,其中41例gr/gr型缺失,42例b2/b3型缺失和1例b1/b3缺失。無(wú)精癥患者、嚴(yán)重少精癥患者和少精癥患者與正常生精男性的 b2/b3缺失率差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.

5、05),gr/gr缺失的發(fā)生率在生精障礙患者與正常生精男性間及各生精障礙組間相類似。
　　4:DAZ基因拷貝缺失檢測(cè):在gr/gr缺失和b2/b3缺失患者中共發(fā)現(xiàn)四種DAZ基因拷貝類型缺失DAZ1/DAZ2,DAZ3/DAZ4,DAZ1/DAZ4, DAZ2/DAZ3。生精障礙組與對(duì)照組間的DAZ3/DAZ4型缺失發(fā)生率具有顯著差異性(P<0.05)。
　　結(jié)論:無(wú)精癥和嚴(yán)重少精癥患者中存在較高頻率的染色體異常,先天性睪丸發(fā)