VEGF、HIF-1a、MVD、ENS在子宮腺肌病中的表達(dá)及意義.pdf

1、背景：
　　 子宮腺肌病是子宮內(nèi)膜異位癥的一種特殊型，是指子宮內(nèi)膜向子宮肌壁層彌漫性侵入生長(zhǎng)的病理過程[1]，又稱內(nèi)在性子宮內(nèi)膜異位癥，是婦科常見病，多發(fā)于30-50歲婦女[2]，該病發(fā)病機(jī)制不明，主要臨床表現(xiàn)為繼發(fā)性痛經(jīng)，并且進(jìn)行性加重，經(jīng)期延長(zhǎng)、月經(jīng)量過多、不孕等也是子宮腺肌病的主要臨床表現(xiàn)，多數(shù)患者伴隨貧血表現(xiàn)，給廣大婦女身心健康及生活質(zhì)量造成嚴(yán)重危害。該病近年來發(fā)病率有上升趨勢(shì)，且逐漸趨于年輕化[3]，藥物及保守手術(shù)治療

2、效果不理想，有效治療仍以子宮全切為主[4]，這對(duì)渴望生育的婦女臨床治療非常棘手，因此探討子宮腺肌病的發(fā)生與發(fā)展機(jī)制成為子宮腺肌病研究的熱點(diǎn)課題。
　　 大量研究表明子宮腺肌病的發(fā)生、發(fā)展與血管生成有關(guān)，韓燕華等[5]通過研究發(fā)現(xiàn)子宮腺肌病患者子宮內(nèi)膜及子宮肌層中血管面積和數(shù)量遠(yuǎn)遠(yuǎn)比正常子宮內(nèi)膜及肌層中血管面積和數(shù)量增加要多?？梢娮訉m腺肌病具有血管增生特性，[6]所以研究調(diào)控血管生成的一些重要因子如血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)、缺

3、氧誘導(dǎo)因子-1a（HIF-1a）、微血管密度(MVD)、血管內(nèi)皮抑素(ENS)等在子宮腺肌病組織中的表達(dá)水平，對(duì)認(rèn)識(shí)其發(fā)病機(jī)理具有重要意義。
　　 VEGF又稱血管通透因子(VPF)，是體內(nèi)外血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)特異的有絲分裂原，是從腫瘤細(xì)胞分泌物中分離出來的一種糖蛋白，該因子能促進(jìn)血管生成，同時(shí)具有強(qiáng)大的促進(jìn)血管內(nèi)皮增殖的作用。另外VEGF還具有增加毛細(xì)血管通透性的作用，誘導(dǎo)成纖維細(xì)胞的增生、誘導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞增值、促進(jìn)炎癥因子的生成、

4、促進(jìn)血漿蛋白的滲出等作用。VEGF具有活性強(qiáng)、專屬性高的特性，在眾多與血管生成相關(guān)的因子中處于核心地位，組織血管的活性依賴于VEGF在該組織中的表達(dá)水平[7，8]，而其它血管生成因子如ENS、MVD等對(duì)血管生成的作用大多是通過增強(qiáng)VEGF的在組織中的表達(dá)水平來反映[9，10]。
　　 HIF-1a能誘導(dǎo)微血管生成，增加組織無氧代謝，從而增強(qiáng)腫瘤細(xì)胞在缺氧環(huán)境下的轉(zhuǎn)移及生存能力[11]。有研究表明，HIF-1a的表達(dá)對(duì)VEGF的表

5、達(dá)有調(diào)節(jié)作用[12]。
　　 ENS最早從體外培養(yǎng)的鼠血管內(nèi)皮瘤細(xì)胞培養(yǎng)液中提取出來，是內(nèi)源性血管生成抑制劑，所有組織的血管內(nèi)、皮基底膜區(qū)、腺泡基底膜區(qū)及皮膚表皮基底膜區(qū)均有其粘合位點(diǎn)，很多因素均能促進(jìn)ENS的釋放，如缺氧及應(yīng)激狀態(tài)，以及受到γ-干擾素的攻擊等。ENS能與VEGF受體競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合，阻斷血管生成信號(hào)的傳導(dǎo)通路，從而抑制血管內(nèi)皮細(xì)胞的增值和生成，研究表明，對(duì)血管內(nèi)皮細(xì)胞的生長(zhǎng)繁殖抑制力度最強(qiáng)。
　　 MVD主要

6、用來評(píng)價(jià)血管的生成情況，對(duì)MVD的定量分析依賴于組織中CD34的表達(dá)，CD34可促進(jìn)血管形成，加速血管內(nèi)皮細(xì)胞的聚集和粘附，是血管內(nèi)皮細(xì)胞的特異性標(biāo)記物[13]，具有調(diào)控造血細(xì)胞的增生與分化的功能。CD34的表達(dá)與組織中MVD值正相關(guān)，CD34在組織中的表達(dá)越高，MVD值就越高，也預(yù)示新生毛細(xì)血管越豐富[14]。
　　 目的：
　　 本課題設(shè)計(jì)的目的是研究VEGF、HIF-1a、MVD、ENS在子宮腺肌病在位子宮內(nèi)膜、異

7、位子宮內(nèi)膜及正常子宮內(nèi)膜中的表達(dá)及相關(guān)性．探討子宮腺肌病的發(fā)病機(jī)制，提供一條新思路及有力的理論依據(jù)。
　　 研究方法：
　　 1、標(biāo)本的采集、制作、分組與篩選
　　 研究組：
　　 收集2009年8月至2011年8月，在忻州市人民醫(yī)院因子宮腺肌病行全子宮切除手術(shù)的病例共60例，其中月經(jīng)正常者18例，月經(jīng)過多者42例，無痛經(jīng)14例，痛經(jīng)46例，年齡36-51歲。將60例子宮腺肌病患者異位內(nèi)膜組織，其中分泌期

8、26例，增殖期34例;在位內(nèi)膜組織，其中分泌期26例，增殖期34例。
　　 所有病例術(shù)前3個(gè)月內(nèi)均無使用激素史，排除合并免疫系統(tǒng)疾病及其他內(nèi)分泌系統(tǒng)疾病，由病理科醫(yī)生對(duì)組織切片進(jìn)行確診，篩選無慢性炎性改變和未合并子宮內(nèi)膜息肉的組織切片作為研究組標(biāo)本。
　　 對(duì)照組：
　　 收集同期因CINⅢ級(jí)行全子宮切除術(shù)者（無月經(jīng)改變）48例，排除子宮腺肌病、子宮肌瘤、子宮內(nèi)膜異位癥的病例，年齡28歲-46歲，正常分泌期20例

9、，增殖期28例。
　　 所有組織切片經(jīng)病理科醫(yī)生核查排除子宮腺肌病，切片進(jìn)行HE染色后作為觀察組標(biāo)本。
　　 2、檢測(cè)方法
　　 用免疫組化SP法（鏈霉素抗生物素蛋白-過氧化物酶連接法）嚴(yán)格按操作程序進(jìn)行染色，陰性對(duì)照用PBS代替一抗進(jìn)行反應(yīng)，分別檢測(cè)VEGF、HIF-1a、MVD、ENS的表達(dá)。
　　 結(jié)果：
　　 1、VEGF在增殖期和分泌期內(nèi)膜、異位內(nèi)膜和在位內(nèi)膜組織中，表達(dá)水平均依次增強(qiáng)(

10、P＜0.05)，分泌期正常內(nèi)膜組織與在位內(nèi)膜組織中VEGF的表達(dá)水平明顯高于增殖期內(nèi)膜組織(P＜0.05)，VEGF表達(dá)水平在異位內(nèi)膜組織的分泌期和增殖期無明顯差異(P＞0.05)。
　　 2、異位內(nèi)膜組織中CD34水平明顯高于對(duì)應(yīng)的正常內(nèi)膜組織及在位內(nèi)膜組織中CD34水平(P＜0.05)。
　　 3、增殖期在位內(nèi)膜組織和正常內(nèi)膜組織中HIF-1a呈弱陽性表達(dá)或不表達(dá)，在異位內(nèi)膜組織中呈中度或強(qiáng)陽性表達(dá)，與在位內(nèi)膜及正常

11、內(nèi)膜組織中表達(dá)水平比較差異具有顯著性(P＜O.05);HIF-1a在分泌期的異位內(nèi)膜、在位內(nèi)膜及正常內(nèi)膜組織中的表達(dá)與增殖期比較差異具有顯著性(P＜0.05)，同時(shí)HIF-1a在異位內(nèi)膜、在位內(nèi)膜和正常內(nèi)膜組織中的表達(dá)依次增強(qiáng)(P＜0.05)。
　　 4、ENS在各組的表達(dá)差異均無顯著性(P＞0.05)。
　　 5、VEGF、與CD34'呈正相關(guān)性，HIF-1a與VEGF、CD34呈正相關(guān)性。
　　 結(jié)論：

12、>　　 1、VEGF、HIF-1a、CD34在子宮腺肌病異位內(nèi)膜及在位內(nèi)膜中呈高水平表達(dá)，提示新血管的形成與病灶局部血液供應(yīng)與子宮腺肌病發(fā)病有關(guān);VEGF在組織中的高水平表達(dá)，可促進(jìn)血管侵入子宮肌層彌漫性生長(zhǎng)，增強(qiáng)子宮內(nèi)膜血管生成的活性，促進(jìn)子宮肌層局部血液循環(huán)。
　　 2、子宮腺肌病下HIF-1a表達(dá)升高，可激活VEGF的轉(zhuǎn)錄，提高CD34的表達(dá)水平，使異位內(nèi)膜中生成新血管，從而參與疾病的發(fā)生與發(fā)展。
　　 3、子宮