黃花苜蓿不同品系的遺傳多樣性及其快速繁殖研究.pdf

1、本研究獲得的黃花苜蓿4個品系(品系代號分別為：A、B、C、D)及其5個相關(guān)種質(zhì)(種質(zhì)材料代號分別為：E、F、G、H、I)為試驗材料。首先采用SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳技術(shù)，進行了9份供試材料的種子貯藏蛋白遺傳多樣性研究，探討了它們之間的親緣關(guān)系。然后，以農(nóng)藝性狀表現(xiàn)突出的黃花苜蓿A、B、C三個品系的子葉、下胚軸為外植體，研究了不同培養(yǎng)基，對黃花苜蓿不同品系愈傷組織誘導(dǎo)、分化、生根以及繁殖系數(shù)的影響。對種子量較少的黃花苜蓿品系D，則以莖段

2、為外植體，研究了不同培養(yǎng)基對其繼代增殖以及生根的影響。同時進行了品系D的扦插試驗，探索了不同植物生長調(diào)節(jié)劑對其插條成活率的影響。結(jié)果表明： 1)以單株取樣的方法，進行黃花苜蓿不同品系及其相關(guān)種質(zhì)的種子貯藏蛋白電泳，共檢測到69條譜帶，總多態(tài)帶為56條，多態(tài)帶百分率為81.16％，表明在蛋白質(zhì)水平上，4個品系及其5個相關(guān)種質(zhì)間存在著豐富的多樣性，其中種質(zhì)H的遺傳多樣性最豐富。其次為種質(zhì)F，其余幾個供試材料的遺傳多樣性順序為：A>E

3、>D>C>B>I>G。 2)9份供試材料的總基因多樣性為0.2214，遺傳分化系數(shù)(Gst)為0.4929<0.51，表明其49.29％的遺傳變異存在于供試材料間，50.71％遺傳變異存在于供試材料內(nèi)。說明供試材料間變異程度高，遺傳分化較大。 3)基于不同品系及其相關(guān)種質(zhì)間的Nei’s遺傳距離，用UPGMA法進行聚類，結(jié)合種質(zhì)材料(品系)特性和地理來源，9份供試材料可以分為4類，首先是品系D單獨為一類，其次是種質(zhì)H和I聚

4、為一類，然后是C單獨聚為一類，最后品系A(chǔ)、B和種質(zhì)E、G、F聚為一類。 4)以群體取樣的方法，進行黃花苜蓿不同品系及其相關(guān)種質(zhì)的種子貯藏蛋白電泳，共檢測到58條譜帶，其中有38條共有帶，有20條表現(xiàn)出多態(tài)性，多態(tài)帶百分率為34.48％，低于單株取樣的研究結(jié)果。 5)通過對各種培養(yǎng)基的對比研究，篩選出適于黃花苜蓿品系A(chǔ)和B愈傷組織誘導(dǎo)的培養(yǎng)基為SH+2,4-D2.0mg/L+6-BA0.5mg/L；分化培養(yǎng)基為SM+KT0

5、.3mg/L+NAA0.2 mg/L+CH250 mg/L；其生根培養(yǎng)基為：MS培養(yǎng)基，其繁殖系數(shù)分別為：12.9和10,40。最適于品系C愈傷組織誘導(dǎo)的培養(yǎng)基為SH+2,4-D2.0mg/L+6-BA0.5mg/L；分化培養(yǎng)基為：SM+KT0.15mg/L+NAA0.25 mg/L；生根培養(yǎng)基為：MS培養(yǎng)基，繁殖系數(shù)是12.65。適于品系D增殖培養(yǎng)與生根的培養(yǎng)基均為SH+NAA0.2mg/L，增殖系數(shù)是6.35。 6)通過不同植物生長