拮抗真菌GLP-26的篩選及次生代謝產(chǎn)物的初步研究.pdf

1、作者采用高氏一號(hào)培養(yǎng)基從貴州、山東和廣東等省份的土樣中分離到156株真菌菌株和放線菌菌株，用抑制菌絲生長(zhǎng)速率法對(duì)其發(fā)酵液進(jìn)行了活性菌株的篩選研究。篩選出5株高活性菌株，并將 GLP-26菌株作為候選菌株進(jìn)行了系統(tǒng)的研究，主要研究結(jié)果如下：
　?。?）對(duì)貴州、山東和廣東等省份的土樣進(jìn)行菌株的分離純化，共純化到156株真菌菌株和放線菌菌株，采用抑制菌絲生長(zhǎng)速率法對(duì)156株菌株發(fā)酵液進(jìn)行了生物活性初篩，生測(cè)結(jié)果表明，篩選出5株活性較好的

2、菌株 SD-13、SD-21、GLP-7、GLP-17、GLP-26。對(duì)指示菌的抑制率均在80％以上，其中GLP-26菌株發(fā)酵液對(duì)多種病原菌的抑制率在85％以上，抗菌效果最好，故確定為主要的候選菌株。
　?。?）對(duì) GLP-26菌株發(fā)酵液進(jìn)行了抗菌譜的測(cè)定。抑制菌絲生長(zhǎng)速率法生物測(cè)定結(jié)果表明，GLP-26菌株發(fā)酵液對(duì)多種常見植物病原真菌具有較強(qiáng)的抑菌活性，其中對(duì)玉米小斑病菌(Bipolaris maydis)、黃瓜灰霉病菌(Bor

3、rytis cinerea)和油菜菌核病菌(Sclerotiua sclerotiorum)的抑制率達(dá)到95％以上，表現(xiàn)為廣譜抗菌性。盆栽試驗(yàn)結(jié)果表明，GLP-26菌株發(fā)酵液對(duì)小麥白粉病菌(Blumeria graminis)有一定的治療保護(hù)作用，分別為52.7％和51.6％。GLP-26菌株菌絲體提取物對(duì)玉米小班病菌、煙灰霉病菌、油菜菌核病菌和黃瓜灰霉病菌有較好的抑制效果，抑制率達(dá)到80％以上，對(duì)油菜菌核的抑制率達(dá)到95％以上。

4、>　?。?）以黃瓜灰霉病菌(Borrytis cinerea)、煙灰霉病菌(Botrytis cinerea)和油菜菌核病菌(Sclerotiua sclerotiorum)為指示菌，測(cè)定了GLP-26菌株發(fā)酵液的穩(wěn)定性。結(jié)果表明，GLP-26菌株連續(xù)培養(yǎng)10代，其發(fā)酵液的抗菌活性非常穩(wěn)定。GLP-26菌株無(wú)論是在4℃下，還是室溫下保存，所產(chǎn)生發(fā)酵液的抑菌活性都是穩(wěn)定的。菌株在4℃條件下保存60d后，其發(fā)酵液對(duì)病菌的抑菌活性基本沒(méi)有變化

5、。GLP-26菌株發(fā)酵液具有較好的熱穩(wěn)定性，而且在抗酸、堿方面，抗菌活性依然顯著。
　?。?）采用分子生物學(xué)方法5.8S rDNA序列分析和傳統(tǒng)的鑒定方法相結(jié)合，對(duì) GLP-26菌株進(jìn)行了分類鑒定，根據(jù)形態(tài)學(xué)特征與GLP-26菌株的5.8S rDNA序列的分析結(jié)果表明，GLP-26菌株屬于鐮刀菌屬，可能是腐皮鐮孢（Fusarium solani）的一個(gè)近緣種。
　?。?）采用色譜技術(shù)對(duì) GLP-26菌株發(fā)酵液及菌絲體中的活性