香蕉、胡椒和落葵上黃瓜花葉病毒分離物的血清學(xué)及分子鑒定.pdf

1、黃瓜花葉病毒(Cucumbermosaicvirus，CMV)是雀麥花葉病毒科(Bromoviridae)黃瓜花葉病毒屬(Cucumovirus)的典型成員。CMV是世界性分布范圍最廣、發(fā)生最普遍的植物病毒之一，可由蚜蟲和機(jī)械方式傳播，侵染100科1200多種單、雙子葉植物，對(duì)農(nóng)業(yè)生產(chǎn)危害較大。海南熱帶氣候條件適合植物生長，亦提供了病毒傳播介體孳生及病毒病傳播和擴(kuò)散的機(jī)會(huì)。香蕉、胡椒、西番蓮、黃燈籠辣椒等熱帶作物都遇到由CMV引起的病毒

2、病危害，開展熱帶作物CMV病毒株系及其進(jìn)化研究，對(duì)于掌握病害發(fā)生規(guī)律和科學(xué)防治具有重要作用。 香蕉種植業(yè)是海南支柱產(chǎn)業(yè)，CMV引起的香蕉花葉病是生產(chǎn)中的重要問題之一。作者從?？?、儋州、東方等地市縣采集了47個(gè)香蕉樣品，進(jìn)行了酶聯(lián)免疫吸附(ELISA)血清學(xué)和反轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(RT-PCR)分子鑒定，結(jié)果14個(gè)樣品呈CMV陽性。將14個(gè)陽性樣品的CMV分離物外殼蛋白(CP)基因進(jìn)行克隆測序，結(jié)果表明，所獲得的CMV香蕉分離物

3、與CMV亞組Ⅰ和亞組Ⅱ的CP基因核苷酸序列同源性分別為91.32％～99.54％和76.06％～77.73％，推導(dǎo)氨基酸序列同源性分別為94.04％～100％和80.37％～83.11％。 胡椒是重要的熱帶香辛作物，近年來胡椒花葉病有加重趨勢。作者從海南儋州采集胡椒罹病植株，進(jìn)行了ID-ELISA和巢式RT-PCR(NestedRT-PCR)檢測。血清學(xué)和CP基因序列分析表明，CMV胡椒分離物(CMV-China)屬亞組Ⅰ成員。

4、該分離物與印度CMV胡椒分離物(CMV-India)CP基因同源性不高，核苷酸序列和推導(dǎo)氨基酸序列同源性分別為92.54％和98.17％，屬于兩個(gè)不同的株系。胡椒花葉病CMV病原的鑒定和分子檢測研究國內(nèi)尚屬首次報(bào)道。 落葵是一種攀緣草本的食用蔬菜。作者從?？诓杉吮憩F(xiàn)花葉癥狀的落葵病樣，通過ID-ELISA和巢式RT-PCR檢測，發(fā)現(xiàn)病樣中存在CMV。將得到的分離物CMV-BaCP基因進(jìn)行測序并繪制系統(tǒng)進(jìn)化樹，結(jié)果表明，其與CM

5、V-Rauvolfia的親緣關(guān)系最近，它們共具一個(gè)祖節(jié)點(diǎn)，核苷酸同源性最高，達(dá)到95.43％，推導(dǎo)氨基酸同源性達(dá)到97.25％。本研究首次對(duì)落葵花葉病的病原進(jìn)行了報(bào)道，確定落葵為CMV的新寄主。 本研究建立了CMV的ELISA血清學(xué)和RT-PCR分子檢測方法。對(duì)海南香蕉上14個(gè)CMV分離物進(jìn)行了ELISA血清學(xué)檢測和CP基因序列分析；首次對(duì)海南胡椒和落葵CMV分離物進(jìn)行了ID-ELISA血清學(xué)和分子鑒定。本研究為進(jìn)一步開展熱帶地