新型分析儀器的研制及在藥物分析中的應(yīng)用.pdf

1、毛細(xì)管電泳(capillary electrophoresis，CE)是以毛細(xì)管為分離通道，高壓直流電場(chǎng)為驅(qū)動(dòng)力，根據(jù)組分的淌度和/或分配系數(shù)的差異進(jìn)行分離的一種分析技術(shù)。毛細(xì)管電泳具有分析速度快、分離效能高、樣品用量少、試劑消耗少、污染小、裝置簡(jiǎn)單、運(yùn)行成本低、分析樣品范圍廣等特點(diǎn)，現(xiàn)已應(yīng)用于醫(yī)學(xué)研究、食品分析、環(huán)境分析、藥物分析、蛋白質(zhì)分析、手性分離及單細(xì)胞分析等眾多研究領(lǐng)域中。高效液相色譜是目前應(yīng)用最為廣泛的分析技術(shù)之一，具有分離

2、效能高、選擇性高、檢測(cè)靈敏度高、儀器穩(wěn)定和發(fā)展成熟等特點(diǎn)，也已廣泛應(yīng)用在生物醫(yī)學(xué)、制藥、食品、環(huán)境等眾多領(lǐng)域，毛細(xì)管電泳和高效液相色譜均已成為科學(xué)研究領(lǐng)域中重要的分析方法。
　　 本論文對(duì)毛細(xì)管電泳和高效液相色譜的檢測(cè)系統(tǒng)進(jìn)行了研究，并用于藥物中有效成分的分離檢測(cè)。主要內(nèi)容如下：
　　 1.分別綜述了毛細(xì)管電泳和高效液相色譜的發(fā)展現(xiàn)狀，及兩種分析技術(shù)現(xiàn)有各種檢測(cè)器的研究和應(yīng)用，并對(duì)毛細(xì)管電泳雙檢測(cè)系統(tǒng)的研究進(jìn)展作了簡(jiǎn)要的

3、評(píng)述。
　　 2.建立了毛細(xì)管電泳非接觸電導(dǎo)法測(cè)定中藥制劑三黃片中鹽酸小檗堿、黃芩苷、大黃素和大黃酸等幾種有效成分的方法，研究和優(yōu)化了分離檢測(cè)條件，包括緩沖溶液的種類和濃度、pH、添加劑的種類和濃度等，還研究和優(yōu)化了影響非接觸電導(dǎo)檢測(cè)靈敏度的幾個(gè)參數(shù)值。最終優(yōu)化的緩沖溶液為含30％乙腈的12.0mmol/LTris-4.0mmol/LHCl(pH7.5)，分離電壓17.8kV，進(jìn)樣量30cm10s。檢測(cè)條件為：激發(fā)電壓60V(V

4、eff)，激發(fā)頻率30kHz。鹽酸小檗堿、黃芩苷、大黃素和大黃酸的線性范圍分別為：2.50～100、6.25～400、1.25～100和1.25～110μg/mL(所有r＞0.9990)；檢出限在0.012～0.037μg/mL范圍內(nèi)；日內(nèi)精密度的RSD值為1.8％～4.5％，日間精密度為4.4％～7.5％。該方法用于制劑中幾種成分的測(cè)定回收率達(dá)到94.2％～104％。本方法高效、快速、簡(jiǎn)便、成本低，樣品處理簡(jiǎn)單，可以用于中藥制劑中幾種

5、成分的質(zhì)量控制研究，為中藥制劑研究提供了可靠的新的分析方法。
　　 3.研究了毛細(xì)管電泳-非接觸電導(dǎo)/發(fā)光二極管(LED)誘導(dǎo)熒光雙檢測(cè)系統(tǒng)。非接觸電導(dǎo)檢測(cè)電極由兩根不銹鋼管做成，儀器組裝簡(jiǎn)單。熒光檢測(cè)的光學(xué)元件包括LED、濾光片和光敏二極管，不需要聚焦過程而建立光學(xué)檢測(cè)系統(tǒng)，同樣具有儀器組裝簡(jiǎn)單的特點(diǎn)。將兩種檢測(cè)器聯(lián)用，可以發(fā)揮各自優(yōu)勢(shì)，相互補(bǔ)充，能一次進(jìn)樣檢測(cè)多種不同性質(zhì)物質(zhì)，并且實(shí)現(xiàn)了同點(diǎn)同時(shí)檢測(cè)，有利于樣品峰的確證?？疾?/p>

6、了影響檢測(cè)性能的多種因素，優(yōu)化了分離檢測(cè)條件，采用熒光素鈉作為分析樣品考察了檢測(cè)系統(tǒng)性能。測(cè)定熒光素鈉的檢出限分別為熒光檢測(cè)6.7×10-9mol/L、非接觸電導(dǎo)檢測(cè)1.4×10-8mol/L(S/N=3)。
　　 4.研究了高效液相色譜非-非接觸電導(dǎo)/發(fā)光二極管(LED)誘導(dǎo)熒光雙檢測(cè)系統(tǒng)。檢測(cè)器設(shè)計(jì)組裝與第三章中介紹的雙檢測(cè)系統(tǒng)相同，同樣可以實(shí)現(xiàn)在同一分離通道上同點(diǎn)同時(shí)雙檢測(cè)，為樣品同時(shí)提供有關(guān)熒光和電化學(xué)信息，提高樣品檢測(cè)