SOCS-1、NF-κB、和COX-2在大腸癌中的表達(dá)及臨床意義.pdf

1、目的:結(jié)直腸癌(colorectalcarcinoma,CRC)是常見的消化道惡性腫瘤之一。隨著社會(huì)的發(fā)展,結(jié)直腸癌在全球的發(fā)病率和死亡率呈逐年上升趨勢(shì),嚴(yán)重危害著人類的健康。結(jié)直腸癌病因復(fù)雜,其發(fā)生機(jī)制涉及多個(gè)癌基因、抑癌基因、錯(cuò)配修復(fù)基因等。深入研究大腸癌的不同發(fā)生機(jī)制將對(duì)臨床治療有重要意義。
　　 SOCS-1是細(xì)胞因子信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)抑制分子(suppressorofcytokinesignaling,SOCS)家族中研究較深入

2、的一種新型抑癌基因,可抑制腫瘤細(xì)胞增殖,其異常表達(dá)與惡性腫瘤的發(fā)生密切相關(guān)。SOCS-1除負(fù)性調(diào)控JAK/STAT信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路外,還抑制多種細(xì)胞因子激活所介導(dǎo)信號(hào)通路。目前有研究表明SOCS-1除在急慢性白血病、腎病、肝癌中呈低表達(dá)或不表達(dá)外,還發(fā)現(xiàn)在大腸腫瘤中存在SOCS-1低表達(dá)甚至不表達(dá),這提示SOCS-1的低表達(dá)或不表達(dá)可能與腫瘤的發(fā)生發(fā)展相關(guān)。
　　 NF-κB是屬于Rel家族的轉(zhuǎn)錄因子,NF-κB激活后轉(zhuǎn)移到細(xì)胞核中

3、,調(diào)控下游目的基因,其中包括COX-2基因等。NF-κB參與腫瘤的發(fā)生,多項(xiàng)研究表明,NF-κB的高表達(dá)與乳腺癌、結(jié)腸癌、胃癌、肝癌等多種腫瘤的發(fā)生關(guān)系密切。而受NF-κB調(diào)控的COX-2基因本身也與惡性腫瘤的發(fā)生密切相關(guān),因此我們?cè)O(shè)想在大腸癌中NF-κB與COX-2是否發(fā)揮協(xié)同作用介導(dǎo)了腫瘤的發(fā)生和發(fā)展？
　　 COX-2是前列腺素(PG)合成過程中重要的限速酶,COX-2在細(xì)胞受到刺激時(shí)可快速表達(dá),參與多種病理生理過程。研究

4、表明COX-2還與腫瘤的發(fā)生、增殖、分化、浸潤(rùn)、轉(zhuǎn)移等方面關(guān)系密切。
　　 本實(shí)驗(yàn)通過檢測(cè)大腸癌組織、正常大腸粘膜中SOCS-1、NF-κB及COX-2蛋白表達(dá)情況,探討SOCS-1、NF-κB、COX-2三者之間的關(guān)系,及三者在大腸腫瘤發(fā)生發(fā)展中所起的作用與臨床病理特征之間的關(guān)系。
　　 方法:選取大腸癌標(biāo)本45例作為實(shí)驗(yàn)組,25例正常大腸粘膜組織作為對(duì)照組。采用免疫組化學(xué)(SP法)、蛋白質(zhì)免疫印跡(Westernbl

5、ot)檢測(cè)SOCS-1、NF-κB及COX-2蛋白的表達(dá)并結(jié)合患者的性別、年齡、腫瘤部位、分化程度、有無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及浸潤(rùn)情況等臨床病理因素進(jìn)行綜合分析。所有數(shù)據(jù)采用SPSS13.0進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析,計(jì)數(shù)資料采用卡方檢驗(yàn),計(jì)量資料采用t檢驗(yàn),P＜0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,Spearman等級(jí)相關(guān)分析三種蛋白表達(dá)間的相互關(guān)系
　　 結(jié)果:1、免疫組織化學(xué)染色(SP法)結(jié)果
　　 1.1、SOCS-1蛋白表達(dá)于細(xì)胞質(zhì),為黃色

6、或棕黃色顆粒,在正常大腸粘膜組織中表達(dá)率為68％(17/25),高于其在大腸癌組織中的表達(dá)率24.4％(11/45),差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。
　　 1.2、NF-κB蛋白在胞核和胞質(zhì)中均有表達(dá),以棕黃色顆粒為陽(yáng)性表達(dá)。正常大腸粘膜組織中陽(yáng)性表達(dá)率為12％(3/25),低于其在大腸癌組織中的表達(dá)率64.4％(29/45)。差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。
　　 1.3、COX-2蛋白表達(dá)于胞核,以棕黃色顆

7、粒為陽(yáng)性表達(dá)。COX-2在正常大腸粘膜中表達(dá)率為16％(4/25),低于其在大腸癌組織中的陽(yáng)性表達(dá)率82.2％(37/45)。差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。
　　 2、蛋白免疫印跡(Westernblot)結(jié)果
　　 在正常大腸組織粘膜、大腸癌組織中均檢測(cè)到不同程度的SOCS-1、NF-κB、COX-2蛋白表達(dá)。以β-actin為內(nèi)參蛋白,用美國(guó)UVP公司LabWorks4.5分析系統(tǒng)軟件對(duì)Western條帶進(jìn)行定

8、量分析。SOCS-1蛋白表達(dá)在正常大腸粘膜組織為(35.4694±8.04),高于癌組織蛋白表達(dá)(12.2735±5.11),兩者比較差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=-11.926,P＜0.05)。而NF-κB蛋白和COX-2蛋白在正常大腸粘膜組織中的表達(dá)分別為(23.8899±16.62)和(28.7915±10.23),低于癌組織表達(dá)(68.0449±15.22)和(87.1742±17.94),差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=-9.798,P＜0

9、.05)、(t=-12.684,P＜0.05)。
　　 3、大腸癌組織中SOCS-1、NF-κB、COX-2蛋白表達(dá)與腫瘤臨床病理特征之間的關(guān)系
　　 SOCS-1在病理類型為高中分化的大腸癌組織中陽(yáng)性表達(dá)為56.25％(9/16),明顯高于低未分化大腸癌組織中的表達(dá)6.9％(2/29)(P＜0.05)。而NF-κB在高中分化、未浸潤(rùn)漿膜及無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的大腸癌組織中陽(yáng)性表達(dá)分別為31.3％(5/16)、31.6％(6/1

10、9)、26.7％(4/15),明顯低于低未分化、浸潤(rùn)漿膜及有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的大腸癌組織中陽(yáng)性表達(dá)82.8％(24/29)、84.6％(22/26)、80％(24/30),差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。COX-2在高中分化、未浸潤(rùn)漿膜及無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的大腸癌組織中陽(yáng)性表達(dá)率分別為62.5％(10/16)、63.2％(12/19)、60％(9/15),明顯低于低未分化、浸潤(rùn)漿膜及有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的大腸癌組織中陽(yáng)性表達(dá)93.1％(27/29)、9

11、6.2％(25/26)93.33％(28/30),差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。SOCS-1的表達(dá)與患者的性別、年齡、腫瘤所在部位及腫瘤浸潤(rùn)深度方面無相關(guān)性(P＞0.05),NF-κB、COX-2的表達(dá)與患者的性別、年齡、腫瘤所在部位無相關(guān)性(P＞0.05)。
　　 4、SOCS-1、NF-κB、COX-2在大腸癌表達(dá)中的相互關(guān)系
　　 采用Spearman等級(jí)相關(guān)分析表明,SOCS-1與NF-κB蛋白在大腸癌組織

12、中呈負(fù)相關(guān)(r=-0.376,P＜0.01),NF-κB與COX-2呈正相關(guān)(r=0.549,P＜0.01),SOCS-1與COX-2負(fù)相關(guān)(r=-0.421,P＜0.01)。
　　 結(jié)論:大腸癌組織中普遍存在著SOCS-1、NF-κB及COX-2的異常表達(dá)。SOCS-1在大腸癌組織中表達(dá)偏低,在病理類型為低未分化的大腸癌組織中表達(dá)明顯低于其在高中分化大腸癌中的表達(dá)。NF-κB、COX-2在高中分化、未浸潤(rùn)漿膜及無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的大