DNA電化學(xué)活性-非活性轉(zhuǎn)換分子信標(biāo)的制備及其應(yīng)用研究.pdf

1、華東師范大學(xué)碩士學(xué)位論文DNA電化學(xué)活性非活性轉(zhuǎn)換分子信標(biāo)的制備及其應(yīng)用研究姓名：張帆申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：分析化學(xué)指導(dǎo)教師：程圭芳何品剛20080501摘要著介紹了分子信標(biāo)技術(shù)，從熒光分子信標(biāo)和電化學(xué)分子信標(biāo)兩個(gè)方面，分別對(duì)近年來分子信標(biāo)檢測目標(biāo)分子的原理、方法、應(yīng)用及發(fā)展趨勢等方面做了綜述；并對(duì)納米金顆粒的特性及在生物分析中的應(yīng)用作了簡介。最后闡述了本論文的目的意義及創(chuàng)新之處。第二章：新型電化學(xué)活性非活性轉(zhuǎn)換分子信標(biāo)的研制及其應(yīng)用

2、本章中，首先提出了一種基于電化學(xué)活性非活性分子轉(zhuǎn)換的新型分子信標(biāo)。此類分子信標(biāo)本身在實(shí)驗(yàn)選定條件下無電化學(xué)信號(hào)，與完全互補(bǔ)序列雜交后產(chǎn)生電化學(xué)信號(hào)，論文采用碳納米管修飾電極對(duì)雜交前后的電化學(xué)信號(hào)進(jìn)行檢測。實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)該分子信標(biāo)的電化學(xué)信號(hào)強(qiáng)度與完全互補(bǔ)序列的濃度在(60x10一mol／L14x10。6mol／L)范圍內(nèi)成線性關(guān)系，相關(guān)系數(shù)為09972，檢出限為lxl0嗡mol／L；其中，完全非互補(bǔ)序列的電化學(xué)響應(yīng)信號(hào)與空白信號(hào)基本相同，且對(duì)

3、一、二、三堿基錯(cuò)配序列的響應(yīng)信號(hào)與完全互補(bǔ)序列的響應(yīng)信號(hào)差別明顯，表明分子信標(biāo)可以實(shí)現(xiàn)對(duì)目標(biāo)DNA的定量檢測和在一定程度上鑒別堿基錯(cuò)配。第三章：基于納米金顆粒的高特異性DNA電化學(xué)活性非活性轉(zhuǎn)換分子信標(biāo)體系的研制及其應(yīng)用本章通過檸檬酸三鈉還原氯金酸的方法制備納米金顆粒，利用其與單鏈DNA和雙鏈DNA的不同相互作用，構(gòu)建高特異性的DNA電化學(xué)分子信標(biāo)。實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，完全非互補(bǔ)序列的電化學(xué)響應(yīng)信號(hào)與空白信號(hào)基本相同，完全互補(bǔ)序列與一、二、三堿基

4、錯(cuò)配序列電化學(xué)響應(yīng)差別明顯，且單堿基錯(cuò)配序列的電化學(xué)響應(yīng)信號(hào)僅為完全互補(bǔ)序列的10％左右，與以往的方法相比，二者的電信號(hào)差別明顯擴(kuò)大。這說明納米金顆粒與單鏈DNA和雙鏈DNA的不同相互作用大大提高了雜交反應(yīng)的特異性，完全有可能實(shí)現(xiàn)對(duì)單堿基突變基因片段的檢測，為臨床醫(yī)學(xué)診斷提供了一種行之有效的突變基因檢測方法。第四章：納米金顆粒增強(qiáng)DNA電化學(xué)活性非活性轉(zhuǎn)換分子信標(biāo)特異性的作用機(jī)理研究本章運(yùn)用電化學(xué)方法對(duì)納米金顆粒提高DNA檢測特異性的機(jī)