腹膜返折上方大腸癌腹腔微轉(zhuǎn)移的實驗檢測及臨床意義.pdf

1、目的：比較細胞學(xué)檢查、基于分支DNA(b-DNA)信號放大的基因表達定量檢測技術(shù)及半定量RT-PCR(SqRT-PCR)方法在大腸癌腹腔脫落癌細胞(ECC)檢測中的應(yīng)用,并探討大腸癌患者術(shù)中腹水或腹腔沖洗液(腹腔液)CEA、GCC和CD44v6 mRNA的表達情況及臨床意義,旨在為臨床上預(yù)測大腸癌腹腔微轉(zhuǎn)移尋找更加特異、敏感的檢測方法和指標(biāo)。
　　 方法：術(shù)中收集48例大腸癌患者和12例大腸良性病變病人的腹水或腹腔沖洗液,分別采

2、用基于b-DNA信號放大的基因表達定量檢測技術(shù)和SqRT-PCR方法檢測腹腔液中游離癌細胞CEA mRNA的表達,同時行腹腔沖洗液細胞學(xué)檢查(PLC),以篩選出對檢測大腸癌ECC較敏感的方法,進而用該法測定腹腔液中脫落癌細胞CEA、GCC和CD44v6 mRNA的表達,并結(jié)合臨床相關(guān)資料分析CEA、GCC和CD44v6 mRNA表達的臨床意義。
　　 結(jié)果：b-DNA技術(shù)和SqRT-PCR方法檢測大腸癌患者腹腔ECC的陽性率[4

3、3.8％(21/48),31.3％(15/48)]均高于PLC法[4.2％(2/48)],兩者差異顯著(P<0.01)；大腸癌組腹腔液CEA、GCC、CD44v6的表達陽性率分別為43.8％(21/48)、60.4％(29/48)、31.3％(15/48),總陽性率為72.9％(35/48),明顯高于腹腔液PLC的2％(1/48)；上述3項指標(biāo)在人大腸癌細胞株SW480中表達均為陽性,在陰性對照組中有1例CEA mRNA檢出陽性,其余均

4、為陰性表達；不同Dukes分期、腫瘤分化程度、漿膜侵犯程度、有否淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移對CEA、GCC和CD44v6 mRNA的陽性表達率差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05),不同腫瘤大小、患者年齡和性別差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。
　　 結(jié)論：b-DNA技術(shù)和SqRT-PCR方法檢測腹腔ECC各有優(yōu)缺點,均是預(yù)測大腸癌腹腔微轉(zhuǎn)移的有效方法,但b-DNA技術(shù)操作更為簡單,影響因素少,其相對定量結(jié)果更為可靠、精確；GCC、CD44v6與CE