APOOBEC3G蛋白在尖銳濕疣及幾種皮膚腫瘤中的表達(dá).pdf

1、人乳頭瘤病毒(human papilloma vivus,HPV)是一種有種屬和組織特異性的雙鏈閉環(huán)的脫氧核糖核酸(DNA)病毒,可引起肛門(mén)周圍、外陰生殖器的良惡性損害。HPV病毒持續(xù)性感染是造成尖銳濕疣(human papilloma vivus,CA)復(fù)發(fā)或?qū)m頸癌發(fā)生的重要因?yàn)?而HPV感染后局部細(xì)胞免疫功能低下是HPV持續(xù)性感染的根本因?yàn)樗凇?br>　　 載脂蛋白B mRNA編輯酶催化多肽樣蛋白3G(apolipoprotei

2、n B
　　 mRNA-editing enzyme catalytic polypeptide 3 protein G,APOBEC3G)是在人類免疫缺陷病毒的研究過(guò)程中發(fā)現(xiàn)的一種人類特有的天然免疫因子,屬于固有免疫家族成員。它不僅能抑制人類免疫缺陷病毒的復(fù)制,還能在瞬時(shí)表達(dá)乙型肝炎病毒的共轉(zhuǎn)染細(xì)胞體系中發(fā)揮顯著抑制病毒復(fù)制的生物學(xué)功能,并對(duì)來(lái)自不同宿主的其它逆轉(zhuǎn)錄病毒成員如鼠白血病病毒、猿免疫缺陷病毒等均具有抑制作用。因此,

3、APOBEC3G具有廣譜的抗病毒活性。但由于APOBEC3G的基因結(jié)構(gòu)及蛋白功能與胞嘧啶脫氨酶家族其它成員非常相似,其基因過(guò)度表達(dá)可能會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)基因組不穩(wěn)定性增加,從而參與惡性腫瘤的發(fā)生發(fā)展過(guò)程。
　　 本研究觀察AOPBEC3G蛋白在人體CA、某些皮膚惡性腫瘤等組織中的表達(dá)情況,并以銀屑病及正常皮膚組織作為對(duì)照,以初步探討APOBEC3G在HPV感染相關(guān)皮膚病中的作用。
　　 材料和方法
　　 一、研究對(duì)象<

4、br>　　 1、病史采集完整的CA組織12例,鱗狀細(xì)胞癌組織、基底細(xì)胞癌組織、角化棘皮瘤組織、銀屑病組織各10例,正常皮膚組織5例。
　　 2、各種組織病例性別及年齡具有可比性,無(wú)系統(tǒng)性疾病或其它皮膚病。
　　 二、材料
　　 1、APOBEC3G抗體(ab71634,ABCOM,UK)即用型S-P免疫組化試劑盒PBS緩沖液
　　 2、3-氨基聯(lián)苯胺(DAB)顯色系統(tǒng)
　　 三、實(shí)驗(yàn)方法

5、　　 制備6u厚石蠟切片?？乖邏簾嵝迯?fù)。先后滴加兔抗人多克隆抗EBA-抗,PBS作陰性對(duì)照。DAB顯色,蘇木素復(fù)染。脫水、透明、封片。光鏡下觀察。
　　 四、結(jié)果判定
　　 光鏡下(×400倍),每張切片隨機(jī)選取4個(gè)視野,以細(xì)胞膜或胞漿內(nèi)出現(xiàn)棕黃色或棕褐色顆粒為陽(yáng)性。采用半定量積分法,對(duì)細(xì)胞中陽(yáng)性細(xì)胞的染色強(qiáng)度及陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)進(jìn)行人工判定；顯微圖像分析系統(tǒng)采集圖像,分析陽(yáng)性表達(dá)積分光密度。取平均值,以積分光密度/高倍視野

6、為單位計(jì)算,獲得每例標(biāo)本陽(yáng)性染色的光密度值及陽(yáng)性百分比。
　　 五、統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
　　 采用SPSS16.0軟件包進(jìn)行數(shù)據(jù)處理。分類資料采用X2檢驗(yàn),計(jì)量資料采用LSD-t檢驗(yàn)。P<0.05認(rèn)為有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。
　　 結(jié)果：
　　 1、12例CA組織中,9例呈高表達(dá),1例弱表達(dá),陽(yáng)性率為91.67％；10例SCC及10例BCC組織中,各有4例呈高表達(dá),各有2例弱表達(dá),陽(yáng)性率均為60％；10例KA組織中,5例呈

7、高表達(dá),2例弱表達(dá),陽(yáng)性率均為70％。10例銀屑病中,有1例陽(yáng)性表達(dá)。正常皮膚無(wú)表達(dá)。
　　 2、CA、SCC、BCC、KA陽(yáng)性表達(dá)分布情況均與對(duì)照組織(銀屑病及正常皮膚)具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。CA及各種惡性皮膚腫瘤間陽(yáng)性表達(dá)無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,銀屑病與正常皮膚無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。
　　 3、CA組織光密度值及陽(yáng)性百分比最高,分別為17.48及33.51％; 銀屑病及正常皮膚組織最低,分別約為8.51％及7.82％；SCC、BCC、KA界

8、于中間。
　　 4、CA、SCC、BCC、KA的光密度值及陽(yáng)性百分比均與對(duì)照組織(銀屑病及正常皮膚)具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。CA與三種皮膚惡性腫瘤之間有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。三種皮膚腫瘤之間無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,銀屑病與正常皮膚組織無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。
　　 結(jié)論：
　　 1).APOBEC3G蛋白在大部分HPV感染的CA組織中,呈高水平表達(dá)。
　　 2).APOBEC3G蛋白在SCC、BCC、KA組織中,呈中等水平表達(dá)。