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1、[目的] 1.動(dòng)態(tài)觀察微囊化肝細(xì)胞移植對(duì)急性肝衰竭大鼠預(yù)后的影響。 2.動(dòng)態(tài)觀察微囊化肝細(xì)胞移植對(duì)CASEPASE-8和BID的影響及它們與預(yù)后的相關(guān)性。 [方法] 用0.15%胰酶分離原代肝細(xì)胞,海藻酸鈉-多聚賴氨酸-海藻酸鈉制備微囊。用D-氨基半乳糖誘發(fā)急性肝衰竭動(dòng)物模型,18小時(shí)后將造模動(dòng)物隨機(jī)分成3組:1組為模型組,2組為裸肝細(xì)胞移植組,3組為微囊化肝細(xì)胞移植。在造模后的24h、48h、72h、1
2、20h、168h,動(dòng)態(tài)觀察3組大鼠形態(tài)學(xué),監(jiān)測(cè)肝生化指標(biāo)。用免疫組織化學(xué)檢測(cè)CASEPASE-8和BID蛋白表達(dá)的動(dòng)態(tài)變化。 [結(jié)果] 1.原代肝細(xì)胞分離:大鼠肝細(xì)胞產(chǎn)量約為4.2×107/只,存活率大于86%;微囊化肝細(xì)胞存活率約82%。 2.微囊組ALT、AST和TB明顯下降,ALT在48h、72h、120h、168h與模型組有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),在48h和72h與裸肝組有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);
3、AST在48h、72h和120h與模型組有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),在48h和72h與裸肝組有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);TB在48h、72h、120h與模型組有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),在48h和72h與裸肝組有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。 3.微囊組CASEPASE-8和BID蛋白明顯降低,微囊組Caspase-8蛋白在48h、72h、120h和168h與裸肝組有顯著性差異(P<0.05);微囊組BID蛋白在48h、72
4、h、120h和168h與裸肝組有顯著性差異(P<0.05)。 4.CASEPASE-8和BID蛋白與ALT、AST均具有正相關(guān)性(P<0.05),CASEPASE-8和BID蛋白表達(dá)亦具有正相關(guān)性(P<0.05)。 [結(jié)論] 1.胰酶分離的原代肝細(xì)胞存活率和產(chǎn)量均較高,且費(fèi)用低廉,有廣闊的應(yīng)用前景。海藻酸鈉-多聚賴氨酸-海藻酸鈉制備微囊效果理想。 2.微囊化肝細(xì)胞移植可以明顯改善急性肝衰竭大鼠的肝生化功能
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