8-烷基小檗堿同系物的合成與藥理活性.pdf

1、小檗堿屬異喹啉類生物堿,為黃連等傳統(tǒng)中藥的主要活性成分,在臨床上被廣泛用于治療細(xì)菌感染引起的胃腸道疾病。現(xiàn)代科學(xué)研究顯示,小檗堿不但具有良好的體內(nèi)外抗菌作用,而且還表現(xiàn)出很好的調(diào)脂,降血糖,抗腫瘤,降血壓,抗傳染性原蟲和抗心率失常等多種藥理活性。本實(shí)驗(yàn)以小檗堿為先導(dǎo)化合物,通過在小檗堿分子C8位引入直鏈烷基的方法制備了不同碳鏈取代的8-烷基小檗堿同系物(Ber-C8-n,n=2,4,6,8,10,12,16),并采用相應(yīng)的實(shí)驗(yàn)方法研究了

2、Ber-C8-n的體外抗菌活性,體內(nèi)調(diào)脂活性和體內(nèi)毒性。實(shí)驗(yàn)方法與結(jié)果如下:
　　 1.8-烷基小檗堿同系物的合成與鑒定采用格氏試劑引入烷基的方法進(jìn)行中間體8-烷基二氫小檗堿的合成,研究了反應(yīng)溶劑(乙醚,二氧六環(huán)和四氫呋喃)對(duì)中間體8-烷基二氫小檗堿合成產(chǎn)率的影響。結(jié)果發(fā)現(xiàn)以THF為反應(yīng)溶劑時(shí)中間體的合成產(chǎn)率最高,與乙醚比較產(chǎn)率提高近4倍,最后以THF為溶劑順利制備了不同碳數(shù)烷基特別是長鏈烷基取代的Ber-C8-n。合成化合物的

3、分子結(jié)構(gòu)分別通過元素分析,UV,IR,1HNMR.和13CNMR等方法進(jìn)行了確認(rèn)。
　　 2.8-烷基小檗堿同系物的體外抗菌活性抑菌圈法研究了18種微生物(包括G+菌,G-菌和真菌)對(duì)Ber-C8-n的敏感性,并采用比濁法測定了6種敏感微生物的MIC值。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,G+菌對(duì)Ber-C8-n敏感性明顯強(qiáng)于G-菌和真菌；Ber-C8-n的抗菌活性規(guī)律為:在小檗堿C8位接入烷基后抗菌活性隨烷基碳數(shù)的增加而提高,但當(dāng)烷基碳數(shù)>8時(shí),B

4、er-C8-n的抗菌活性則隨烷基碳數(shù)的增加而下降,即8-辛基小檗堿(Ber-C8-8)在同系物中表現(xiàn)出最高抗菌活性。
　　 3.8-烷基小檗堿同系物的抗菌活性差異的機(jī)理分別以兔血紅細(xì)胞及細(xì)胞膜,枯草桿菌和大腸桿菌完整細(xì)胞為實(shí)驗(yàn)材料,采用比色法和熒光分析方法研究了Ber-C8-n對(duì)兔血紅細(xì)胞的溶血作用,Ber-Cg-n對(duì)兔血紅細(xì)胞膜和完整細(xì)菌細(xì)胞膜流動(dòng)性以及Ber-C8-n對(duì)膜蛋白或菌體蛋白熒光的淬滅作用。
　　 實(shí)驗(yàn)結(jié)果

5、表明,抗菌活性越大的Ber-C8-n,其溶血作用越大:抗菌活性越大的Ber-C8-n,對(duì)細(xì)胞膜流動(dòng)性的干擾作用和膜蛋白或菌體蛋白熒光的淬滅作用也越強(qiáng)。如在所有同系物中抗菌活性最強(qiáng)的Bet-C8-8和Bet-C8-6在紅細(xì)胞溶血能力,細(xì)胞膜流動(dòng)性的干擾能力和對(duì)膜蛋白或菌體蛋白熒光的淬滅能力上均表現(xiàn)為最強(qiáng)。定量分析與比較Ber-C8-n對(duì)枯草桿菌(G+菌)和大腸桿菌(G-菌)完整細(xì)菌細(xì)胞膜及菌體蛋白的影響作用發(fā)現(xiàn),相同Ber-C8-n對(duì)枯草

6、桿菌(G+菌)細(xì)胞膜流動(dòng)性的影響能力遠(yuǎn)大于對(duì)大腸桿菌(G-菌)膜流動(dòng)性的影響能力,但對(duì)兩類細(xì)菌完整細(xì)胞蛋白的熒光淬滅作用無明顯差異。
　　 4.8-烷基小檗堿同系物的體內(nèi)調(diào)脂活性實(shí)驗(yàn)性高脂血癥大鼠為動(dòng)物模型,對(duì)Ber-C8-n的調(diào)脂活性及興趣分子8-十六烷基小檗堿調(diào)脂作用的劑量效應(yīng)進(jìn)行了研究。
　　 實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,接入親脂性烷基有利于8-烷基小檗堿同系物體內(nèi)調(diào)脂活性的發(fā)揮。長鏈烷基化合物8-月桂基小檗堿和8-十六烷基小檗

7、堿的調(diào)脂活性高于小檗堿和其他8-烷基小檗堿同系物。與鹽酸小檗堿比較,對(duì)高脂血癥實(shí)驗(yàn)大鼠TC均值的下調(diào)能力分別提高了83％和97％,其它相關(guān)血清指標(biāo)亦有明顯改善趨勢(shì)。劑量效應(yīng)實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,8-十六烷基小檗堿能劑量依賴性的降低高脂血癥實(shí)驗(yàn)大鼠血清TC和TG含量,減少腹腔脂肪和肝臟脂肪的積累,提高血清HDL-C含量,并能有效改善高脂血癥實(shí)驗(yàn)大鼠的動(dòng)脈硬化指數(shù),食物利用率等相關(guān)病理指標(biāo)。
　　 5.8-烷基小檗堿同系物的體內(nèi)毒性昆明種小

8、鼠為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型,采用改良寇氏法測定了8-烷基小檗堿同系物的LD50值,并以SD大鼠為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物,經(jīng)口125mg/kg.bw劑量處理6周,對(duì)興趣分子8-辛基小檗堿,8-月桂基小檗堿和8-十六烷基小檗堿的肝腎毒性進(jìn)行了初步評(píng)價(jià)。
　　 實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,接入短鏈烷基后8-烷基小檗堿同系物的LD50值與其先導(dǎo)化合物鹽酸小檗堿比較大幅度減小,即毒性大幅增加。但隨著接入烷基碳數(shù)的增加,8-烷基同系物的LD50值隨之增加,即毒性逐步下降。興趣分