經(jīng)皮激光汽化椎間盤減壓術(shù)(PLDD)治療腰椎間盤突出癥的實(shí)驗(yàn)及臨床研究.pdf

1、目的：運(yùn)用疫免組化等方法通過(guò)對(duì)不同年齡實(shí)驗(yàn)犬椎間盤內(nèi)組織學(xué)、細(xì)胞學(xué)變化進(jìn)行觀察，探索不同年齡犬椎間盤內(nèi)組織的差異并由此探討自發(fā)性犬退變模型的可行性與科學(xué)性；在上述研究基礎(chǔ)上，采用環(huán)鋸法制備腰椎間盤突出癥犬模型，應(yīng)用PLDD 技術(shù)對(duì)不同年齡犬椎間盤突出癥模型進(jìn)行干預(yù)，觀察術(shù)后1 月內(nèi)犬椎間盤內(nèi)組織學(xué)、細(xì)胞學(xué)的變化，由此研究PLDD 技術(shù)對(duì)腰椎間盤突出癥椎間盤內(nèi)環(huán)境的影響。
　　 方法：實(shí)驗(yàn)一：2 只青年犬（8 月齡）和2 只老年犬

2、（6年齡）處死并各取4 個(gè)椎間盤組織進(jìn)行固定、包埋、切片，通過(guò)大體病理觀察了解兩組椎間盤的組織結(jié)構(gòu)變化；應(yīng)用HE 染色法觀察不同年齡犬椎間盤光鏡下細(xì)胞形態(tài)學(xué)的變化；采用免疫組化法觀察不同實(shí)驗(yàn)犬細(xì)胞調(diào)亡、IV 型膠原含量的變化，并對(duì)髓核細(xì)胞Bax、Bcl-2 調(diào)亡調(diào)控基因陽(yáng)性表達(dá)進(jìn)行分析。實(shí)驗(yàn)二：16 只雜種犬分為空白對(duì)照組、模型對(duì)照組、激光治療I 組、激光治療II 組，前三組應(yīng)用青年犬（8月齡），激光治療II 組應(yīng)用老年犬（6年齡），后

3、三組在自發(fā)性椎間盤退變模型基礎(chǔ)上采用環(huán)鋸法制備腰椎間盤突出癥犬模型，10 周后對(duì)激光治療兩組進(jìn)行PLDD 治療，四組分別于術(shù)后即刻、術(shù)后7 天，術(shù)后1 個(gè)月按計(jì)劃處死，記錄造模手術(shù)及PLDD 術(shù)中、術(shù)后實(shí)驗(yàn)犬活動(dòng)征象的變化，并對(duì)四組椎間盤組織進(jìn)行大體病理觀察，通過(guò)對(duì)椎間盤組織固定、包埋、切片、染色，觀察不同時(shí)段四組椎間盤內(nèi)髓核細(xì)胞形態(tài)學(xué)的變化（HE 染色法）；髓核細(xì)胞調(diào)亡情況（TUNEL 法）；應(yīng)用免疫組化法（SABC 法）觀察髓核細(xì)胞

4、Bax、Bcl-2 調(diào)控基因的變化及組織中IV 型膠原細(xì)胞變化，以陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)目、面積、灰度變化為檢測(cè)指標(biāo)。
　　 結(jié)果：實(shí)驗(yàn)一：1、青年犬與老年犬在大體病理觀察及HE 染色細(xì)胞形態(tài)學(xué)變化上有著明顯差異；2、老年犬的細(xì)胞調(diào)亡指數(shù)明顯高于青年犬組；3、老年犬的髓核細(xì)胞Bax 表達(dá)陽(yáng)性率高于青年犬，Bcl-2表達(dá)陽(yáng)性率老年犬較低；4、老年犬椎間盤組織中IV 型膠原含量明顯低于青年犬。實(shí)驗(yàn)二：1、造模三組及激光治療兩組大體病理觀察與空白

5、對(duì)照組比較有明顯區(qū)別； 2、HE 染色光鏡下觀察可見(jiàn)腰椎間盤突出癥造模術(shù)后及PLDD 術(shù)后椎間盤組織學(xué)和細(xì)胞形態(tài)學(xué)發(fā)生了變化，造模組纖維環(huán)缺損區(qū)有髓核突出和退變，髓核細(xì)胞中脊索細(xì)胞、軟骨細(xì)胞交互存在。PLDD 治療兩組術(shù)后即刻汽化空腔形成，邊緣纖維環(huán)、軟骨終板無(wú)明顯變化。術(shù)后7 天，椎間盤內(nèi)有炎性細(xì)胞浸潤(rùn)，術(shù)后1 個(gè)月，髓核空腔縮小，軟骨組織替代。老年LDH 犬模型PLDD術(shù)后和青年犬椎間盤的組織學(xué)變化差異較明顯。3、PLDD 術(shù)后激光

6、治療組細(xì)胞調(diào)亡Bax、Bcl-2 調(diào)控基因表達(dá)陽(yáng)性細(xì)胞個(gè)數(shù)、面積、灰度均較空白對(duì)照組上升，并于術(shù)后7 天達(dá)到高峰，術(shù)后1 個(gè)月，上述指標(biāo)漸趨恢復(fù)正常；4、PLDD 術(shù)后髓核組織中IV 型膠原細(xì)胞個(gè)數(shù)、面積、灰度均較空白對(duì)照組下降。術(shù)后1 月，漸恢復(fù)正常，老年犬的恢復(fù)明顯較青年犬差。
　　 結(jié)論：實(shí)驗(yàn)一：1.老年犬與青年犬在大體病理、細(xì)胞學(xué)形態(tài)變化、髓核細(xì)胞調(diào)亡指數(shù)、椎間盤內(nèi)IV 型膠原含量及髓核Bax、Bcl-2 表達(dá)陽(yáng)性率方面

7、均有明顯差異；2.自發(fā)性動(dòng)物模型具有科學(xué)性，可以通過(guò)不同年齡犬來(lái)模擬正常及退變椎間盤。實(shí)驗(yàn)二：1.在自發(fā)性退變?nèi)Ｐ突A(chǔ)上采用環(huán)鋸法制備腰椎間盤突出癥動(dòng)物模型是一種科學(xué)、有效的腰椎間盤突出癥動(dòng)物模型制備方法。2.PLDD 術(shù)后，椎間盤組織的大體病理觀察及細(xì)胞形態(tài)學(xué)受到明顯影響；細(xì)胞形態(tài)學(xué)變化提示PLDD具有較高安全性；3.PLDD 技術(shù)對(duì)椎間盤內(nèi)細(xì)胞調(diào)亡，IV 型膠原含量及髓核細(xì)胞Bax、Bcl-2 調(diào)控基因有明顯影響，老年腰椎間盤突出

8、癥犬模型椎間盤受影響明顯；4.PLDD 術(shù)后椎間盤組織學(xué)、細(xì)胞學(xué)的指標(biāo)隨時(shí)間延長(zhǎng)逐漸恢復(fù)，老年椎間盤恢復(fù)較青年椎間盤差，提示青少年P(guān)LDD 治療效果應(yīng)優(yōu)于中老年患者。
　　 臨床部分
　　 目的:研究一：通過(guò)對(duì)PLDD 術(shù)后患者的療效學(xué)及影像學(xué)變化進(jìn)行研究，探討療效學(xué)與影像學(xué)間的相關(guān)性，為PLDD 療效提高提供理論依據(jù)；研究二：通過(guò)對(duì)PLDD 術(shù)后早期并發(fā)癥進(jìn)行治療，探討PLDD 中醫(yī)因病機(jī)的變化，研究中藥在PLDD 術(shù)

9、后早期的作用機(jī)理，為PLDD 臨床療效的提高提供理論依據(jù)。
　　 方法:研究一：36 例腰椎間盤突出癥患者進(jìn)行PLDD 治療，對(duì)治療后不同時(shí)間點(diǎn)患者的癥狀、體征進(jìn)行評(píng)分，以觀察6 個(gè)月內(nèi)PLDD 療效學(xué)變化；測(cè)量術(shù)前、術(shù)后即刻、3 個(gè)月、6 個(gè)月的突出物CT 平掃變化及椎間隙高度變化，并對(duì)療效學(xué)和影像學(xué)變化進(jìn)行相關(guān)性分析。研究二：120 例腰椎間盤突出癥PLDD 術(shù)后患者隨機(jī)分為空白對(duì)照組、中藥治療組、中藥對(duì)照及西藥對(duì)照組，每組

10、30 例，對(duì)治療后不同時(shí)間點(diǎn)四組患者癥狀、體征進(jìn)行評(píng)分，觀察患者癥狀、體征評(píng)分變化及客觀指標(biāo)血清炎癥因子水平變化，對(duì)PLDD 術(shù)后中醫(yī)病因病機(jī)進(jìn)行探討。
　　 結(jié)果:研究一：1.PLDD 方法可以明顯改善腰椎間盤突出癥患者臨床癥狀、體征，優(yōu)良率達(dá)83.3％，療效確切；2.PLDD 術(shù)后6 個(gè)月內(nèi)患者突出物CT 測(cè)量及椎間隙高度X 線測(cè)定沒(méi)有明顯變化，青少年P(guān)LDD 術(shù)后突出物有部分回納；3、PLDD 術(shù)后療效學(xué)與影像學(xué)變化無(wú)明顯

11、相關(guān)性，年齡，突出物大小與療效、回納程度、椎間隙高度變化有明顯相關(guān)性。研究二：1、PLDD 術(shù)后中醫(yī)學(xué)證候具有“氣滯血瘀”和“熱毒內(nèi)蘊(yùn)”的特征；2、中藥方劑汽化克炎湯、桃紅四物湯及西藥芬必得膠囊均有改善PLDD 術(shù)后早期腰腿痛癥狀，汽化克炎湯效果優(yōu)于其它兩組；3、從療效學(xué)角度證實(shí)PLDD 術(shù)后中醫(yī)病因?qū)W假說(shuō)具有科學(xué)性。
　　 結(jié)論:研究一：1.PLDD 技術(shù)是治療腰椎間盤突出癥較好的方法,療效確切、值得推廣;2、PLDD 術(shù)后6