酶法提取茄尼醇及有機(jī)體系中酵母轉(zhuǎn)化茄尼醇產(chǎn)CoQ-,10-的研究.pdf

1、粟酒裂殖酵母S.promb2.1794(Schizosaccharomyce.spromb)具有轉(zhuǎn)化底物茄尼醇合成輔酶Q10的能力。本論文在前面研究的基礎(chǔ)上，主要探討了茄尼醇的酶法提取及有機(jī)體系中S.promb2.1794(Schizosaccharomyce.spromb)轉(zhuǎn)化底物茄尼醇合成輔酶Q10的工藝過程，并對(duì)其轉(zhuǎn)化機(jī)理進(jìn)行了初步的分析。 研究結(jié)果表明：初始pH值4.0，濃度2.5％(v/v)，45℃下利用Viscozy

2、meL復(fù)合酶對(duì)煙末進(jìn)行降解預(yù)處理，作用6個(gè)小時(shí)，茄尼醇提取率與粗品純度分別達(dá)2.172％和32.93％，其指標(biāo)優(yōu)于其它預(yù)處理方式；經(jīng)精制以后純度達(dá)92.83％，可用作輔酶Q10、維生素K2等生物合成的中間體，有較高工業(yè)應(yīng)用價(jià)值。 鑒于茄尼醇和輔酶Q10的水不溶性，構(gòu)建了有機(jī)轉(zhuǎn)化體系：異丙醇和pH5.0、0.1mol/L的磷酸緩沖液按2∶8(v/v)比例組成轉(zhuǎn)化體系，菌體添加量為0.5％(w/v)，底物添加濃度為500mg/L，3

3、0℃下220r/m轉(zhuǎn)化8h，輔酶Q10產(chǎn)量為91.04mg/L發(fā)酵液，單位細(xì)胞內(nèi)輔酶Q10產(chǎn)量為3.726mg/g細(xì)胞，相對(duì)空白提高了203.4％，相對(duì)水相體系中輔酶Q10產(chǎn)量提高了81.24％。 預(yù)實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)上，選用丙二醇作為細(xì)胞通透劑，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，適當(dāng)濃度的有機(jī)溶劑通過使細(xì)胞膜形成可逆的小孔有效提高細(xì)胞膜通透性，但是濃度過高，導(dǎo)致了一定的相毒性，使得細(xì)胞活性下降甚至失活，并確定了合適的有機(jī)溶劑作用條件。 茄尼醇作為輔酶