吉林省煙草野火病菌生理分化研究.pdf

1、煙草野火病(Pseudomonas syringae pv．tabaci)是世界普遍發(fā)生的一種主要侵染煙草的細(xì)菌病害。本文首次利用RAPD技術(shù)與生理生化性狀、藥劑敏感性的測定相結(jié)合的方法對吉林省煙草野火病菌的生理分化情況進(jìn)行了初步研究，從遺傳物質(zhì)DNA水平證實(shí)病原菌的生理分化。主要研究結(jié)果如下： 1. 對吉林省不同地區(qū)的30個(gè)供試菌株進(jìn)行熒光反應(yīng)、氧化酶反應(yīng)、精氨酸雙水解反應(yīng)、果聚糖產(chǎn)生、馬鈴薯軟腐、硝酸鹽反應(yīng)、明膠水解和碳源的

2、利用等生理生化反應(yīng)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明供試菌株在生理生化性狀上差異不顯著，只有在果聚糖反應(yīng)上存在差異。 2. 采用含毒介質(zhì)法測定供試菌株對農(nóng)用鏈霉素和新植霉素的敏感性。結(jié)果表明，敦化黃泥河鎮(zhèn)的菌株與其它地區(qū)菌株相比對農(nóng)用鏈霉素的敏感性差異顯著；所有供試菌株對新植霉素的敏感性不存在差異。農(nóng)用鏈霉素和新植霉素抑菌的最低有效濃度較低，抑菌效果較好，是防治煙草野火病的首選藥劑 3. 從86個(gè)RAPD隨即引物中篩選出11個(gè)引物對供試菌株

3、的基因組DNA進(jìn)行分析，共擴(kuò)125條帶，其中103條帶具有多態(tài)性，多態(tài)性帶的比率達(dá)82.4％。通過聚類分析將供試菌株劃分為7個(gè)類群(相似系數(shù)0.62)：A類群包括敦化市黃泥河鎮(zhèn)的所有供試菌株：B類群包括榆樹黑林鎮(zhèn)的全部菌株和榆樹謝家的兩個(gè)菌株：C類群包括和龍一個(gè)菌株：D類群包括安圖和大安各一個(gè)菌株；E類群包括榆樹謝家和大安各一個(gè)菌株，柳河四個(gè)菌株，德惠吉旦溝鎮(zhèn)、德惠天臺鎮(zhèn)和德惠長新鎮(zhèn)的全部供試菌株。F類群包括柳河一個(gè)菌株：G類群包括和龍

4、的一個(gè)菌株。在更高的水平上類群B和類群E還可以進(jìn)一步劃分為眾多的亞群。從聚類分析結(jié)果可以看出，來源相同地區(qū)的多數(shù)菌株聚為一類，表明聚類組的劃分與菌株的地理來源有一定的相關(guān)性。從相似系數(shù)來看，供試菌株間相似系數(shù)在0.2703-0.8431，表現(xiàn)出豐富的遺傳多樣性，煙草野火病菌存在生理分化現(xiàn)象。 4. 菌株RAPD分析和生理生化以及藥劑敏感性的測定結(jié)果表明：柳河、榆樹謝家、德惠吉旦溝鎮(zhèn)和敦化黃泥河鎮(zhèn)的煙草野火病菌出現(xiàn)生理分化現(xiàn)象。R