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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:
探索伊立替康長(zhǎng)循環(huán)納米脂質(zhì)體的制備工藝,評(píng)價(jià)其質(zhì)量,并進(jìn)行其抗癌生物活性研究,為該劑型的進(jìn)一步研究奠定基礎(chǔ)。
方法:
(1)正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)確定最佳伊立替康長(zhǎng)循環(huán)納米脂質(zhì)體的制備工藝考察了不同的脂質(zhì)體制備方法對(duì)脂質(zhì)體粒徑和包封率的影響,以這兩項(xiàng)指標(biāo)確定制備方法為乙醇注入-硫酸銨梯度法,然后采用正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)確定最佳制備工藝伊立替康長(zhǎng)循環(huán)納米脂質(zhì)體的制備工藝。
(2)多指標(biāo)評(píng)價(jià)伊立替康長(zhǎng)循環(huán)納米脂
2、質(zhì)體的質(zhì)量采用掃描電鏡考察其形態(tài)、粒徑儀檢測(cè)粒徑和電位、高效液相法檢測(cè)其穩(wěn)定性、體外釋放度等指標(biāo)。
(3) MTT及AO/EB法檢測(cè)伊立替康納米脂質(zhì)體的抗癌活性選取結(jié)直腸癌細(xì)胞HTC-15、lovo、colo320三種細(xì)胞,通過MTT法檢測(cè)伊立替康納米脂質(zhì)體對(duì)各種細(xì)胞的抑制能力。同時(shí),采用AO/EB法對(duì)肝癌細(xì)胞HepG2進(jìn)行試驗(yàn),考察伊立替康納米脂質(zhì)體對(duì)該細(xì)胞形態(tài)及凋亡的影響。
結(jié)果:
(1)伊立替康長(zhǎng)循環(huán)
3、納米脂質(zhì)體制備工藝選擇乙醇注入-硫酸銨梯度法制備的伊立替康長(zhǎng)循環(huán)納米脂質(zhì)體粒徑分布均勻(110-120nm)且包封率高(92.67%),載藥量約為9%。正交法確定的最佳處方為:磷脂300 mg,使其濃度為10mg/mL,膽固醇50 mg,PEG200050mg,硫酸銨水化介質(zhì)與乙醇體積比為10∶3,卵磷脂與伊立替康的比為10∶1,卵磷脂與PEG2000比為5∶1,水浴溫度40℃。
(2)伊立替康長(zhǎng)循環(huán)納米脂質(zhì)體的質(zhì)量評(píng)價(jià)根據(jù)最
4、佳制備工藝制備的脂質(zhì)體,粒徑在115nm左右,電鏡下為圓形且分布均勻,電位為-14.7 mV,PH值為6.747,包封率達(dá)到92.67%,穩(wěn)定性好,4℃條件下保存90天包封率仍維持在70%以上,體外緩慢釋藥顯示168小時(shí)累計(jì)釋放率為70.1%。
(3)伊立替康長(zhǎng)循環(huán)納米脂質(zhì)體的體外抗癌活性與游離伊立替康溶液相比,伊立替康長(zhǎng)循環(huán)納米脂質(zhì)體對(duì)人直腸癌細(xì)胞HCT-15、lovo、colo320有明顯的抗腫瘤活性(P<0.01),并能
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