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1、目的:探討在福爾馬林固定、石蠟包埋組織中檢測(cè)FUS-CHOP融合基因的可行性及其對(duì)黏液型/圓細(xì)胞型脂肪肉瘤的診斷和鑒別診斷的價(jià)值,并探討?zhàn)ひ盒?圓細(xì)胞型脂肪肉瘤染色體易位發(fā)生的可能機(jī)制?! 》椒ǎ菏占ひ盒?圓細(xì)胞型脂肪肉瘤檔案標(biāo)本44例,以非典型性/分化良好型和多形性脂肪肉瘤、低度惡性黏液性纖維肉瘤/黏液性惡性纖維組織細(xì)胞瘤、多形性脂肪瘤等作為陰性對(duì)照,共60例。所有標(biāo)本均為福爾馬林固定、石蠟包埋組織。用嵌套式逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)(
2、RT-PCR)方法檢測(cè)FUS-CHOP融合基因mRNA表達(dá),以看家基因PGK作為內(nèi)對(duì)照檢測(cè)mRNA質(zhì)量;采用長(zhǎng)距離PCR和DNA測(cè)序技術(shù)(pMD18-T載體克隆測(cè)序或“引物步移法”測(cè)序),對(duì)9例黏液型/圓細(xì)胞型脂肪肉瘤新鮮標(biāo)本FUS-CHOP、EWS-CHOP基因組DNA進(jìn)行了擴(kuò)增和序列測(cè)定,并對(duì)其序列特征進(jìn)行了分析。 結(jié)論:1、嵌套式RT-PCR方法檢測(cè)FUS-CHOPmRNA表達(dá)可用于福爾馬林固定、石蠟包埋組織。2、嵌套式RT-
3、PCR方法檢測(cè)FUS-CHOP敏感性較高,特異性強(qiáng),可用于黏液型/圓細(xì)胞型脂肪肉瘤的診斷和鑒別診斷。3、黏液型/圓細(xì)胞型脂肪肉瘤染色體易位斷裂點(diǎn)旁存在一些特征性序列,包括Alu重復(fù)序列、易位素識(shí)別序列、拓?fù)洚悩?gòu)酶Ⅱ識(shí)別位點(diǎn)、寡核苷酸回文序列、卡序列、嘌呤/嘧啶交替序列、多嘌呤或多嘧啶序列等,可能與其染色體易位發(fā)生機(jī)制有關(guān)。4、易位素識(shí)別系列、拓?fù)洚悩?gòu)酶Ⅱ識(shí)別位點(diǎn)、Alu重復(fù)序列和寡核苷酸回文序列可能在黏液型/圓細(xì)胞型脂肪肉瘤染色體易位發(fā)
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