高壓氧對成年大鼠持續(xù)性局灶腦缺血細胞凋亡及Bcl-2、Bax的影響.pdf

1、中國醫(yī)科大學碩士學位論文高壓氧對成年大鼠持續(xù)性局灶腦缺血細胞凋亡及Bcl2、Bax的影響姓名：潘鈺申請學位級別：碩士專業(yè)：神經(jīng)病學指導教師：張朝東2002.3.1=5)；③缺血組(1—6組)；④rrso組(1—6組)，③一④組分別對應有6h，24h，48h，72h，120h，lOd等時間點，每個時間點n=5。2方法：線栓法建立大鼠持續(xù)性局灶腦缺血模型，HBO組大鼠缺血后6小時內(nèi)送人單人高壓氧艙，加壓至020Mpa(20ATA)，在高壓下

2、停留60分鐘，期間用純氧通風10分鐘；缺血組動物常壓下吸純氧，每天進行一次。各組大鼠在規(guī)定的時間用10％永合氯醛麻醉，4％多聚甲醛一001MPBS液(PH值74)固定后取材，石蠟包埋，連續(xù)切片，常規(guī)HE染色切片用LeieaQ570圖像分析系統(tǒng)檢測梗死灶的面積，計算梗死灶體積。原位末端TUNEL法標記凋亡細胞，免疫組織化學SP法檢測Bel一2，Bax蛋白。TUNEL陽性細胞和免疫組織化學陽性細胞采用半定量計數(shù)，對同一時間點HBO組和缺血組

3、腦梗死灶體積、TUNEL陽性細胞、Bcl一2、Bax免疫組化陽性細胞分別比較，進行t檢驗。結(jié)果1腦梗死灶體積：缺血組持續(xù)性局灶腦缺血6hHE染色光鏡下見大腦中動脈供血區(qū)的皮層和皮層下自質(zhì)缺血，缺血邊界較清，形成梗死灶。24h梗死灶基本固定，24h一72h梗死灶體積無顯著變化，120h梗死灶體積減少，10d梗死灶體積顯著小于120h。HBO組與缺血組相比6h一10d各相應時間點梗死灶體積縮小。2凋亡細胞檢測結(jié)果：正常對照組和假手術(shù)組未見T

4、UNEL陽性細胞。缺血組腦缺血48h、72h、120h、10d在梗死灶邊緣內(nèi)側(cè)區(qū)域分布TUNEL陽性細胞，梗死中心區(qū)未見陽性細胞。對照同期HE染色，TUNEL陽性細胞以神經(jīng)細胞為主。表達高峰為72h，梗死10d偶見少數(shù)凋亡細胞。HBO組48h、72h、120hTUNEL陽性細胞數(shù)較缺血組減少，梗死10d未見凋亡細胞。3Bel一2、Bax蛋白免疫組化結(jié)果：正常對照組和假手術(shù)組未見Bcl一2、Bax蛋白免疫組化陽性細胞。缺血組腦缺血6h在缺