兩面針對(duì)甲型溶血性鏈球菌、乙型溶血性鏈球菌和肺炎鏈球菌“譜”-“效”關(guān)系的研究.pdf

1、目的：對(duì)兩面針Zanthoxylumnitidum(Roxb.)DC.藥材進(jìn)行甲型溶血性鏈球菌、乙型溶血性鏈球菌和肺炎鏈球菌抑制作用的研究，為兩面針?biāo)幮W(xué)研究提供試驗(yàn)依據(jù)。建立兩面針抑菌活性部位的HPLC指紋圖譜，為科學(xué)評(píng)價(jià)和有效控制兩面針的質(zhì)量以及建立兩面針規(guī)范化生產(chǎn)基地提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。對(duì)兩面針?biāo)幉倪M(jìn)行甲型溶血性鏈球菌、乙型溶血性鏈球菌和肺炎鏈球菌的“譜-效”研究，為中藥譜效學(xué)的研究發(fā)展提供參考。
　　方法：（1）采用紙片瓊脂擴(kuò)散

2、法進(jìn)行兩面針抑菌活性部位的篩選。（2）采用HPLC法建立兩面針抑菌活性部位的HPLC指紋圖譜，獲得兩面針?biāo)幉牧炕闹讣y特征。（3）采用紙片瓊脂擴(kuò)散法對(duì)兩面針提取物進(jìn)行抑菌活性研究，獲取各樣本量化的藥效學(xué)數(shù)據(jù)。（4）在獲得兩面針?biāo)幉牧炕讣y特征和量化藥效學(xué)數(shù)據(jù)的基礎(chǔ)上，進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，建立兩面針?biāo)幉膶?duì)甲型溶血性鏈球菌、乙型溶血性鏈球菌和肺炎鏈球菌的“譜-效”方程。（5）對(duì)兩面針中的已知成分氯化兩面針堿含量、乙氧基白屈菜紅堿含量及二者含量在藥

3、材中比例的變化對(duì)三個(gè)菌種抑制活性變化的關(guān)系進(jìn)行了初步的探討。
　　結(jié)果：（1）HPLC指紋圖譜標(biāo)定了24個(gè)共有特征峰，33批次的兩面針樣本中，有21個(gè)樣本的兩面針相似度均大于0.9，5個(gè)樣本的兩面針相似度大于0.8而小于0.9，7個(gè)樣本的兩面針相似度均小于0.8。方法學(xué)考察結(jié)果表明，指紋圖譜的精密度較高、24小時(shí)的穩(wěn)定性較好、系統(tǒng)重現(xiàn)性良好，說(shuō)明本法能有效控制兩面針質(zhì)量，為完善其質(zhì)量評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)提供依據(jù)，且用此法提取兩面針量化指紋特征

4、數(shù)據(jù)穩(wěn)定、可靠。（2）兩面針?biāo)幉膶?duì)甲型溶血性鏈球菌的“譜”-“效”方程為：Y=6.833-3.005X1-1.172X4+1.653X5-0.547X8+0.538X10+1.375X11-0.639X13-0.784X14+0.620X15-1.265X16+1.174X19+1.627X20+1.813X21+0.643X22+1.155X24（R2=0.952）；兩面針?biāo)幉膶?duì)乙型溶血性鏈球菌的“譜”-“效”方程為：Y=6.300-

5、4.213X1+1.110X3-1.128X4+1.550X5-0.656X7-0.490X8+1.394X11-0.462X12-0.667X13-0.862X15-1.416X16+1.202X18+1.674X19+2.209X20+1.636X21+1.340X22+1.332X24（R2=0.922）；兩面針?biāo)幉膶?duì)肺炎鏈球菌的“譜”-“效”方程為：Y=5.870-2.982X1-1.836X4+2.410X5+1.136X6+

6、1.199X11-0.537X13-0.369X14-0.764X16+2.111X19+0.439X20+1.670X21+1.406X22+0.227X23(R2=0.960)。三個(gè)方程的驗(yàn)證結(jié)果表明，采用本法建立的方程穩(wěn)定、可靠，具有較好的預(yù)測(cè)性。（3）在氯化兩面針堿含量、乙氧基白屈菜紅堿含量及二者比例變化與兩面針提取物抑菌活性變化關(guān)系的分析中發(fā)現(xiàn)：兩面針提取物的抑菌活性并沒(méi)有隨著氯化兩面針堿含量的增高而加強(qiáng)，卻隨著乙氧基白屈菜紅

7、堿含量的增高而有增強(qiáng)趨勢(shì)；當(dāng)氯化兩面堿含量占乙氧基白屈菜紅堿含量的百分比約在10％～35%時(shí)，兩面針?biāo)幉牡囊志钚宰顝?qiáng)。
　　結(jié)論：本課題進(jìn)行了兩面針抑菌活性的測(cè)定，并建立了兩面針抑菌活性部位的HPLC指紋圖譜，為控制兩面針質(zhì)量，建立規(guī)范化兩面針?biāo)幉纳a(chǎn)基地提供了實(shí)驗(yàn)依據(jù)，也為兩面針譜效學(xué)的研究提供實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)；對(duì)兩面針?biāo)幉倪M(jìn)行甲型溶血性鏈球菌、乙型溶血性鏈球菌和肺炎鏈球菌的“譜-效”研究，為中藥譜效學(xué)的研究發(fā)展提供參考；對(duì)兩面針中的