施氏鱘的性腺發(fā)育及人工性別控制研究.pdf

1、本文采用組織學(xué)、生物化學(xué)及放射免疫學(xué)等方法，對(duì)不同發(fā)育時(shí)期施氏鱘的性腺組織、外源性激素誘導(dǎo)后血液和組織中性類(lèi)固醇激素、及雌性化比率進(jìn)行觀察和測(cè)定，同時(shí)也探討了人工養(yǎng)殖條件下施氏鱘的雌雄比率。 人工養(yǎng)殖條件下，施氏鱘血液中睪酮(Testosterone，T)的含量隨著年齡增長(zhǎng)而增加，從1齡到4齡T含量是處于上升狀態(tài)，到5齡時(shí)表現(xiàn)了下降趨勢(shì)。雌二醇(17β-estradiol，E2)與T含量有所不同，在1齡時(shí)維持較低水平，到2齡時(shí)仍

2、保持較低的水平，2～4齡E2水平緩慢上升，4～5齡E2水平快速上升。雌性親魚(yú)可達(dá)到904pmol·L-1，雄性親魚(yú)的E2水平維持在較低的水平內(nèi)。 施氏鱘性成熟晚，性腺發(fā)育時(shí)間較長(zhǎng)，雌魚(yú)成熟需9～11年，雄魚(yú)則為6～7年，而人工養(yǎng)殖的雌魚(yú)性成熟提前1～2年。魚(yú)苗出膜12天，在其腎管區(qū)下方可見(jiàn)有一棒狀突起，由上皮細(xì)胞構(gòu)成，為生殖腺原基。至六月齡時(shí)性腺切片可見(jiàn)原始生殖細(xì)胞進(jìn)行有絲分裂，分裂后發(fā)育為性原細(xì)胞，但在顯微鏡下無(wú)法判斷其雌雄。

3、七月齡后顯微鏡下可以看到不同性別性腺結(jié)構(gòu)某些特征，組織學(xué)可以觀察到明顯卵巢結(jié)構(gòu)和精巢結(jié)構(gòu)。性腺二期是性腺中脂肪大量積累的階段，同時(shí)也出現(xiàn)了大量的初級(jí)性母細(xì)胞，此階段發(fā)育時(shí)間較長(zhǎng)，可長(zhǎng)至數(shù)年。性腺三期性腺增生較快，脂肪消耗的速度加快，性腺重量明顯增加，橫切面上性腺組織面積擴(kuò)大。精巢外型展開(kāi)為兩端尖細(xì)的長(zhǎng)梭形，淡紅色、黃色或上有青色斑，由鰾前1/3處至泄殖腔前。卵巢中脂肪消耗較快，色素和脂肪集中于卵巢中、側(cè)部，性腺組織上分散血管，性腺細(xì)胞貼

4、附在脂肪上，脂肪裹著性腺組織，后者呈橘瓣?duì)罨蛑笭罱徊嬷丿B。性腺四期雌雄性腺極易分辨，已接近生理成熟。精巢還殘存著一些脂肪，上面分布大量血管使整個(gè)精巢呈粉紅色，此時(shí)表面可見(jiàn)精子，輸精管變粗，內(nèi)已有少量的精子。卵巢體積很大且脂肪全部消失，剖開(kāi)腹壁及可見(jiàn)到有透明薄膜包裹的大量的卵細(xì)胞，卵細(xì)胞長(zhǎng)軸直徑在2.5～4mm之間。性腺五期魚(yú)體腹部脹大而松軟，此時(shí)性腺達(dá)到生殖成熟。輕按腹部有泄殖孔流出乳白色的精液或黑褐色的卵。性腺六期為退化期，其內(nèi)的發(fā)育

5、成熟的性腺細(xì)胞被排出或自然吸收。卵巢體積因產(chǎn)卵而顯著減小，顏色暗淡，松軟萎縮，其內(nèi)殘留濾泡和第Ⅳ、Ⅴ時(shí)相的卵母細(xì)胞，它們很快被卵巢吸收退化，形成半透明、桔黃色的不規(guī)則結(jié)構(gòu)。生殖后的精巢，體積縮小，外觀萎癟，經(jīng)恢復(fù)后轉(zhuǎn)為Ⅱ期。 通過(guò)電鏡觀察的施氏鱘卵巢中卵原細(xì)胞核常染色質(zhì)較多，異染色質(zhì)呈淺月牙形在核一側(cè)，核膜完整。胞質(zhì)中大量的臘腸狀或蠶豆?fàn)畹木€粒體，在脂肪之間和血管附近彌散大量的梅花狀的糖原，一些糖原趨近卵原細(xì)胞，并能看到糖原向胞

6、核處運(yùn)輸。 隨著卵原細(xì)胞和初級(jí)卵母細(xì)胞生殖質(zhì)(nuage)的形成，卵巢中充滿了卵原細(xì)胞和初級(jí)卵母細(xì)胞。在卵原細(xì)胞核中有云霧狀的電子致密物，此致密物向核周擴(kuò)散，同時(shí)在核周出現(xiàn)小的空泡。卵母細(xì)胞外有兩種體細(xì)胞圍繞，一種濾泡細(xì)胞扁平，核長(zhǎng)舌形，核內(nèi)常染色質(zhì)較多，電子密度較大的異染色質(zhì)少且貼近內(nèi)核膜。 電鏡觀察表明，早期精巢與卵巢差異不明顯，此時(shí)精原細(xì)胞的核中異染色質(zhì)較多，核橢圓，胞質(zhì)內(nèi)滑面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)較發(fā)達(dá)，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)池膨大而在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)附

7、近有一些致密度較低的小泡，線粒體數(shù)量較少。 口服雌二醇及工業(yè)乙醇對(duì)施氏鱘均有雌化作用。同時(shí)比較發(fā)現(xiàn)雌激素的濃度與作用時(shí)間與雌化效果有關(guān)，但并不是簡(jiǎn)單的線性關(guān)系。投喂工業(yè)乙醇飼料3個(gè)月試驗(yàn)組，較投喂6個(gè)月試驗(yàn)組，雌性化效果更明顯，經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析差異顯著。投喂1×10-6E29個(gè)月試驗(yàn)組與投喂12個(gè)月試驗(yàn)組無(wú)顯著差異，15個(gè)月效果最好.投喂?jié)舛葹?×10-6E2的試驗(yàn)組的效果比投喂1×10-6濃度組的試驗(yàn)組的結(jié)果明顯，與投喂時(shí)間呈正相

8、關(guān)，投喂15個(gè)月試驗(yàn)組雌化效果最好，可達(dá)百分之百。 口服E2后，施氏鱘肌肉、肝臟、胃腸道和血清中E2水平隨著停藥時(shí)間的延長(zhǎng)，各組織中的E2濃度降低，且E2濃度在肝臟＞胃腸道＞肌肉。停藥50天后，E2在肌肉、肝臟中含量最高與對(duì)照組具有顯著差異，且5×10-6組＞1×10-6組＞對(duì)照組。停藥140天后，各組織中E2的含量下降明顯。停藥230天以后，試驗(yàn)組的血清中的E2濃度的方差分析與對(duì)照組無(wú)顯著差異，而肝臟和肌肉中的E2則含量都低于