胃炎飲對膽汁反流性胃炎大鼠胃腸肽的影響.pdf

1、目的：胃炎飲由柴胡、香附、川楝子、元胡、炒白術(shù)、茯苓、炙甘草、川連、陳皮、枳殼、姜半夏、姜竹茹等藥物組成，具有疏肝利膽，健脾益氣，和胃降逆的功效，為導(dǎo)師多年臨床觀察篩選的效方，對膽汁反流性胃炎有較好的治療效果。本研究采用反流液空腹灌胃法復(fù)制膽汁反流性胃炎大鼠模型，給藥治療后，通過觀察各組大鼠胃黏膜病理形態(tài)、血漿胃動素(MTL)、胃黏膜P物質(zhì)(SP)、胃黏膜前列腺素E2(PGE2)、血清胃泌素(GAS)等指標(biāo)的變化，以驗證胃炎飲的藥效，并

2、從調(diào)節(jié)胃腸肽角度探討該藥治療膽汁反流性胃炎的作用機(jī)制。 方法: 第一部分：胃炎飲對膽汁反流性胃炎大鼠胃黏膜病理形態(tài)學(xué)的影響健康wistar大鼠40只，雌雄各半，隨機(jī)分為5組，每組8只，即正常組、模型組、胃炎飲高劑量組(予21.4g生藥/Kg體重灌胃)、胃炎飲低劑量組(予10.7g生藥/Kg體重灌胃)、嗎叮啉對照組(予2.78mg/Kg體重灌胃)。胃炎飲高、低劑量組和嗎叮啉對照組從造模開始后第二周至第五周造模結(jié)束每天給藥，

3、正常組和模型組同時灌服等容積生理鹽水，每日1次，連續(xù)28天。除正常組外，其余各組以15ml/kg體重反流液空腹灌胃，每日1次，連續(xù)35天。最后一次灌胃后禁食24h，無菌操作剖腹取胃，沿胃大彎剪開，用冰生理鹽水漂洗胃內(nèi)容物，濾紙吸干，先肉眼觀察胃黏膜的大體形態(tài)，再剪取胃竇部組織2塊，每塊約1mm3，4％多聚甲醛固定，逐級酒精脫水，常規(guī)石蠟包埋，切片，分別用HE染色和AB/PAS染色，光鏡下觀察胃黏膜病理形態(tài)學(xué)變化。在HE染色下做各組炎細(xì)胞

4、半定量分析。在AB/PAS染色下，用測微尺在光鏡100倍下測量胃黏膜AB/PAS陽性層厚度，自竇、體交界500um處開始，每張切片取平均間隔測量10個部位后取平均值。 第二部分：胃炎飲對膽汁反流性胃炎大鼠血漿胃動素和胃黏膜P物質(zhì)含量的影響動物分組、用藥情況同前，每組8只。最后一次灌胃后禁食24h，無菌操作斷頭取血5ml，加入100g/L EDTA-2Na0.2ml，在塑料管中混勻，3500 r/min離心15min，取血漿-20

5、℃以下保存，待測MTL。無菌操作剖腹取胃，沿胃大彎剪開，用冰生理鹽水漂洗胃內(nèi)容物，濾紙吸干，用載玻片刮取胃竇部黏膜，稱重后，冰浴下制備10％的組織勻漿，3500r/min離心15min，取上清，-20℃以下保存，留作SP含量檢測。 第三部分：胃炎飲對膽汁反流性胃炎大鼠胃黏膜前列腺素E2和血清胃泌素含量的影響動物分組、用藥情況同前，每組8只。最后一次灌胃后禁食24h，無菌操作斷頭取血5ml，3500 r/min離心15min，取血

6、清-20℃以下保存，留作GAS含量檢測。無菌操作剖腹取胃，沿胃大彎剪開，用冰生理鹽水漂沈胃內(nèi)容物，濾紙吸干，用載玻片刮取胃竇部黏膜，稱重后，冰浴下制備10％的組織勻漿，3500r/min離心15min，取上清，-20℃以下保存，留作PGE2含量檢測。 結(jié)果:第一部分：胃炎飲對膽汁反流性胃炎大鼠胃黏膜病理形態(tài)學(xué)的影響1 HE染色正常組大鼠胃黏膜表面光滑，未見破損，脫落，極少見炎細(xì)胞；模型組大鼠胃黏膜出現(xiàn)明顯破損，脫落，黏膜下可見大

7、量炎細(xì)胞浸潤；與模型組比較，胃炎飲高、低劑量組和嗎叮啉對照組胃黏膜破損，脫落較輕，炎細(xì)胞浸潤較少，胃炎飲高劑量組效果最佳，與正常組相近(Fig.1-5)。 炎細(xì)胞半定量分析結(jié)果顯示：與正常組比較，模型組炎細(xì)胞浸潤明顯(P<0.01)；與模型組比較，胃炎飲高、低劑量組和嗎叮啉對照組炎細(xì)胞浸潤均減輕(P<0.01或P<0.05)；與嗎叮啉對照組比較，胃炎飲高劑量組炎細(xì)胞浸潤較輕，具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。見Table 1。

8、 2.AB/PAS染色正常組大鼠胃黏膜AB/PAS陽性層較厚，連續(xù)性好(Fig.6)。模型組大鼠胃黏膜AB/PAS陽性層明顯變薄，甚至缺失(Fig.7)。胃炎飲高、低劑量組和嗎叮啉對照組大鼠胃黏膜AB/PAS陽性層變薄、缺失較輕，其中以胃炎飲高劑量組最佳(Fig.8-10)。 AB/PAS陽性層厚度測量結(jié)果：與正常組比較，模型組大鼠AB/PAS陽性層厚度明顯下降(P<0.01)；與模型組比較，胃炎飲高、低劑量組及嗎叮啉對照組

9、AB/PAS陽性層厚度均明顯增加(P<0.01或P<0.05)；胃炎飲高、低劑量組優(yōu)于嗎叮啉對照組，具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01或P<0.05)。見Table 2。第二部分：胃炎飲對膽汁反流性胃炎大鼠血漿胃動素和胃黏膜P物質(zhì)含量的影響1 各組大鼠血漿MTL含量的比較與正常組比較，模型組大鼠血漿MTL含量明顯下降，具有統(tǒng)計學(xué)意義(p<0.01)；與模型組比較，胃炎飲高、低劑量組和嗎叮啉對照組MTL含量均明顯升高，具有統(tǒng)計學(xué)意義(p<0.0

10、1或p<0.05)；胃炎飲高、低劑量組MTL含量均明顯高于嗎叮啉對照組(p<0.05)。見Table 3。 2.各組大鼠胃黏膜SP含量的比較與正常組比較，模型組大鼠胃黏膜SP含量明顯下降，具有統(tǒng)計學(xué)意義(p<0.01)；與模型組比較，胃炎飲高、低劑量組和嗎叮啉對照組SP含量均明顯升高，具有統(tǒng)計學(xué)意義(p<0.01或p<0.05)；與嗎叮啉對照組比較，胃炎飲高、低劑量組SP含量雖較高但無統(tǒng)計學(xué)意義(p>0.05)。見Table4。

11、 第三部分：胃炎飲對膽汁反流性胃炎大鼠胃黏膜前列腺素E2和血清胃泌素含量的影響1 各組大鼠胃黏膜PGE2含量的比較與正常組比較，模型組大鼠胃黏膜PGE2含量明顯下降，具有統(tǒng)計學(xué)意義(p<0.01)；與模型組比較，胃炎飲高、低劑量組和嗎叮啉對照組PGE2含量均明顯升高，具有統(tǒng)計學(xué)意義(p<0.01或p<0.05)；胃炎飲高、低劑量組PGE2含量明顯高于嗎叮啉對照組，具有統(tǒng)計學(xué)意義(p<0.01或p<0.05)。見Table 5。

12、 2.各組大鼠血清GAS含量的比較與正常組比較，模型組大鼠血清GAS含量明顯下降，具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)；與模型組比較，胃炎飲高、低劑量組和嗎叮啉對照組GAS含量均明顯升高，具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01或P<0.05)；胃炎飲高、低劑量組GAS含量明顯高于嗎叮啉對照組，具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01或P<0.05)。見Table 6。 結(jié)論: 1.胃炎飲療效確切，能顯著改善膽汁反流性胃炎大鼠胃黏膜病理形態(tài)學(xué)變

13、化，減輕胃黏膜損傷，減少炎細(xì)胞浸潤，增加AB/PAS陽性層厚度，具有保護(hù)胃黏膜的作用。 2.胃炎飲可以顯著升高膽汁反流性胃炎大鼠血漿MTL和胃黏膜SP含量，增強(qiáng)胃腸動力，調(diào)節(jié)MMC，促進(jìn)胃排空，加快反流液的清除，從而使得反流液對胃黏膜的攻擊機(jī)會減少，減輕胃黏膜損傷。 3.胃炎飲可顯著升高膽汁反流性胃炎大鼠胃黏膜PGE2和血清GAS含量，從而加強(qiáng)黏液-碳酸氫鹽屏障，改善胃黏膜血流，促進(jìn)黏膜修復(fù)，具有保護(hù)和營養(yǎng)胃黏膜的作用。