新型納米基因轉移系統(tǒng)體外轉染兔關節(jié)軟骨細胞的研究.pdf

1、利用低分子量殼聚糖制備一種新型載基因納米微粒，作為基因轉移系統(tǒng)，表征其理化性質，檢測其生物學特性，并評估其體外轉染軟骨細胞的性能。 方法以增強型綠色熒光蛋白(EGFP)質粒及β-半乳糖酐酶(β-Galactosidase)質粒作為報告基因，通過分子自組裝的方法制備載基因納米殼聚糖微粒。以透射電鏡(TEM)和原子力顯微鏡(AFM)觀察微粒的形態(tài)，以激光粒徑分析儀測定其粒徑和表面的Zeta電位，行DNaseⅠ酶切保護實驗研究殼聚糖對

2、質粒DNA的保護作用，行MTT試驗研究納米微粒對細胞的毒性作用，于體外進行轉染試驗觀察其對軟骨細胞的轉染活性。 結果殼聚糖可以和GFP質粒相互作用形成帶有表面正電荷的納米微粒，能在很大程度上保護質粒DNA不受DNaseⅠ的降解，對細胞的毒性小，轉染軟骨細胞后基因能夠有效表達。 結論載基因低分子量殼聚糖納米微粒能夠有效地轉染軟骨細胞，是一個很有潛力的納米局部傳輸系統(tǒng)(NanometerLocalDeliverySystem