納米銀和黃酮相互作用研究及分析應(yīng)用.pdf

1、核酸是生命的物質(zhì)基礎(chǔ)。它是基本的遺傳物質(zhì)，并且在蛋白質(zhì)的生物合成上占重要地位。核酸是由許多核苷酸聚合成的生物大分子化合物，為生命的最基本物質(zhì)之一，在生長、遺傳、變異等一系列重大生命現(xiàn)象中起決定性的作用。因此核酸的定量測定以及小分子藥物與核酸相互作用方式研究在臨床醫(yī)學(xué)、藥學(xué)、生命科學(xué)等方面都具有重要的意義。
　　 黃酮類化合物在植物中廣泛存在，迄今為止從天然產(chǎn)物中已經(jīng)發(fā)現(xiàn)了大量的黃酮類化合物，其中大多數(shù)化合物具有重要的生理和藥理作

2、用。由于黃酮類化合物具有獨(dú)特的化學(xué)結(jié)構(gòu)，因此在熒光分析中得以應(yīng)用。
　　 本論文建立了以黃酮類化合物為熒光探針測定核酸的分析方法，通過紫外吸收光譜、圓二色光譜、透射電鏡、熒光顯微鏡等技術(shù)手段，初步探討了兩種黃酮類物質(zhì)與核酸的相互作用，并將納米銀-黃酮復(fù)合納米探針應(yīng)用于核酸瓊脂糖凝膠電泳分析和細(xì)胞成像中。
　　 論文第一部分綜述了黃酮類化合物的在醫(yī)學(xué)上應(yīng)用研究進(jìn)展，以及納米銀在生物大分子中分析應(yīng)用的研究進(jìn)展。
　　

3、 論文第二部分探討了電化學(xué)還原法制備納米銀的條件，并選擇了以PVPK30作為穩(wěn)定劑所制備的納米銀用于后續(xù)熒光分析研究。
　　 論文第三部分深入研究了槲皮素-納米銀與核酸之間的相互作用機(jī)理，在本章中，利用UV、CD、FP、TEM等技術(shù)手段探討了其相互作用機(jī)理:槲皮素主要通過B-C環(huán)與核酸結(jié)合，槲皮素-核酸復(fù)合物作用于納米銀表面，且核酸為槲皮素和納米銀之間提供了適宜距離，促進(jìn)了納米銀-核酸-槲皮素體系的熒光增強(qiáng)。另外，還將槲皮素-納

4、米銀探針應(yīng)用于核酸瓊脂糖凝膠電泳顯色分析和細(xì)胞熒光成像中，得到了滿意結(jié)果。
　　 論文的第四部分研究了有無納米銀存在的條件下，楊梅素-核酸體系的熒光增強(qiáng)特性，并對楊梅素、納米銀和核酸之間的相互作用機(jī)理進(jìn)行了探討。研究發(fā)現(xiàn)，核酸可以增強(qiáng)楊梅素的熒光，且納米銀的存在可以進(jìn)一步增強(qiáng)體系的熒光。在最佳實(shí)驗(yàn)條件下，體系的熒光強(qiáng)度的增強(qiáng)程度與核酸的濃度在一定范圍內(nèi)具有良好的線性關(guān)系。結(jié)果表明:魚精子DNA(fsDNA)、鮭魚精子DNA(sm

5、DNA)、小牛胸腺DNA(ctDNA)和酵母RNA(yRNA)的線性范圍分別是9.0×10-9-1.2×10-6g/mL,9.0×10-9-1.0×10-6g/mL,1.0×10-8-1.0×10-6g/mL和9.0×10-9-1.0×10-6g/mL，它們的檢出限分別為3.1×10-9g/mL，6.8×10-9g/mL、8.3×10-9g/mL和7.0×10-9g/mL，可見該方法有較高的靈敏度和較寬的線性范圍。并將其用于實(shí)際樣品的測

6、定，得到滿意結(jié)果。機(jī)理研究表明，楊梅素與核酸形成復(fù)合物作用于納米銀表面，在線自組裝形成了發(fā)光的立方形狀的納米晶。且納米銀能有效的提高楊梅素-核酸體系的光穩(wěn)定性。
　　 本論文的特點(diǎn):
　　 [1]利用電化學(xué)還原方法制備了納米銀，研究了多種穩(wěn)定劑對納米銀性質(zhì)的影響，并從中選擇PVPK30作為穩(wěn)定劑的納米銀用于分析檢測。
　　 [2]在前期研究基礎(chǔ)上，深入探討了槲皮素、納米銀和核酸的相互作用機(jī)理:槲皮素主要以溝槽或靜