新型多功能戰(zhàn)傷敷料的初步研究.pdf

1、本研究在兔肝出血模型上應(yīng)用三種不同局部止血材料，通過對止血時間、出血量以及組織相容性的觀察，篩選出適合戰(zhàn)傷需求的強(qiáng)力止血藥物。FS干粉具備了理想的外用止血材料應(yīng)該具備的優(yōu)點(diǎn)。準(zhǔn)確的測量FS干粉的有效用量具有重要的實(shí)際意義。通過在兔肝出血模型上應(yīng)用FS干粉，對其有效劑量進(jìn)行相關(guān)研究，為FS干粉在戰(zhàn)傷敷料方面的應(yīng)用提供實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。 為了進(jìn)一步探討納米銀的抗菌活性，以爆炸傷常見的感染細(xì)菌“大腸桿菌”為例，研究納米銀對革蘭氏陰性桿菌的抗菌

2、活性，并且初步篩選出最小抑菌濃度、最小殺菌濃度以及最佳殺菌時間。期望為納米銀敷料的臨床安全應(yīng)用于爆炸傷提供理論依據(jù)。 研究方法：在改良的兔肝出血模型上應(yīng)用FS干粉、甲殼素粉及明膠海綿等三種不同的外用止血材料，通過對出血時間和出血量的觀察，判定各材料的止血效能；并在同一模型上留置材料，分別在不同時間段采取標(biāo)本，固定，切片，HE染色后進(jìn)行病理學(xué)觀察，判斷其組織相容性。在此模型上應(yīng)用不同劑量的FS干粉，通過對出血時間和出血量的觀察，對

3、其有效劑量進(jìn)行了相關(guān)研究。 將納米銀應(yīng)用于爆炸傷常見細(xì)菌——大腸桿菌、金黃色葡萄球菌以及白色念珠菌中，將之分別與各菌敏感藥物對比，綜合評定納米銀的抗菌效能。將不同濃度的納米銀溶液應(yīng)用于大腸桿菌中，得出納米銀的最小抑菌濃度(MIC)和最小殺菌濃度(MBC)。將同一濃度的納米銀應(yīng)用于同樣濃度的大腸桿菌中，于不同時間點(diǎn)取樣進(jìn)行菌落計(jì)數(shù)，計(jì)算殺菌率，得出最佳殺菌時間。將不同濃度的納米銀溶液加入同一濃度的大腸桿菌中，每30min測定一次細(xì)

4、菌濃度，繪制生長曲線；并在培養(yǎng)1h和4h取含有50μg/ml納米銀微粒的LB液體培養(yǎng)基，行透射電鏡和掃描電鏡檢查，進(jìn)一步研究納米銀的抗菌機(jī)制。 所有統(tǒng)計(jì)學(xué)處理應(yīng)用SPSS10.0軟件完成。結(jié)果FS粉組止血時間(41.3±11.5s)，出血量(0.24±0.08ml)，與甲殼素粉組(63.8±25.0s)(0.41±0.13ml)、明膠海綿組(116.3±19.2s)(0.89±0.30ml)、和普通紗布對照組(165±27.8s

5、)(2.64±0.37ml)相比有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。FS10mg/cm2組的止血時間(52.5±16.2s)出血量(0.36±0.11ml)，與FS8mg/cm2組(86.3±19.2s)(0.79±0.16ml)相比有顯著差異，而與FS12mg/cm2組(48.8±15.5s)(0.33±0.12ml)無顯著差異。 在針對大腸桿菌、金黃色葡萄球菌和白色念珠菌的抗菌實(shí)驗(yàn)中，納米銀對各菌的抗菌活性同敏感抗生素相當(dāng)；在以大腸桿菌為例，研究

6、其MIC、MBC時，隨著納米銀濃度增加，其抑菌效果明顯增強(qiáng)。當(dāng)納米銀的濃度為5μg/ml時，接種后的菌未繁殖。當(dāng)其濃度增加至25μg/ml時，90％以上細(xì)菌的生長受到抑制。當(dāng)納米銀的濃度為50μg/ml時，對大腸桿菌的殺菌效果達(dá)到100％。在納米銀濃度為50μg/ml時(MBC)，納米銀與大腸桿菌作用30min后殺菌率達(dá)到99％以上。透射電鏡觀察發(fā)現(xiàn)納米銀可以通過細(xì)菌的細(xì)胞膜而進(jìn)入到細(xì)菌體內(nèi)。在含有50μg/ml納米銀的LB液體培養(yǎng)基中

7、培養(yǎng)4h后，細(xì)菌結(jié)構(gòu)發(fā)生了很大的改變，膜結(jié)構(gòu)也遭到了破壞。我們通過記錄不同時間菌落的濃度從而繪制大腸桿菌的生長曲線，從中可以看出同在含有高濃度納米銀培養(yǎng)液中的細(xì)菌生長速率明顯降低，并且隨著濃度的增加，細(xì)菌的生長受到明顯的抑制?！　⊙芯拷Y(jié)論： 1.FS干粉直接應(yīng)用于出血創(chuàng)面上的止血效果優(yōu)于甲殼素粉及明膠海綿；材料吸收快，組織反應(yīng)輕。 2.10mg/cm2為止血的最小有效劑量。 3.納米銀對于爆炸傷最常見的感染細(xì)菌