CD4+T細(xì)胞高表達(dá)Tim-3與膿毒癥免疫紊亂的關(guān)系.pdf

1、目的：膿毒癥是指以全身性感染合并全身炎癥反應(yīng)綜合征導(dǎo)致器官功能損害為特征的復(fù)雜臨床綜合征,是嚴(yán)重創(chuàng)傷患者及ICU患者最常見(jiàn)的死亡原因之一。膿毒癥時(shí)機(jī)體免疫系統(tǒng)大量淋巴細(xì)胞凋亡,包括B淋巴細(xì)胞、T淋巴細(xì)胞。肝臟不僅是膿毒癥中最容易受損的器官之一，還是膿毒癥時(shí)各損害臟器中最重要的器官。膿毒癥開(kāi)始時(shí)為了維持免疫平衡，肝臟內(nèi)CD4+ T細(xì)胞數(shù)量增加。Tim-3是T細(xì)胞免疫球蛋白黏蛋白 TIM分子家族中的一員，最初發(fā)現(xiàn)特異性表達(dá)于鼠類 CD4+T

2、h1細(xì)胞表面而不表達(dá)于Th2細(xì)胞表面?，F(xiàn)已證實(shí)Tim-3對(duì)Th1細(xì)胞反應(yīng)起負(fù)調(diào)節(jié)作用，通過(guò)抑制細(xì)胞因子分泌和細(xì)胞增殖來(lái)調(diào)節(jié)機(jī)體的免疫平衡。Tim-3在固有免疫及適應(yīng)性免疫應(yīng)答中均扮演重要的角色,其表達(dá)失調(diào)與多種自身免疫性疾病的發(fā)病密切相關(guān)。但是,目前關(guān)于Tim-3在膿毒癥誘導(dǎo)的免疫紊亂中的作用的研究還較少。因此，本課題觀察了Tim-3在膿毒癥患者外周血CD4+ T細(xì)胞表面以及在膿毒癥小鼠肝臟CD4+ T細(xì)胞表面表達(dá)變化情況，并探究了Ti

3、m-3與CD4+T細(xì)胞功能的關(guān)系及其在膿毒癥免疫紊亂中的作用。
　　方法：
　　1、收集健康志愿者及膿毒癥患者血液標(biāo)本，通過(guò)流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)膿毒癥患者外周血CD4+ T細(xì)胞Tim-3表達(dá)情況；
　　2、構(gòu)建膿毒癥動(dòng)物模型——盲腸結(jié)扎穿孔術(shù)(CLP)，以假手術(shù)組為對(duì)照組，其僅予以麻醉及開(kāi)腹而不行盲腸結(jié)扎及穿孔。CLP術(shù)后8h、24h及48h獲取小鼠肝臟，通過(guò)流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)膿毒癥小鼠及假手術(shù)組小鼠肝臟CD4+ T細(xì)胞Tim-

4、3表達(dá)情況及Tim-3+CD4+T細(xì)胞功能狀態(tài)。
　　結(jié)果:
　　1、Tim-3在膿毒癥患者外周血CD4+ T細(xì)胞表面表達(dá)情況
　　膿毒癥患者外周血CD4+ T細(xì)胞表達(dá)Tim-3的比例較健康對(duì)照組高（3.4％±0.99%vs0.41%±0.07%，p=0.0002）。
　　2、Tim-3在膿毒癥小鼠肝臟CD4+ T細(xì)胞表面表達(dá)情況及與細(xì)胞功能狀況之間的關(guān)系
　　A、同對(duì)照組小鼠比較，膿毒癥后小鼠肝臟CD4+

5、 T細(xì)胞表面Tim-3表達(dá)上調(diào)；
　　B、同Tim-3-CD4+T細(xì)胞比較，Tim-3+CD4+T細(xì)胞分泌的細(xì)胞因子（IFN-γ、IL-4）均明顯減少，并且 IFN-γ/IL-4比率減小，預(yù)示膿毒癥時(shí)肝臟Tim-3+CD4+ T細(xì)胞作用趨于抗炎反應(yīng)；
　　C、同對(duì)照組比較，膿毒癥后小鼠肝臟CD4+ T細(xì)胞表面Tim-3及PD-1共表達(dá)增加，說(shuō)明Tim-3是CD4+ T細(xì)胞的一個(gè)負(fù)調(diào)節(jié)因子。
　　結(jié)論：膿毒癥患者外周血C