橄欖酚類化合物的分離純化和結構研究.pdf

1、橄欖(Canarium album L．)為我國珍貴的藥食兩用資源，具有解酒護肝、抗菌消炎、抗病毒和解毒等約理功效，橄欖中酚類化合物是其主要的藥效成分，但國內(nèi)外有關橄欖酚類化合物組成的研究報道不多。本論文對我國橄欖果實中的酚類化合物進行提取、分離和純化，并對酚類化合物單體的化學結構進行鑒定研究，以明確橄欖酚類的具體組成，對于橄欖資源的深加工利用和橄欖中藥的藥理研究具有重要的指導意義和應用價值。 首先采用化學和儀器分析方法對福建閩

2、侯檀香橄欖果實不同部分的化學組成進行了分析測定，結果表明，橄欖果肉中蛋白質含量為1.7g/100g，脂肪含量為1.1g/100g，可溶性糖含量分別為蔗糖635 mg/100g、果糖232 mg/100g、葡萄糖52mg/100g、棉子糖30 mg/100g和麥芽糖7 mg/100g，有機酸含量分別為蘋果酸537 mg/100g、檸檬酸64mg/100g、酒石酸34 mg/100g、奎寧酸28 mg/100g、草酸24 mg/100g、富

3、馬酸14 mg/100g和乙酸11 me/100g，由改良Folin-Ciocalteus比色法測定的橄欖果肉部分中的酚類成分含量為1.5g/100g，高于地中海油橄欖和普通水果，而橄欖核中酚類含量較低(0.2g/100g)；橄欖核仁中蛋白質和脂肪含量之和高達82.3％，蛋白中氨基酸種類齊全，橄欖核仁油不飽和脂肪酸相對含量為73.3％，核仁中鈣、鐵等礦物元素豐富，橄欖核仁資源具有很好的開發(fā)利用前景。 采用溶劑浸提法、超聲波輔助提

4、取和微波輔助提取方法對橄欖果肉中的酚類化合物進行了提取研究，結果表明，橄欖酚類化合物的最佳提取溶劑為60～70％(V/V)丙酮溶液，但在實際工業(yè)應用中以60％(V/V)乙醇溶液為宜，溶劑浸提法的最佳提取時間為1 h，溫度為20～30℃，固液比1:20，提取次數(shù)2次；超聲輔助提取的最適功率為80 w，最佳提取時間25min；微波輔助提取的最適功率為340 w，提取時間為30 s。三種提取方法的酚類得率差別不顯著(P>0.05)，提取物酚類

5、組成基本相同，提取率均可達90％以上，提取物中酚類含量約為34％，相比于溶劑浸提法，超聲波和微波輔助提取方法可顯著縮短橄欖酚類的提取時間，提高提取效率。 采用大孔樹脂吸附法對橄欖酚類提取物進行了純化研究，結果表明，AB-8型大孔吸附樹脂對橄欖酚類化合物具有較好的吸附和解吸性能，較適合于橄欖酚類成分的純化，樹脂柱(ф2.5 cm×30cm)的純化工藝條件為：酚液pH值為其自然pH(3.7)，酚液濃度10 mg/ml，吸附流速2 m

6、l/min，吸附溫度為室溫，此時樹脂對酚類化合物吸附量最大，當上樣體積達2倍柱床體積時酚類開始泄漏，當達到9倍柱床體積時，樹脂吸附達到飽和，對吸附飽和的樹脂進行洗脫，先用3.5倍柱床體積的去離子水洗去糖、蛋白等雜質，然后采用2.5倍柱床體積的90％(V/V)乙醇溶液以1 ml/min的洗脫流速沖洗樹脂，酚類解吸率可達95％以上。純化后的橄欖酚類產(chǎn)品純度從原先粗提物的34％提高到86％，純化倍數(shù)達2.5倍，高于專利報道的76％的產(chǎn)品純度，

7、產(chǎn)品酚類得率為1.4％，回收率為74％。 利用硅膠柱層析、AB-8型大孔吸附樹脂柱層析、聚酰胺柱層析、TSKgel Toyopearl HW-40柱層析以及制備硅膠薄層層析等多種方法對橄欖酚類提取物中的酚類組成進行了分離純化并采用HPLC法對各酚類化合物的相對含量進行測定，結果表明，從橄欖果實中提取分離出了16種酚類化合物單體，并通過UV、IR、HPLC-ESI-MS、1D NMR(<'1>H-NMR、<'13>C-NMR、DE

8、PT-135)和2D NMR(<'1>H-<'1>HCOSY、HMQC、HMBC)等波譜檢測技術及結合化學方法對酚類化合物單體的結構進行了鑒定，橄欖果實酚類化合物組成分別為：沒食子酸28.6％、3，3′-二甲氧基-2，2′，4，4′-四羥基聯(lián)苯二甲酸1.5％、六羥基聯(lián)苯二甲酸(HHDP)的烷基化衍生物Ⅳ1.7％和Ⅴ4.1％、沒食子酸甲酯3.8％、金絲桃苷2.3％、山萘酚-3-O-β-D-葡萄糖苷2.9％、穗花衫雙黃酮1.1％、六羥基聯(lián)苯