衣霉素預(yù)處理對膿毒癥乳鼠心肌細(xì)胞活性及線粒體功能的影響.pdf

1、目的：觀察衣霉素預(yù)處理誘導(dǎo)適度內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激對膿毒癥乳鼠心肌細(xì)胞活性及線粒體功能的影響。
　　 方法：分離純化乳鼠心肌細(xì)胞，進(jìn)行體外培養(yǎng)。第一部分：觀察不同濃度衣霉素對心肌細(xì)胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激的影響。實(shí)驗(yàn)分為4組：對照組（C），0.05μg/ml衣霉素組（T0.05），0.1μg/ml 衣霉素組（T0.1），0.5μg/ml 衣霉素組（T0.5）。Western Blot 測定各組心肌細(xì)胞GRP78 蛋白表達(dá)變化，確定適宜衣霉素濃度。第二

2、部分：觀察衣霉素預(yù)處理誘導(dǎo)適度內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激對膿毒癥乳鼠心肌細(xì)胞活性及線粒體功能的影響。實(shí)驗(yàn)分為四組：對照組，衣霉素組，LPS組，衣霉素預(yù)處理+LPS組。MTT 測定各組心肌細(xì)胞存活率，熒光顯微鏡觀察線粒體膜電位變化，流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞內(nèi)活性氧（ROS）產(chǎn)量。
　　 結(jié)果：第一部分：與對照組相比T0.05，T0.1組GRP78 蛋白表達(dá)無明顯變化，T0.5組表達(dá)顯著增加（P<0.01）。第二部分：單純0.5μg/ml 衣霉素作用對心

3、肌細(xì)胞活力及線粒體功能無明顯影響。1μg/ml LPS 對心肌細(xì)胞存活率無明顯影響，但可致線粒體膜電位下降，ROS 產(chǎn)量明顯增高（P<0.05）。衣霉素預(yù)處理可改善LPS 所致心肌細(xì)胞線粒體膜電位的喪失，同時(shí)細(xì)胞內(nèi)ROS 產(chǎn)量明顯減低（P<0.01）。
　　 結(jié)論：0.5μg/ml 衣霉素可誘導(dǎo)原代乳鼠心肌細(xì)胞產(chǎn)生適度內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激，上調(diào)GRP78 蛋白表達(dá)，不降低細(xì)胞存活率，對線粒體功能無影響。1μg/ml LPS 對心肌細(xì)胞存活