用于呼吸道基因輸送的氣霧劑研究.pdf

1、病毒性呼吸道傳染疾病已成為全球范圍內一個嚴重的公共健康安全問題?；虔煼赡艹蔀樾碌挠行У目共《局委煵呗浴檫_到好的基因治療效果，特別是針對呼吸道疾病的基因療法，必須找到有效的輸送載體和運載方法。目前研究較多的非病毒載體，如脂質體和膠束，均為水溶性，不能與氣霧劑中的拋射劑互溶，大大限制了氣霧劑在呼吸道疾病中的應用。 本文研究了一種新型的脂質基因復合物。我們首先采用油水兩相萃取系統(tǒng)，從有機相中萃取出通過靜電作用結合的質粒DNA與脂

2、質CDAN的復合物（反相膠束），然后對該制劑進行了表征。通過凝膠電泳法結合紫外分光光度法測定其萃取率，用激光粒度測定儀測定粒徑，并采用原子力顯微鏡觀察反相膠束的形態(tài)。實驗結果表明，該制劑中質粒DNA的攜帶率在80％以上，光強分布平均粒徑為150nm，可很好地溶于無水乙醚，分散到氟利昂拋射劑中得到澄明溶液。在灌裝為耐壓定量氣霧劑后，該制劑可隨拋射劑形成的氣霧噴出。進一步的，我們根據(jù)《中國藥典》2005版二部規(guī)定的方法，考察了該反相膠束氣霧

3、劑的霧滴大小、噴霧形態(tài)、每撳重量、氣霧劑的內容物比例、體外分布等。結果顯示，該氣霧劑可達到定量要求，霧滴顆粒大小在1~5μm之間。 本研究進行了反相膠束氣霧劑在細胞和動物模型中的基因轉染實驗，證明了其在保證細胞存活率的同時，具有高轉染效率。體外人體呼吸道模型的分布實驗結果顯示了該氣霧劑的廣泛分布性。在動物體內分布實驗中，熒光成像結果顯示，該反相膠束氣霧劑可廣泛分布于小鼠的呼吸道和肺部。細胞和動物體內轉染實驗均證實了該制劑可以有效