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1、α-家族芋螺毒素能選擇性阻斷nAChRs的某種亞型,是一類鑒定nAChRs 及其亞基的有效工具。海南產(chǎn)α-CTX的研究才剛起步,絕大多數(shù)α-芋螺毒素尚未被發(fā)現(xiàn)和研究,因此研究與開發(fā)新的α-CTX具有重要意義。 本研究中,α-芋螺毒素TeA21和LiC22分別來(lái)源于海南產(chǎn)的織錦芋螺(Conustextile Linnaeus)和疣蒿芋螺(Conus lividus Hwass)。首先,我們通過(guò)固相合成法合成芋螺毒素TeA21,采用
2、Fmoc基團(tuán)保護(hù)α-氨基酸,當(dāng)多肽完全合成后,使用溶液K把多肽從樹脂上裂解下來(lái),然后用HPLC純化。電噴霧質(zhì)譜法鑒定合成后的芋螺毒素TeA21分子量,結(jié)果顯示合成的芋螺毒素TeA21分子量為1895.9,與理論分子量一致,表明芋螺毒素TeA21的線性肽被合成成功。 本文還研究了α-芋螺毒素TeA21和LiC22的氧化折疊,特別是哪些因素能夠促進(jìn)芋螺毒素的氧化折疊以及影響其過(guò)程。折疊反應(yīng)中都含有一定濃度的折疊緩沖液和線性芋螺毒素。
3、我們選擇了四種不同的反應(yīng)緩沖液(濃度為0.1M)MOPS-NaOH、Trds-HCl、Gly-NaOH 和 NH<,4>HCO<,3>,并用分析型HPLC檢測(cè)芋螺毒素TeA21的氧化折疊過(guò)程和反應(yīng)結(jié)果。結(jié)果表明Tris-HC1效果相對(duì)較好。在研究中,我們發(fā)現(xiàn)氧化還原試劑如氧化態(tài)谷胱甘肽和還原態(tài)谷胱甘肽對(duì)線性芋螺毒素氧化折疊非常重要,而溫度對(duì)α芋螺毒素TeA21和LiC22天然產(chǎn)物產(chǎn)率影響并不明顯。在折疊混合物中加入有機(jī)助溶劑,如甲醇、乙
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