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文檔簡介
1、群體感應(yīng)(quorum sensing,QS)是細菌根據(jù)細胞密度變化進行基因表達調(diào)控的一種生理行為。隨著細胞密度增加,細菌產(chǎn)生的信號分子濃度逐漸增加,當(dāng)信號分子積累到一定濃度時會啟動相關(guān)基因的表達,如共生、細菌毒性、競爭、接合、抗生素的產(chǎn)生、運動性、孢子及生物膜的形成等。篩選各種QS效應(yīng)劑可以調(diào)節(jié)和控制細菌的各種行為,因此具有非常重要的生物學(xué)意義和實際應(yīng)用價值。本研究利用對AHLs敏感的指示菌C.violaceum CV026的顯色反應(yīng)
2、,嘗試從中國傳統(tǒng)的中藥材中篩選天然的QS效應(yīng)劑。研究中首先確立了AHLs信號分子的提取途徑和固體平板檢測方法,然后探討了液體培養(yǎng)基中半定量檢測信號分子的影響因素,發(fā)現(xiàn)以乙醇溶解紫色素的方法優(yōu)于水飽和丁醇法萃取紫色素,乙醇的最適使用濃度為55.6％,最適檢測波長為580nm。從多種中藥材中篩選QS效應(yīng)劑的研究表明,與單獨添加信號分子相比,連翹等八種中藥和信號分子一起添加時C.violaceum CV026的紫色減弱,其中可能含有細菌群體感
3、應(yīng)抑制劑;而三種藥材魚腥草、金銀花、柴胡和信號分子一起添加C.violaceum CV026分泌紫色增強,其中可能含有AHLs功能的類似物。然后進一步確定了三種中藥材中的增色作用物質(zhì)是藥材自身所含有,而非外源污染所致。魚腥草可能含有與信號分子協(xié)同使C.violaceum CV026顯色增強的物質(zhì),而非AHLs功能類似物;柴胡和金銀花單獨均可使C.violaceum CV026顯色,表明該物質(zhì)中含有信號分子的功能類似物,且柴胡中的活性物質(zhì)
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