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文檔簡(jiǎn)介
1、枇杷(Eriobotrya japonicaLindl.)為薔薇科蘋(píng)果亞科枇杷屬植物,是亞熱帶常綠果樹(shù)。我國(guó)枇杷種質(zhì)資源十分豐富,有20個(gè)種類(包括種、變種和變型),但只有一個(gè)種,即普通枇杷(E. japonicaLindl.)為栽培種。栽培種的離體培養(yǎng)、形態(tài)建成和植株再生已有不少研究;而19個(gè)野生種在這些方面卻鮮有研究。因此,開(kāi)展野生枇杷的離體形態(tài)建成及其相關(guān)研究,對(duì)于野生種的種質(zhì)資源離體保存、生物技術(shù)育種等方面的研究都具有重要的意義
2、。
本研究主要包括三個(gè)部分:第一部分是以栽培枇杷品種‘解放鐘’為基礎(chǔ)材料,設(shè)計(jì)不同的激素組合以及碳源種類對(duì)其愈傷組織誘導(dǎo)和愈傷組織再分化誘導(dǎo)的影響,進(jìn)而將研究范圍擴(kuò)展到南亞枇杷窄葉變型(南亞窄葉)、廣西枇杷、臺(tái)灣枇杷以及本課題組獲得的雜交材料‘解放鐘’枇杷×櫟葉枇杷和‘解放鐘’枇杷×臺(tái)灣枇杷;第二部分是從第一部分的結(jié)果中選取生長(zhǎng)較好的愈傷組織,采用石蠟切片的方法進(jìn)行組織學(xué)觀察,了解枇杷離體形態(tài)建成過(guò)程;第三部分是從第一部分中選
3、取生長(zhǎng)良好的愈傷組織,利用HPLC測(cè)定愈傷組織中蔗糖、葡萄糖和山梨醇的含量,以期獲得可溶性糖與枇杷離體形態(tài)建成關(guān)系的基礎(chǔ)資料。得到的主要結(jié)果如下:
?。?)MS+BA0.2 mg/L+KT0.2 mg/L+2,4-D1.0 mg/L+蔗糖30 g/L適用于誘導(dǎo)‘解放鐘’枇杷、南亞窄葉、臺(tái)灣枇杷、‘解放鐘’枇杷×櫟葉枇杷和‘解放鐘’枇杷×臺(tái)灣枇杷組培苗葉片的愈傷組織,除了‘解放鐘’枇杷愈傷誘導(dǎo)率為93.00%,其余的都為100%。
4、而同樣的培養(yǎng)基,對(duì)于‘解放鐘’田間植株葉片愈傷誘導(dǎo)率僅為11.00%左右,褐化率卻有89.00%左右。廣西枇杷組培苗葉片在MS+BA0.4 mg/L+KT0.2 mg/L+2,4-D1.0 mg/L+蔗糖30 g/L或者M(jìn)S+BA0.2 mg/L+KT0.4 mg/L+2,4-D1.0mg/L+蔗糖30 g/L這兩種培養(yǎng)基上均可以獲得98.20%左右的愈傷誘導(dǎo)率。
?。?)‘解放鐘’枇杷、南亞窄葉和廣西枇杷組培苗葉片愈傷誘導(dǎo)過(guò)程
5、中,以蔗糖或者山梨醇為碳源的愈傷誘導(dǎo)率比以葡萄糖為碳源的高,而且愈傷組織質(zhì)量也較好。但愈傷組織的形態(tài)建成能力較低?!夥喷姟咝杂鷤M織在MS+KT3.0 mg/L+NAA1.0mg/L+蔗糖30 g/L和MS+KT3.0 mg/L+NAA0.1 mg/L+2,4-D0.1mg/L+蔗糖30 g/L這兩種培養(yǎng)基上可分別獲得2.00%和4.00%的生根率,但生根的愈傷組織不能再分化出芽。而野生枇杷的愈傷組織的褐化率很高,形態(tài)建成能力差。南
6、亞窄葉,廣西枇杷和臺(tái)灣枇杷莖段只有在MS+BA1.0 mg/L+NAA0.1mg/L+蔗糖30 g/L或NAA0.3 mg/L的培養(yǎng)基上能有一定的形態(tài)建成能力,芽苗數(shù)較高和長(zhǎng)勢(shì)也較好。
?。?)離體形態(tài)建成的組織學(xué)觀察結(jié)果顯示:‘解放鐘‘枇杷愈傷組織能形成明顯的擬分生組織、維管結(jié)節(jié)以及畸形體胚,南亞窄葉和廣西枇杷愈傷組織大多形成畸形的體胚,這些畸形體胚不能發(fā)育成苗。
?。?)愈傷組織蔗糖、葡萄糖和山梨醇含量因培養(yǎng)基中附加
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