兔骨髓基質(zhì)細胞的培養(yǎng)及向成骨細胞分化的實驗研究.pdf

1、目的:研究兔骨髓基質(zhì)細胞在體外培養(yǎng)條件下的成骨能力及生物學特性,探討簡便易行的成骨細胞體外培養(yǎng)方法,為組織工程選擇理想的種子細胞來源.方法:取新西蘭白兔骨髓液經(jīng)離心后得骨髓單個核細胞,以1 × 10<'6>/ml的細胞濃度進行培養(yǎng),經(jīng)傳代培養(yǎng),選擇條件培養(yǎng)液培養(yǎng)(1640完全培養(yǎng)液中加入地塞米松10<'-8>mol/l,β-甘油磷酸鈉10mmol/l,VitC 50ug/ml)作為骨髓基質(zhì)細胞增殖和成骨的調(diào)節(jié)因子,通過倒置顯微鏡、HE染

2、色、掃描電鏡、堿磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)測定、Ⅰ型膠原免疫組化染色和四環(huán)素熒光鈣染色等手段對獲得的細胞進行生物學特性研究.結(jié)果:采用該法在體外培養(yǎng)的兔成骨細胞生長良好,生化指標穩(wěn)定,表現(xiàn)出與典型的成骨細胞相似的形態(tài)特征和生物學特性.結(jié)論:該實驗方法取材方便,條件培養(yǎng)液培養(yǎng)(1640完全培養(yǎng)液中加入地塞米松10<'-8>mol/l,β-甘油磷酸鈉l0mmol/l,VitC 50ug/m1)可促進骨髓基質(zhì)細