Notch1和NF-κB在淋巴母細(xì)胞淋巴瘤的表達(dá)及其臨床意義.pdf

1、淋巴母細(xì)胞淋巴瘤(lymphoblastic lymphoma，LBL)是來(lái)源于不成熟前體淋巴細(xì)胞的高侵襲性腫瘤，惡性程度高，病變進(jìn)展快，發(fā)病率約占NHL的4.2％，在兒童NHL中約占30％～40％。根據(jù)免疫表型分為前體T淋巴母細(xì)胞淋巴瘤和前體B淋巴母細(xì)胞淋巴瘤。其中T細(xì)胞型約占80％，B細(xì)胞型約占20％。縱隔腫塊、淋巴結(jié)腫大、骨髓和中樞神經(jīng)系統(tǒng)侵犯是其主要的臨床表現(xiàn)。近年來(lái)，采用類似治療ALL的強(qiáng)烈化療方案治療兒童青少年LBL取得良好

2、療效，5年無(wú)事件生存率(EFS)達(dá)70％～90％，但高?；颊吆统扇薒BL的5年生存率仍小于50％，如何確定高?；颊撸缙诮o予更有效的治療，是進(jìn)一步提高LBL療效的關(guān)鍵。目前主要根據(jù)誘導(dǎo)治療結(jié)束時(shí)未達(dá)完全緩解、縱隔病變、巨大腫塊、分期等臨床特點(diǎn)判斷預(yù)后和決定下一步治療，但這些臨床特點(diǎn)不能完全反映LBL的生物學(xué)特點(diǎn)，因此，近年來(lái)尋找LBL新的分子指標(biāo)，以期更準(zhǔn)確地預(yù)測(cè)LBL患者的預(yù)后或提供新的治療靶點(diǎn)成為研究熱點(diǎn)。Notch1屬于Notch

3、跨膜受體家族，Notch家族成員的結(jié)構(gòu)具有高度保守性，在細(xì)胞分化、發(fā)育中起著關(guān)鍵作用。最近研究發(fā)現(xiàn)，Notch1不僅對(duì)正常細(xì)胞分化起重要作用，其參與腫瘤的發(fā)生發(fā)展，并在不同腫瘤中呈現(xiàn)出抑癌或者促癌機(jī)制。近年來(lái)，越來(lái)越多的研究證明了Notch1信號(hào)通路的激活對(duì)造血系統(tǒng)惡性腫瘤的重要意義，Notch1能促進(jìn)進(jìn)入胸腺的淋巴樣前體細(xì)胞向T淋巴細(xì)胞分化，抑制其向B淋巴細(xì)胞分化，在T—LBL中，Notch1的高表達(dá)占＞50％的病例，有研究報(bào)道其高表

4、達(dá)與患者有更好的早期治療反應(yīng)和長(zhǎng)期生存有關(guān)。NF—κB是一種重要的細(xì)胞核轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子，它廣泛參與炎癥反應(yīng)、免疫應(yīng)激、細(xì)胞增殖、生長(zhǎng)分化及凋亡等重要生理過(guò)程?，F(xiàn)已證實(shí)，NF—κB與腫瘤的發(fā)生發(fā)展、腫瘤細(xì)胞的浸潤(rùn)轉(zhuǎn)移、抗凋亡及耐藥性的產(chǎn)生密切相關(guān)。最近研究發(fā)現(xiàn)，NF—κB作為Notch1信號(hào)通路下游的一個(gè)調(diào)控點(diǎn)，參與T—LBL的發(fā)生，抑制NF—κB可阻斷此通路從而抑制腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)，提示NF—κB未來(lái)有可能作為T—LBL的治療靶點(diǎn)。

5、 本課題應(yīng)用免疫組化法分別檢測(cè)了Notch1和NF—κB在LBL患者腫瘤組織的表達(dá)情況，探討LBL患者Notch1和NF—κB的相關(guān)性及其與組織病理分型、臨床特點(diǎn)和預(yù)后的關(guān)系，為尋找新的分子標(biāo)記提供依據(jù)。 研究材料和方法： 1.研究收集了我院2000年10月至2008年8月收治的34例診斷為淋巴母細(xì)胞淋巴瘤患者的臨床資料及病理蠟塊，其中男性30例，女性4例；中位年齡11.8歲(2～25歲)，1-18歲29例，18歲以上5

6、例；Ⅰ期1例，Ⅱ期4例，Ⅲ期12例，Ⅳ期17例；T—LBL26例，B—LBL8例。有31例接受了以BFM方案化療為主的聯(lián)合治療，2例接受了CHOAP方案化療，1例放棄治療。抽取5例正常淋巴結(jié)作對(duì)照。 2.應(yīng)用免疫組化法檢測(cè)了Notch1和NF—κB在LBL患者腫瘤組織和正常淋巴結(jié)中的表達(dá)情況。 3.探討LBL患者Notch1和NF—κB表達(dá)的相關(guān)性及其與免疫表型、臨床特點(diǎn)、療效和預(yù)后的關(guān)系。用SPSS16.0統(tǒng)計(jì)軟件包進(jìn)

7、行數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)。 結(jié)果： 1.Notch1在LBL患者腫瘤組織和正常淋巴結(jié)的表達(dá)情況 34例腫瘤組織中Notch1表達(dá)情況：陰性(—)9例(26.5％)，弱陽(yáng)性(+)8例(23.5％)，陽(yáng)性(++)7例(20.6％)，強(qiáng)陽(yáng)性(+++)10例(29.4％)。5例正常淋巴結(jié)Notch1表達(dá)情況：陰性(—)5例(100.0％)，與腫瘤組織有顯著差異，P=0.035。 2.Notch1表達(dá)與LBL患者免疫表型的關(guān)系

8、 26例T—LBL腫瘤組織中Notch1表達(dá)情況：陰性(—)5例(19.2％)，弱陽(yáng)性(+)4例(15.4％)，陽(yáng)性(++)7例(26.9％)，強(qiáng)陽(yáng)性(+++)10例(38.5％)。8例B—LBL腫瘤組織中Notch1表達(dá)情況：陰性(—)4例(50.0％)，弱陽(yáng)性(+)4例(50.0％)，無(wú)陽(yáng)性及強(qiáng)陽(yáng)性表達(dá)。Notch1在T—LBL和B—LBL的表達(dá)有顯著性差異，P=0.015。 3.Notch1表達(dá)與LBL患者臨床特點(diǎn)的

9、關(guān)系 (1)全組Notch1表達(dá)的高低與臨床分期有相關(guān)性，分期愈高，Notch1表達(dá)的陽(yáng)性率也愈高(P=0.003)。與LBL患者性別、年齡、B癥狀、巨大包塊、縱隔侵犯、結(jié)外病變、初診時(shí)LDH水平、初診WBC計(jì)數(shù)均沒(méi)有相關(guān)性，P值均大于0.05。 (2)單獨(dú)對(duì)T—LBL作亞組分析，發(fā)現(xiàn)Notch1表達(dá)高低與有無(wú)縱隔占位、臨床分期有明顯相關(guān)性，伴有縱隔占位和分期愈高的患者，Notch1表達(dá)的陽(yáng)性率增高，P值分別為0.001

10、、0.007，與患者性別、年齡、B癥狀、巨大包塊、結(jié)外病變、初診時(shí)LDH水平、初診WBC計(jì)數(shù)均沒(méi)有相關(guān)性，P值均大于0.05。 4.Notch1表達(dá)與LBL患者近期療效和預(yù)后的關(guān)系 (1) Notch1表達(dá)強(qiáng)弱與誘導(dǎo)結(jié)束、鞏固結(jié)束療效均無(wú)明顯相關(guān)性(P均為0.097).亞組分析中，26例T—LBL患者腫瘤組織的Notch1表達(dá)強(qiáng)弱與誘導(dǎo)結(jié)束、鞏固結(jié)束的療效均有相關(guān)性(P均為0.037)，誘導(dǎo)、鞏固達(dá)CR或PR者Notch

11、1表達(dá)陽(yáng)性率較高。 (2)分析Notch1表達(dá)強(qiáng)弱與LBL患者3年總生存的關(guān)系，Notch1表達(dá)陽(yáng)性3年總生存率為89.5％，陰性為87.5％，兩者無(wú)明顯相關(guān)性(P=0.681)。亞組分析中，T—LBL患者Notch1表達(dá)陽(yáng)性組3年總生存率為93.8％，陰性組為75.0％，陽(yáng)性組較陰性組總生存率高，但無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P=0.273)。 5.NF—κB在LBL患者腫瘤組織和正常淋巴結(jié)的表達(dá)情況 34例腫瘤組織中NF—

12、κB表達(dá)情況：陰性(—)7例(20.6％)，弱陽(yáng)性(+)5例(14.7％)，陽(yáng)性(++)13例(38.2％)，強(qiáng)陽(yáng)性(+++)9例(26.5％)。5例正常淋巴結(jié)NF—κB表達(dá)情況：陰性(—)4例(80.0％)，弱陽(yáng)性(+)1例(20.0％)，與腫瘤組織有顯著差異，P=0.011。 6.NF—κB表達(dá)與LBL患者免疫表型的關(guān)系 26例T—LBL腫瘤組織中NF—κB表達(dá)情況：陰性(—)4例(15.4％)，弱陽(yáng)性(+)4例(1

13、5.4％)，陽(yáng)性(++)11例(42.3％)，強(qiáng)陽(yáng)性(+++)7例(26.9％)。8例B—LBL腫瘤組織中NF—κB表達(dá)情況：陰性(—)3例(37.5％)，弱陽(yáng)性(+)1例(12.5％)，陽(yáng)性(++)2例(25.0％)，強(qiáng)陽(yáng)性(+++)2例(25.0％)。NF—κB在T—LBL和B—LBL的表達(dá)無(wú)顯著性差異，P=0.577。 7.NF—κB表達(dá)與LBL患者臨床特點(diǎn)的關(guān)系 (1) NF—κB表達(dá)的高低與LBL患者性別、年齡

14、、B癥狀、巨大包塊、縱隔侵犯、結(jié)外病變、初診時(shí)LDH水平均沒(méi)有相關(guān)性，P值均大于0.05，與臨床分期有相關(guān)性，分期愈高，NF—κB表達(dá)的陽(yáng)性率也愈高，P=0.018。 (2)單獨(dú)對(duì)T—LBL作亞組分析，發(fā)現(xiàn)NF—κB表達(dá)高低與有無(wú)B癥狀、巨大包塊、臨床分期有明顯相關(guān)性，無(wú)B癥狀、巨大包塊和分期愈高的患者，NF—κB表達(dá)的陽(yáng)性率增高，P值分別為0.000、0.001、0.001，與患者性別、年齡、縱隔占位、結(jié)外病變、初診時(shí)LDH水

15、平均沒(méi)有相關(guān)性，P值均大于0.05。 8.NF—κB表達(dá)與LBL患者近期療效和預(yù)后的關(guān)系 無(wú)論在全組患者、T—LBL還是B—LBL中，NF—κB表達(dá)強(qiáng)弱與誘導(dǎo)結(jié)束、鞏固結(jié)束療效均無(wú)相關(guān)性(P均大于0.05)。全組患者、T—LBL和B—LBL中，NF—κB陽(yáng)性組3年總生存略高于陰性組，分別為陽(yáng)性88.9％、95.5％、75.0％，陰性77.8％、75.0％、66.7％，但均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P均大于0.05)。 9.N

16、otch1和NF—κB在LBL腫瘤組織的表達(dá)強(qiáng)度的相關(guān)性 Notch1和NF—κB在LBL腫瘤組織表達(dá)的強(qiáng)度有明顯相關(guān)性，P=0.017。Notch1和NF—κB表達(dá)在T—LBL有明顯相關(guān)性(P=0.018)，在B—LBL無(wú)關(guān)(P=0.149)。 結(jié)論： 1.本研究顯示LBL患者Notch1表達(dá)水平顯著高于正常淋巴結(jié)，且與免疫表型相關(guān)，在T—LBL患者腫瘤組織高表達(dá)，在B—LBL患者腫瘤組織低表達(dá)或不表達(dá)。

17、 2.Notch1表達(dá)的高低表達(dá)的高低與LBL患者臨床分期相關(guān)，分期愈高，陽(yáng)性率也愈高。與T—LBL患者有無(wú)縱隔占位、臨床分期相關(guān)，伴有縱隔占位和分期愈高的患者，Notch1表達(dá)的陽(yáng)性率增高。 3.Notch1陽(yáng)性與T—LBL患者誘導(dǎo)結(jié)束、鞏固結(jié)束獲得CR或PR明顯相關(guān)；Notch1陽(yáng)性組3年總生存率優(yōu)于陰性組患者，但P值無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。 4.NF—κB表達(dá)在LBL患者的腫瘤組織顯著高于正常淋巴結(jié)，與免疫表型無(wú)關(guān)。

18、 5.NF—κB表達(dá)的高低與LBL患者臨床分期相關(guān)，分期愈高，陽(yáng)性率也愈高。在T—LBL中，NF—κB表達(dá)高低與有無(wú)B癥狀、巨大包塊、臨床分期有明顯相關(guān)性，無(wú)B癥狀、無(wú)巨大包塊和分期愈高的患者，NF—κB表達(dá)的陽(yáng)性率增高。 6.NF—κB表達(dá)強(qiáng)弱與T—LBL、B—LBL誘導(dǎo)結(jié)束、鞏固結(jié)束的療效無(wú)相關(guān)性，陽(yáng)性組3年總生存率略優(yōu)于陰性組患者，但P值無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。 7.在T—LBL中，Notch1和NF—κB表達(dá)的強(qiáng)度有明