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文檔簡介
1、目的:用BMP2干預肝癌細胞系HepG2細胞,從而觀察肝癌細胞中BMP2對PTEN蛋白表達的影響,探討B(tài)MP2與PTEN蛋白水平之間的關(guān)系,研究BMP2是否能減少PTEN蛋白的降解,探索肝癌治療的新途徑。 方法:將受試對象分為三個組:對照組、100ng/mlBMP2組、300ng/mlBMP2組,作用時間分為三個水平:6小時、12小時和24小時。用BMP2干預前1小時先將10ug/ml放線菌酮加入培養(yǎng)的細胞當中以阻斷PTEN分子
2、水平的合成。用免疫組化方法測定不同BMP2濃度組,不同時間點的細胞中PTEN蛋白水平。不同濃度BMP2干預后在不同時間點即6小時,12小時,24小時用MTT法測定細胞的活力,觀測HepG2細胞生長是否受到抑制。 結(jié)果:(1)采用圖像分析系統(tǒng)分析結(jié)果顯示:a、在不同濃度BMP2組中HepG2細胞中PTEN蛋白表達存在明顯差異。PTEN蛋白陽性表達率在300ng/ml組與100ng/ml組、100ng/ml組與對照組、300ng/m
3、l組與對照組之間有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。b、不同時間組中PTEN蛋白表達也存在明顯差異。PTEN蛋白陽性表達率在6小時組與12小時組、12小時組與24小時組、6小時組與24小時組之間有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。c、濃度與時間之間無交互作用,差別無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。(2)MTT結(jié)果顯示:HepG2細胞在各個時間點生長均受到抑制,其中以24小時為高峰。亦呈濃度效應關(guān)系,即不同濃度BMP2組HepG2細胞抑制狀況也不同,其中
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