昆蟲(chóng)病原線蟲(chóng)優(yōu)良品系的篩選及生物學(xué)特性分析.pdf

1、昆蟲(chóng)病原線蟲(chóng)作為一種重要的生物防治因子，越來(lái)越受到人們的重視。本研究對(duì)在山東地區(qū)采集的122份土樣進(jìn)行了線蟲(chóng)分離和篩選，得到異小桿線蟲(chóng)JNR，擴(kuò)增其ITS基因和D2-D3基因，并構(gòu)建系統(tǒng)進(jìn)化樹(shù)，進(jìn)行系統(tǒng)進(jìn)化分析。確定其分類地位。同時(shí)，對(duì)其生物學(xué)特性進(jìn)行了研究，以發(fā)掘其生防潛力。主要研究結(jié)果如下:
　　(1)在山東省濟(jì)南、青島、泰安、濟(jì)寧、菏澤、濰坊6個(gè)市下13個(gè)區(qū)縣采集土樣122份，土樣蟲(chóng)檢出率為16.39％。研究了昆蟲(chóng)病原線蟲(chóng)的

2、分布與土壤質(zhì)地、植被類型以及濕度之間的關(guān)系。數(shù)據(jù)分析表明:沙壤土線蟲(chóng)檢出率最高，占28％，沙土18.87％，壤土8.57％。調(diào)查顯示，不同植被類型的土壤，線蟲(chóng)檢出率不同。出線蟲(chóng)率最高的是果樹(shù)，其次是田地和無(wú)植被的荒地。另外土壤濕度在15-25％左右時(shí)，線蟲(chóng)發(fā)生的概率較大。
　　(2)分離得到線蟲(chóng)B、JN11、JNR、TD、HZ、QD，并篩選出殺蟲(chóng)效果較好的JNR。
　　(3)通過(guò)對(duì)昆蟲(chóng)病原線蟲(chóng)JNR通過(guò)分子生物學(xué)鑒定，擴(kuò)增其

3、ITS基因和D2-D3基因，片段大小分別為992 bp、898 bp，結(jié)合Genebank中，已知種類的相關(guān)基因序列，進(jìn)行同源性比對(duì)，構(gòu)建系統(tǒng)進(jìn)化樹(shù)，確定其為嗜菌異小桿線蟲(chóng)H.bacteriophora。
　　(4)通過(guò)測(cè)定不同劑量下線蟲(chóng)JNR對(duì)大蠟螟的侵染效果，結(jié)果表明，不同劑量下，線蟲(chóng)對(duì)試蟲(chóng)的侵染效果不同，校正死亡率隨著濃度增加而增大，在48 h增加最多。24 h后在低劑量10～60 IJs/頭下，線蟲(chóng)對(duì)大蠟螟的校正死亡率為0

4、％，當(dāng)濃度達(dá)到120 IJs/頭以上有侵染效果;在較高劑量120、240 IJs/頭下，72 h后寄主的校正死亡率均達(dá)到100％。
　　(5)探討了溫度、濕度對(duì)昆蟲(chóng)病原線蟲(chóng)的存活率和侵染力的影響。發(fā)現(xiàn)，線蟲(chóng)JNR有較好的耐熱性，38℃條件下能存活近32 h;40℃水浴處理2h，低濃度500 IJs/mL下3h后全部死亡。在較高溫度處理下，嗜菌異小桿線蟲(chóng)JNR均表現(xiàn)出了不同程度的侵染力。38℃時(shí)仍具有侵染活力，當(dāng)溫度過(guò)高超過(guò)40℃也

5、不利于嗜菌異小桿線蟲(chóng)的侵染。在溫度5℃、10℃下，線蟲(chóng)JNR可以存活數(shù)天，在低溫下的侵染力隨溫度升高而增加。室內(nèi)測(cè)定線蟲(chóng)需要的濕度為1000μL/皿1。
　　(6)研究了不同溫度下線蟲(chóng)的水平運(yùn)動(dòng)能力及侵染周期，在30℃以內(nèi)，線蟲(chóng)的水平運(yùn)動(dòng)能力隨溫度增加而增強(qiáng);同一溫度下，昆蟲(chóng)病原線蟲(chóng)JNR在瓊脂培養(yǎng)基上的水平運(yùn)動(dòng)能力隨時(shí)間延長(zhǎng)而增強(qiáng)。18℃下，24 h僅有5％的線蟲(chóng)，25℃時(shí)，有10％的線蟲(chóng)個(gè)體運(yùn)動(dòng)達(dá)到3.6cm，當(dāng)溫度為30℃，

6、則有31％的個(gè)體。JNR在室溫25℃條件下，對(duì)大蠟螟的致死時(shí)間需要44 h，明顯快于海濱斯氏線蟲(chóng)S.litorale和線蟲(chóng)S.ceratophorum，嗜菌異小桿線蟲(chóng)JNR侵染效果較好。線蟲(chóng)JNR在30℃的侵染周期時(shí)間短于25℃，且比另外兩種線蟲(chóng)更適合高溫條件。
　　(7)通過(guò)測(cè)定線蟲(chóng)JNR在不同劑量下對(duì)蠐螬的致病力，結(jié)果表明，嗜菌異小桿線蟲(chóng)在較高劑量下對(duì)蠐螬的防效較好，500 IJs/頭處理72 h，校正死亡率達(dá)到88％，96