酮康唑和艾迪康唑肝毒性研究.pdf

1、酮康唑(KCZ)屬于咪唑類(lèi)抗真菌藥物，對(duì)深部真菌和淺表真菌感染均有作用。臨床應(yīng)用及動(dòng)物試驗(yàn)均發(fā)現(xiàn)其具有一定的肝臟毒性，并對(duì)部分細(xì)胞色素P450(CYP450)亞型有一定的影響；艾迪康唑(Iodiconazole)為在研的三唑類(lèi)抗真菌新藥，分子結(jié)構(gòu)與咪唑類(lèi)相比由三氮唑取代咪唑環(huán)，其對(duì)深部和淺表真菌感染的療效均優(yōu)于咪唑類(lèi)。目前，酮康唑的肝損傷機(jī)理以及對(duì)CYP450的影響大小、具體亞型等尚不十分清楚，而艾迪康唑還處于臨床前研發(fā)階段，尚未展開(kāi)系

2、統(tǒng)的毒理學(xué)研究。本研究以整體大鼠和原代培養(yǎng)的大鼠肝細(xì)胞為實(shí)驗(yàn)材料，比較研究?jī)伤帉?duì)肝細(xì)胞的功能、巰基狀態(tài)、CYP450主要代謝亞型活性及細(xì)胞形態(tài)結(jié)構(gòu)的影響，并對(duì)可能的致毒機(jī)理進(jìn)行了探討，為指導(dǎo)酮康唑臨床合理用藥及艾迪康唑的進(jìn)一步研發(fā)提供毒理學(xué)依據(jù)。 大鼠整體動(dòng)物試驗(yàn)中，量效關(guān)系研究發(fā)現(xiàn)，兩藥在140、280、420gmol·kgq·d-1劑量下連續(xù)灌胃7d，大鼠血漿生化指標(biāo)和肝臟組織中巰基狀態(tài)沒(méi)有發(fā)生明顯改變。酮康唑?qū)Υ笫蟾闻K微粒

3、體CYP2E1的活性沒(méi)有明顯影響，而對(duì)CYPlAl、．181有誘導(dǎo)作用，對(duì)CYP3A有抑制作用，呈現(xiàn)明顯的劑量反應(yīng)關(guān)系；低劑量組抑制了CYPlA2、一281活性，高劑量組卻誘導(dǎo)CYPlA2、．281活性升高。艾迪康唑誘導(dǎo)大鼠肝臟CYPlAl、．181、．281和-2El活性明顯升高，抑制CYPlA2、．3A活性，并且有明確的劑量反應(yīng)關(guān)系。時(shí)效關(guān)系研究表明，兩藥420pmol·kg-I·d-1連續(xù)灌胃1d、4d、7d后，僅酮康唑在給藥4d

4、時(shí)出現(xiàn)血漿ALT升高，其余各時(shí)間點(diǎn)血漿生化指標(biāo)及肝組織巰基狀態(tài)均未發(fā)現(xiàn)明顯改變。酮康唑?qū)YPIAl、-1Bl和．2Bl有誘導(dǎo)作用；對(duì)CYP3A有抑制作用，呈現(xiàn)明顯時(shí)間效應(yīng)關(guān)系；酮康唑給藥1、4d抑制CYPlA2活性，給藥7d卻誘導(dǎo)CYPlA2活性。艾迪康唑?qū)YPlAl、．181、-281和-2El有誘導(dǎo)作用，具有明顯的時(shí)間效應(yīng)關(guān)系；對(duì)CYPlA2有抑制作用，給藥1d、4d明顯誘導(dǎo)了CYP3A的活性，但給藥7d后，CYP3A的活性卻被

5、明顯抑制。組織學(xué)檢查發(fā)現(xiàn)，兩藥在4201amol·kg-1·d。劑量下，主要引起肝組織結(jié)構(gòu)紊亂，肝細(xì)胞腫脹，細(xì)胞質(zhì)紅染，細(xì)胞核固縮。 體外原代培養(yǎng)肝細(xì)胞實(shí)驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn)，酮康唑和艾迪康唑?qū)Ω渭?xì)胞有直接損傷作用，不僅引起肝細(xì)胞的存活率下降，胞內(nèi)LDH、ALT、AST、ALP泄漏，還引起胞內(nèi)總巰基、非蛋白巰基、蛋白巰基下降，上述變化均呈現(xiàn)明顯的量效和時(shí)效關(guān)系，并且艾迪康唑?qū)Ω渭?xì)胞的損傷比酮康唑更明顯。原子力顯微鏡檢查發(fā)現(xiàn)兩藥均引起肝細(xì)胞

6、表面出現(xiàn)大皰。 在體內(nèi)和體外試驗(yàn)研究中，透射電鏡檢查發(fā)現(xiàn)兩藥均可引起肝細(xì)胞核扭曲變形，雙層膜結(jié)構(gòu)完整性受損，染色質(zhì)邊集、成團(tuán)；粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)擴(kuò)張，內(nèi)腔模糊，脫顆粒；滑面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)囊泡變；線粒體高度水腫，嵴斷裂，排列紊亂甚至消失，有的線粒體呈空泡化，有的則變形、扭曲，畸形變；細(xì)胞內(nèi)空泡化的線粒體顯著增多；出現(xiàn)大量次級(jí)溶酶體。 以上實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，酮康唑和艾迪康唑均對(duì)肝臟有一定的損傷作用，主要表現(xiàn)為肝細(xì)胞形態(tài)結(jié)構(gòu)的改變和對(duì)微粒體CYP