蘿卜四倍體的誘導(dǎo)及離體再生體系的建立.pdf

1、蘿卜(Raphanus sativus L.)屬十字花科蘿卜屬一、二年生草本植物，是一種以肉質(zhì)根為主要食用部分的重要蔬菜作物。為了對(duì)蘿卜進(jìn)行種質(zhì)資源創(chuàng)新并以此選育新品種，本試驗(yàn)對(duì)蘿卜進(jìn)行四倍體誘導(dǎo)并嘗試建立其離體再生體系。
　　本研究主要內(nèi)容包括：⑴生長(zhǎng)點(diǎn)滴注法以秋水仙堿、氨磺靈和氟樂(lè)靈為多倍體誘導(dǎo)劑，連續(xù)三天上、下午對(duì)蘿卜幼苗生長(zhǎng)點(diǎn)進(jìn)行滴注，誘導(dǎo)濰縣青和滿堂紅成為四倍體蘿卜。浸種法則以0.1％和0.2%的秋水仙堿浸泡剛露白的種子

2、6h和12h，以此對(duì)濰縣青蘿卜種子進(jìn)行四倍體誘導(dǎo)。結(jié)果表明：生長(zhǎng)點(diǎn)滴注法中，氨磺靈誘導(dǎo)蘿卜四倍體的最佳濃度為0.002%~0.004%，氟樂(lè)靈誘導(dǎo)的最佳濃度為0.02%，二者的誘導(dǎo)變異率均能達(dá)到20%左右；浸種法中，以0.1%秋水仙堿浸泡種子6h誘導(dǎo)效果最佳，誘導(dǎo)后種子發(fā)芽率為70%，誘導(dǎo)變異率達(dá)到47%。⑵通過(guò)形態(tài)學(xué)、細(xì)胞學(xué)鑒定，與二倍體植株相比四倍體植株生長(zhǎng)明顯緩慢，葉片增厚，葉色加深，花器官明顯增大；四倍體植株葉片下表皮氣孔增大，

3、縱、橫徑較二倍體增加，密度較二倍體減少；對(duì)四倍體植株進(jìn)行花粉母細(xì)胞染色體計(jì)數(shù)，觀察到四倍體染色體數(shù)為2n=4x=36。營(yíng)養(yǎng)風(fēng)味品質(zhì)測(cè)定結(jié)果表明：除粗纖維和干物質(zhì)之外，四倍體植株的營(yíng)養(yǎng)品質(zhì)指標(biāo)均比二倍體顯著提高；而風(fēng)味品質(zhì)中，四倍體的異硫氰酸酯等主要風(fēng)味物質(zhì)的含量均高于二倍體。⑶選用8種不同基因型的蘿卜為試驗(yàn)材料，進(jìn)行了帶柄子葉離體培養(yǎng)。結(jié)果表明：誘導(dǎo)不定芽的最佳培養(yǎng)基為MS培養(yǎng)基+30 g·L-1蔗糖+0.7%瓊脂+5 mg·L–16-