克倫特羅人工模擬抗體的制備及其應(yīng)用研究.pdf

1、人工模擬抗體就是利用分子印跡技術(shù)制備的對目標(biāo)分子具有特異性識別能力的分子識別材料，又稱為分子印跡聚合體。人工模擬抗體制備簡單，能在惡劣的環(huán)境下保持活性，性質(zhì)穩(wěn)定，成本低廉，與生物抗體比較具有顯著的優(yōu)勢。特別是作為各種快速檢測方法中的分子識別元件，在藥物及其殘留的快速檢測方面具有廣闊的前景。本文利用分子印跡技術(shù)，分別以本體聚合法和沉淀聚合法制備了克倫特羅的人工模擬抗體，并對其等溫吸附、靜態(tài)吸附性能和選擇性能等特性以及初步應(yīng)用進(jìn)行了研究。

2、 實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明：在本體聚合法制備中，以MAA為功能單體，功能單體與模板分子的摩爾比為4：1時(shí)，制備的人工模擬抗體的結(jié)合特性和選擇特性最好，對1mmol/L克倫特羅的結(jié)合量Q為46.1μmol/g；在沉淀聚合法制備中，以乙腈為致孔劑，MAA為功能單體，功能單體與模板分子的摩爾比為4：1時(shí)，制備的人工模擬抗體的結(jié)合特性和選擇特性最好，對1mmol/L克倫特羅的結(jié)合量Q為50.6μmol/g；它們對0.1mmol/L和1mmol/L的克

3、倫特羅達(dá)到吸附平衡所需的時(shí)間分別為6h/8h和45min/1h。以沉淀聚合法制備的微球形人工模擬抗體的結(jié)合性能較好，特別是在與底物分子吸附平衡時(shí)間上更有巨大的優(yōu)勢。 本研究利用2％的瓊脂糖溶膠-凝膠膜，將沉淀聚合制備的克倫特羅人工模擬抗體固定在鉑電極表面，作為敏感膜構(gòu)建了克倫特羅檢測電極，用差分脈沖伏安法對該電極的相應(yīng)性能(克倫特羅在人工模擬抗體修飾的鉑電極上存在電化學(xué)氧化還原反應(yīng))進(jìn)行了實(shí)驗(yàn)研究。檢測電極相應(yīng)性能的實(shí)驗(yàn)分為2步

4、：即首先檢測電極中的分子識別元件(克倫特羅人工模擬抗體)與溶液中的克倫特羅結(jié)合；再對吸附有克倫特羅的檢測電極移入背景溶液時(shí)，由于酸性水相的極性環(huán)境，破壞了克倫特羅與人工模擬抗體的接合，使得第一步中結(jié)合的克倫特羅從人工模擬抗體中釋放出來。結(jié)果表明，在1μmol/L-10μmol/L和201μmol/L-80μmol/L濃度范圍的克倫特羅乙腈溶液都顯示了良好的線性關(guān)系，線性方程分別為y=1.35+71.3C(r=0.99901)和y=6.3