TFAR19（PDCD5）蛋白在正常腎、腎透明細胞癌組織及正常膀胱、膀胱癌組織中的表達及意義.pdf

1、研究背景和目的：腎癌又稱腎細胞癌、腎腺癌，是最常見的腎臟實質(zhì)性腫瘤，其中以透明細胞癌最常見。其起病隱襲，死亡率高，根據(jù)統(tǒng)計，發(fā)病率居泌尿系腫瘤第二位。侵襲和轉(zhuǎn)移是性腫瘤的生物學(xué)特征之一，腎癌也不例外，由于腎癌早期缺乏典型的臨床癥狀，大約1/4-1/3病人就醫(yī)時已有轉(zhuǎn)移，可有血行轉(zhuǎn)移，也可以經(jīng)淋巴轉(zhuǎn)移。膀胱癌是我國泌尿生殖系腫瘤中最常見的腫瘤，臨床上90％以上為移行細胞癌，容易復(fù)發(fā)及對化療藥物不敏感，保留膀胱的各種手術(shù)治療，2年內(nèi)超過50

2、％以上腫瘤要復(fù)發(fā)。研究腎透明細胞癌及膀胱癌侵襲和轉(zhuǎn)移的分子機制，不僅有助于為臨床判斷預(yù)后提供有價值的分子標(biāo)記物，而且有助于設(shè)計和尋找抗腫瘤侵襲和轉(zhuǎn)移的新思路和新途徑，進一步改善腎癌及膀胱癌的預(yù)后。 TFAR19(TF-1cellapoptosis-relatedgene19、PDCD5)基因是由北京大學(xué)人類疾病基因中心1999年在國際上首先報道的一個人類新基因，是從人白血病細胞株TF-1細胞中克隆到的凋亡相關(guān)新基因(GenBan

3、k登記號AF014955)，參與調(diào)控細胞凋亡過程。PDCD5的mRNA在50種人類組織中均有表達，并不限定于造血系統(tǒng)，其中在成年心、睪丸、腎臟、腎上腺及胎盤中高表達，其中胚胎組織表達明顯低于成年組織，國內(nèi)外已有多家實驗室利用不同技術(shù)發(fā)現(xiàn)PDCD5在疾病情況下，特別是在腫瘤、自身免疫性疾病和局部損傷的表達明顯下降。PDCD5除參與細胞凋亡外，預(yù)測還與泛素有功能相關(guān)性，并可能參與蛋白質(zhì)的翻譯調(diào)控。目前有幾個研究表明，PDCD5在多種腫瘤中呈

4、現(xiàn)低表達，在正常組織中呈現(xiàn)高表達，其表達與腫瘤侵潤、轉(zhuǎn)移及預(yù)后密切相關(guān)。 但迄今為止，對PDCD5在腎細胞癌中的表達及其與腎細胞癌轉(zhuǎn)移的相關(guān)性研究國內(nèi)未見報道。本研究目的是檢測PDCD5在腎細胞癌中的表達，探討二者間的關(guān)系及其在腫瘤轉(zhuǎn)移中的作用，以期尋找判斷腎細胞癌轉(zhuǎn)移及估計預(yù)后可靠的分子標(biāo)記物和抗腫瘤治療新靶點。 方法：63例腎組織標(biāo)本均來自我院腎癌標(biāo)本數(shù)據(jù)庫，為2002年3月至2005年10月手術(shù)治療的腎細胞癌患者標(biāo)

5、本；42例膀胱組織標(biāo)本均來自我院2004年10月至2005年10月手術(shù)治療的膀胱癌患者標(biāo)本；其中43例腎癌標(biāo)本為腎透明細胞癌，所有患者術(shù)前均未接受放療、化療及免疫治療。20例腎癌旁正常腎組織(遠離腫瘤邊緣＞5cm)作為對照，10例膀胱癌旁正常膀胱組織(遠離腫瘤邊緣＞3cm)作為對照，并經(jīng)病理切片證實，用免疫組織化學(xué)SABC法檢測PDCD5的表達。用已知宮頸上皮細胞切片作陽性對照，PBS代替一抗作陰性對照。采用免疫組織化學(xué)的方法，對43例

6、腎透明細胞癌組織(按照病理分期，Ⅰ期17例、Ⅱ期16例、Ⅲ～Ⅳ期10例；按照臨床TNM分期，包括T1期14例、T2期13例、T3～4期16例)和20例正常腎組織切片進行PDCD5的免疫組化染色；對32例膀胱癌組織和10例正常膀胱組織切片進行PDCD5的免疫組化染色。采用人工閱片評分及計算機輔助染色強度判定2種方法判斷腎組織PDCD5的染色陽性率及染色強度，用單因素方差分析法及列聯(lián)表的卡方檢驗和關(guān)聯(lián)度測量判斷PDCD5的表達與正常腎、腎透

7、明細胞癌組織的相關(guān)性；采用人工閱片判斷膀胱組織PDCD5的染色陽性率。并用圖像分析系統(tǒng)對切片進行光密度分析。應(yīng)用SPSS10.0統(tǒng)計軟件對數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計學(xué)處理，采用列聯(lián)表的卡方檢驗分析和關(guān)聯(lián)度測量。 結(jié)果：免疫組織化學(xué)的結(jié)果顯示，在正常腎組織腎小管區(qū)中，PDCD5表達多呈強陽性，腎透明細胞癌組織表達隨著分期的增加呈遞減趨勢。正常腎組織、Ⅲ期、Ⅲ期、Ⅲ～Ⅳ期、T1期、T2期、T3～4期腎透明細胞癌組織之間PDCD5的平均光密度值分別

8、為0.180、0.160、0.141、0.121、0.160、0.145、0.130，按病理分型F=37.173，p=0.000，按TNM分型F=29.006，p=0.000。提示無論是病理分期還是臨床分期，PDCD5表達的平均光密度值在腎透明細胞癌各期差異有統(tǒng)計學(xué)意義。光鏡分析結(jié)果判定，按病理分型X3=34.175，p=0.000，列聯(lián)程度Gamma=-0.640，按TNM分型X3=26.185，p=0.000，列聯(lián)程度Gamma=-

9、0.627。兩種分期內(nèi)各級病變之間差異均有顯著性，并且負關(guān)聯(lián)，提示無論是病理分期還是臨床分期，PDCD5表達的平均光密度值在腎透明細胞癌各期差異有統(tǒng)計學(xué)意義，且隨著腎透明細胞癌分期的上升，PDCD5的表達逐漸下調(diào)。分組統(tǒng)計結(jié)果顯示不同性別、年齡腎透明細胞癌患者PDCD5表達無顯著性差異，提示腎透明細胞癌中PDCD5的表達在不同性別、年齡組中差異無統(tǒng)計學(xué)意義(t=0.330，P=0.743，t=0.373，P=0.711，P＞0.05)；

10、分組統(tǒng)計結(jié)果顯示腫瘤大小，有無轉(zhuǎn)移腎透明細胞癌患者PDCD5表達有顯著性差異，提示腎透明細胞癌中PDCD5表達在不同腫瘤大小，有無轉(zhuǎn)移組中差異有統(tǒng)計學(xué)意義(t=2.414，P=0.020；t=2.637，P=0.012)。正常膀胱、膀胱癌組織中PDCD5未見顯著表達。 結(jié)論： 1.在正常腎組織腎小管區(qū)中，PDCD5表達多呈強陽性，腎透明細胞癌組織表達隨著分期的增加呈遞減趨勢，可能是腎細胞癌組織表達的重要負性調(diào)控因子之一；