湖北省核盤菌多樣性及田間油菜花朵帶菌率與菌核病發(fā)生關(guān)系的研究.pdf

1、油菜菌核病菌是一種重要的植物病原菌，分布在世界各地，油菜菌核病在中國是油菜上最嚴(yán)重的疾病之一，給油菜生產(chǎn)造成巨大的損失。
　　本研究選取103個(gè)采自湖北省不同地區(qū)和寄主的核盤菌菌株，對其生物學(xué)特性和遺傳多樣性進(jìn)行研究;同時(shí)用分子手段檢測了田間油菜不同花期的花朵帶菌率，并將其與田間子囊盤數(shù)量、病害發(fā)生率進(jìn)行了相關(guān)性分析。2013年從湖北省7個(gè)市的12個(gè)采集點(diǎn)的9種寄主的發(fā)病植株上采集菌核，共分離得到153個(gè)核盤菌單菌核菌株。根據(jù)菌株

2、的地理來源和寄主來源，選取了103個(gè)菌株，對其生長速度、菌核產(chǎn)量、菌落顏色、致病力及草酸產(chǎn)量進(jìn)行了測定。結(jié)果表明，菌株在PDA培養(yǎng)基上的生長速度、菌核產(chǎn)量及在本氏煙葉片上致病力等方面具有顯著差異。菌株的平均生長速度為20.9mm/day，菌株的平均菌核產(chǎn)量（干重）為0.27g皿，菌落顏色分為黑色(10％)、米色(23％)和白色(67％)三種，菌株的草酸產(chǎn)量與菌株的生長速度呈正相關(guān)。以本氏煙葉片作為接種對象，對所有菌株進(jìn)行離體菌絲塊接種，

3、結(jié)果表明接種40h后菌株產(chǎn)生的平均病斑直徑為28.6mm。每個(gè)寄主上選取2個(gè)代表菌株在所有寄主上進(jìn)行致病力測定，結(jié)果表明不同寄主來源菌株在各個(gè)寄主上的致病力沒有明顯差異。
　　本研究從這103個(gè)菌株中選取了96個(gè)菌株用菌絲體親和群(MCG)測定了菌株的遺傳多樣性，總共得到71個(gè)菌絲體親和群(MCGs)，其中17個(gè)菌絲體親和群含有2-5菌株，其余54個(gè)親和群只含有一個(gè)菌株。另外，我們還采用8對微衛(wèi)星標(biāo)記引物對96個(gè)核盤菌菌株進(jìn)行遺傳

4、多樣性研究。8對引物均能穩(wěn)定擴(kuò)增出清晰的條帶，共擴(kuò)增出43條帶，條帶的片段大小在152-385bp之間。根據(jù)不同地理來源、不同寄主來源的菌株群體間的Nei氏遺傳距離，構(gòu)建系統(tǒng)進(jìn)化樹，結(jié)果顯示遺傳距離的遠(yuǎn)近與地理位置的遠(yuǎn)近、寄主親緣關(guān)系的遠(yuǎn)近沒有明確的關(guān)系。運(yùn)用Powermaker軟件基于Nei氏遺傳距離對供試96個(gè)核盤菌進(jìn)行聚類分析，結(jié)果表明菌株間存在較高的遺傳多樣性，這些菌株分為多個(gè)聚類群，但這些聚類群與菌絲體親和群包含的菌株有比較大

5、的差異。另外，我們還用STUCTURE軟件對96個(gè)核盤菌菌株進(jìn)行了群體結(jié)構(gòu)分析，結(jié)果表明這96個(gè)菌株菌株屬于兩個(gè)不同的類群。2013、2014年，我們采用巢式PCR的方法，檢測湖北黃州和武穴兩地區(qū)棉花-油菜和水稻-油菜兩種類型田塊油菜植株的花朵帶菌率。結(jié)果表明，兩地區(qū)兩種類型油菜田花朵帶菌率的變化趨勢相同，初花期開始逐漸升高，盛花期達(dá)到最高，之后又逐漸降低。兩地區(qū)棉花-油菜田的花朵帶菌率都高于水稻-油菜田的。接著，我們將不同花期的花朵帶