13158.超高分辨率顯微成像研究mlkl依賴的細(xì)胞壞死機(jī)制

1、第一章前言超高分辨率成像研究MLKL依賴的細(xì)胞壞死機(jī)制MECHANISTICINVESTI(訟TIONOFⅣ幾KLDEPENDENTCELLNECROSISVIASUPERRESOLUTIONIMAGING博士后姓名陳鑫流動(dòng)站(一級(jí)學(xué)科)名稱廈門大學(xué)生物學(xué)專業(yè)(二級(jí)學(xué)科)名稱細(xì)胞生物學(xué)研究工作起始時(shí)間2011年8月29日研究工作期滿時(shí)間2013年8月15日廈門大學(xué)人事部(廈門)2013年8月第一章前言摘要MLKL是細(xì)胞壞死信號(hào)通路中的一

2、個(gè)關(guān)鍵蛋白分子，而壞死與發(fā)育，組織損傷應(yīng)激以及病毒免疫等多種生理病理過(guò)程密切相關(guān)。之前已知人源的MLKL能夠被Rip3在T357和$358位點(diǎn)磷酸化，并且這種磷酸化對(duì)于MLKL的功能發(fā)揮和細(xì)胞壞死是至關(guān)重要的，但是對(duì)于MLKL如何在壞死過(guò)程中執(zhí)行功能知之甚少。我們構(gòu)建了一個(gè)將MLKL和激素結(jié)合區(qū)域融合表達(dá)并加入小分子40HT特異引發(fā)的MLKL二聚體的系統(tǒng)，該系統(tǒng)能夠在MLKL敲除的背景下介導(dǎo)L929細(xì)胞進(jìn)行不受Caspase8抑制劑(z

3、VAD)影響的壞死過(guò)程。將鼠源MLKL相應(yīng)磷酸化位點(diǎn)進(jìn)行缺失突變后仍然能夠在我們構(gòu)建的系統(tǒng)中介導(dǎo)細(xì)胞壞死，表明人源和鼠源MLKL在激活方式在的差異。利用40HT誘導(dǎo)的細(xì)胞壞死系統(tǒng)，我們嘗試了之前報(bào)道的幾種細(xì)胞壞死抑制劑，包括糖酵解抑制劑，ROS清除劑以及Src激酶抑制劑。沒有任何一種己知的抑制劑表現(xiàn)出明顯的抑制或者延遲效果，暗示細(xì)胞壞死可能采用目前未知的全新的下游執(zhí)行機(jī)制。有賴于API公司最新一代快速，超高分辨率的OMXV4成像系統(tǒng)，我